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上海撫生實(shí)業(yè)有限公司
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更新時間:2018-04-24 09:41:01瀏覽次數(shù):309次
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大鼠骨骼肌成肌細(xì)胞;L6價格冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3℃至–80℃以下,再放入液氮槽期儲存。-20℃不可超過1小時,以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中,但存活率稍微降低一些。
大鼠骨骼肌成肌細(xì)胞;L6價格冷凍保存方法一:冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(或隔夜)→液氮槽*儲存。
冷凍保存方法二:冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3℃至–80℃以下,再放入液氮槽期儲存。-20℃不可超過1小時,以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中,但存活率稍微降低一些。
細(xì)胞名稱 大鼠骨骼肌成肌細(xì)胞;L6價格
形態(tài)特性 成肌細(xì)胞
生長特性 貼壁生長
特征特性 L6成肌細(xì)胞株是Yaffe從甲基膽蒽存在下大鼠大腿肌的原代培養(yǎng)物zui初兩代中分離得到。 L6細(xì)胞在培養(yǎng)基中融合形成多核的肌管和橫紋肌纖維。 細(xì)胞融合的程度隨著代數(shù)的增加而下降,因而細(xì)胞應(yīng)冷凍于低代次階段并周期性地重新克隆以選擇融合能力強(qiáng)的細(xì)胞。 如果讓培養(yǎng)容器中的細(xì)胞長滿,這株細(xì)胞的成肌組分將迅速耗盡。 檢測表明肢骨發(fā)育畸形病毒(鼠痘)陰性。
培養(yǎng)條件 DMEM-H:
Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21
復(fù)蘇操作要點(diǎn):
1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準(zhǔn)備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2)將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫(可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細(xì)胞能盡快通過zui易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BIU-87(人膀胱癌細(xì)胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi),將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細(xì)胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細(xì)胞懸液。
5)將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶內(nèi),補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6)第二天觀察細(xì)胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細(xì)胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代,細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)
注意事項(xiàng):
1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們。
2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等。
3. 用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題貼壁細(xì)胞會有少量從瓶壁脫落,將細(xì)胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)過夜,隔天再取出觀察。此時多數(shù)細(xì)胞均會貼壁,若細(xì)胞仍不能貼壁請用臺盼藍(lán)染色測定細(xì)胞活力,如果證實(shí)細(xì)胞活力正常,請將細(xì)胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng);如果染色結(jié)果顯示細(xì)胞無活力,請拍下照片及時和我們,信息確認(rèn)后我們?yōu)槟倜赓M(fèi)寄送一次。
4. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶內(nèi)多余的培養(yǎng)基可收集備用,細(xì)胞傳代時可以一定比例和客戶自備的培養(yǎng)基混合,使細(xì)胞逐漸適應(yīng)培養(yǎng)條件。
5. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和公司技術(shù)部溝通交流。
6. 該細(xì)胞只能用于科研,不得用于臨床應(yīng)用。
公司是*的ATCC細(xì)胞供應(yīng)商,提供的報(bào)價,咨詢,稱技術(shù)服務(wù),咨詢選購。
Human Collectin ELISA Kit 人膠原凝集素Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-SMC1 染色體結(jié)構(gòu)維持蛋白質(zhì)1抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Goat anti-Rabbit IgG whole serum 羊抗兔IgG抗血清 規(guī)格 1ml
PCNA ELISA Kit 大鼠抗增殖細(xì)胞核抗原抗體 96T
NUPR1 英文名稱: 核蛋白p8抗體 0.1ml
BAIAP2L2 英文名稱: BAIAP2L2蛋白抗體 0.1ml
Anti-SMC1 染色體結(jié)構(gòu)維持蛋白質(zhì)1抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
SHBG(Human sex hormone-binding globulin) ELISA Kit 人性激素結(jié)合球蛋白Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-phospho-LKB1(Thr363) 磷酸化*/*蛋白激酶抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh KLHL36/C16orf44 Kelch樣蛋白36抗體 規(guī)格 0.2ml
Cav-1 ELISA Kit 大鼠窖蛋白Caveolin1 96T
Prohibitin 英文名稱: 抑制素/抑制因子抗體 0.1ml
CDO1 英文名稱: 半胱酸雙加氧酶1抗體 0.2ml
Anti-phospho-LKB1(Thr363) 磷酸化*/*蛋白激酶抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Anti-KLK14/FITC 熒光素標(biāo)記*14抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Anti-phosphor-SMAD(p-Ser425)、phosphor-Mothers against decapentaplegic/FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化SMAD抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh ALG11 天*連接糖基化11抗體 規(guī)格 0.2ml
Rabbit Anti-human IgG/PE-Cy3 PE-Cy3標(biāo)記的兔抗人IgG 0.1ml
GRB 14 英文名稱: 生長因子受體結(jié)合蛋白14抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Anti-Guinea pig IgG/PE-Cy7 PE-Cy7標(biāo)記的兔抗豚鼠IgG 規(guī)格 0.1ml
Anti-phosphor-SMAD(p-Ser425)、phosphor-Mothers against decapentaplegic/FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化SMAD抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
大鼠的血清白蛋白殘留檢測ELISA Kit 大鼠的血清白蛋白殘留檢測Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-VAP1 血管粘附蛋白1抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh GATA-3 GATA結(jié)合蛋白3抗體 規(guī)格 0.1ml
BDNF(Human Brain derived neurotrophic facor) ELISA Kit 人腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子 96T
phospho-NF1(Ser2817) 英文名稱: 磷酸化1型神經(jīng)纖維瘤抗體 0.1ml
ARHGAP32 英文名稱: Rho GTP酶激活蛋白32抗體 0.2ml
Anti-VAP1 血管粘附蛋白1抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
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