OrigamiB(DE3)pLysS 感受態(tài)細胞100ul*10規(guī)格操作方法:
1. 從-80℃拿出,迅速插入冰中,5分鐘后待菌塊融化,加入目的DNA (質(zhì)粒或連接產(chǎn)物) 并用手EP管底輕輕混勻 (避免用槍吸打),冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒,迅速放回冰上并靜置2分鐘,晃動會降低轉(zhuǎn)化效率。
3. 向離心管中加入0.9 mL室溫S.O.C.或LB培養(yǎng)基(S.O.C.營養(yǎng)豐富,可提高轉(zhuǎn)化效率)。
4. 37℃,225 rpm復(fù)蘇60分鐘或30℃,225 rpm復(fù)蘇90分鐘。
(當質(zhì)粒中含有不穩(wěn)定片段時,30℃培養(yǎng)可降低錯誤重組的概率,若轉(zhuǎn)化control pUC19計算轉(zhuǎn)化效率,則需37℃,225 rpm復(fù)蘇60分鐘)
5. 5000rpm離心一分鐘收菌,留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應(yīng)抗生素的S.O.C. 或LB培養(yǎng)基上。
6. 將平板倒置放于37℃或30℃培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)。
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OrigamiB(DE3)pLysS 感受態(tài)細胞100ul*10規(guī)格注意事項:
1. 感受態(tài)細胞在冰中緩慢融化,插入冰中8分鐘內(nèi)加入目標DNA,不可在冰中放置時間過長,長時間存放會降低轉(zhuǎn)化效率。
2. 混入質(zhì)?;蜻B接產(chǎn)物時應(yīng)輕柔操作。
3. 轉(zhuǎn)化高濃度的質(zhì)?;蚋咝实倪B接產(chǎn)物可相應(yīng)減少終用于涂板的菌量。
?購買客戶請先與我司細胞銷售人員核實訂購的OrigamiB(DE3)pLysS 感受態(tài)細胞100ul*10規(guī)格、種屬、貨號、數(shù)量、協(xié)商細胞價格并預(yù)約發(fā)貨期與提取方式。向銷售人員索取細胞說明書并認真閱讀以方便你的實驗操作。
KM小鼠未分化神經(jīng)膠質(zhì)瘤瘤株;B22
豬細胞;ST
MTDH Others Human 人 MTDH / lyric / metadherin 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)
U251細胞,膠質(zhì)瘤細胞 鼠成纖維細胞系,NIH/3T3細胞 人肺巨細胞癌低轉(zhuǎn)移細胞株;PG-LH7
人肺動脈內(nèi)皮細胞RNAHPASMC miRNA5 μg
PDCD1 Others Mouse 小鼠 PD1 / PDCD1 人細胞裂解液 (陽性對照)
人生發(fā)基質(zhì)細胞HHGMC
IFNA8 Others Human 人 Ierferon alpha-B / IFNA8 人細胞裂解液 (陽性對照)
大耳山羊腎細胞;LDG-2
A549/DDP細胞,耐DDP肺癌細胞 中國倉鼠肺細胞,CHL細胞 CM-M002小鼠肺血管平滑肌細胞*培養(yǎng)基100mL
S-180(小鼠肉瘤細胞) 5×106cells/瓶×2
Gibco 10639011 STEM PRO-34- COMBO 500ml
KM小鼠未分化神經(jīng)膠質(zhì)瘤瘤株;B22
豬細胞;ST
MTDH Others Human 人 MTDH / lyric / metadherin 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)
U251細胞,膠質(zhì)瘤細胞 鼠成纖維細胞系,NIH/3T3細胞 人肺巨細胞癌低轉(zhuǎn)移細胞株;PG-LH7
人肺動脈內(nèi)皮細胞RNAHPASMC miRNA5 μg
PDCD1 Others Mouse 小鼠 PD1 / PDCD1 人細胞裂解液 (陽性對照)
/胡蘿卜酸/甜菜酸//甲烷二羧酸/丙烷二羧酸/ CP,98%, 100克 國產(chǎn)/進口
10Bshēng huà shì jì容量:100毫克
BETA-葡萄糖全醋苷酶(-20℃) qC 3.2.1.31 9001-42-0
Bis(hexylene glycolato)diboron 230299-21-5
無砷鋅粒/亞鉛粉/鋅/Zinc AR,10-20目 500克 國產(chǎn)
尿*測試盒shēng huà shì jì容量:1個
四羌基-1,4-本醌二內(nèi)鹽 TqTRcxy7noXY-1,4-BqNZOinoneONq DIwo7ium ScLT 1887-0-1
4-Amino-3-nitno-N,N-dimetxylaniline 16293-12-2
一正丁胺 n-Butylamine,≥99% 109-73-9 100ML 通用試劑
Yariv′s Reagent BR 25/100毫升 國產(chǎn)/進口
OrigamiB(DE3)pLysS 感受態(tài)細胞100ul*10規(guī)格皮粉(含鉻)shēng huà shì jì容量:RT,避光5克
628-71-71-庚炔1-Heptyne
2-bromo-5-pxenylthiopxene 29488-24-2
間二苯 1,3-Dichlorobenzene,≥99.0% 541-73-1 50ML 表面活性劑
石油迷 90-100℃ Nc
OrigamiB(DE3)pLysS 感受態(tài)細胞100ul*10規(guī)格細胞的種類:
*種:
是凍存產(chǎn)品,由液氮直接拿出,干冰運輸給客戶。一般不*這種,也較少使用這種方式,因為復(fù)蘇手法對于細胞狀態(tài)影響較大,一旦細胞狀態(tài)不好,很難說是細胞自身不行,還是復(fù)蘇沒操作好;另外溫度對細胞、基因功能狀態(tài)影響很大,也不是細胞儲存的zui好方式,快遞時間也很難控制,多種因素影響產(chǎn)品的質(zhì)量;干冰運輸需要額外添加400元的運費(順豐)。
第二種:
是我們復(fù)蘇好細胞,QC通過后,T-25灌滿培養(yǎng)基常溫運輸給客戶,排除復(fù)蘇造成影響,常溫運輸也對細胞影響也不大,只需加25元運費(順豐)。
質(zhì)量保證:我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實驗室擴增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,*進口來源,*保證5代以內(nèi),活力>95%,無細菌、真菌、支原體污染。