OrigamiB(DE3) 感受態(tài)細(xì)胞100ul*10說明書訂購說明：
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OrigamiB(DE3) 感受態(tài)細(xì)胞100ul*10說明書保 存：-70℃保存，運(yùn)輸為干冰包裝。自收貨之日起液氮保存至少一年，-70℃保存至少6個(gè)月。
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 |
OrigamiB(DE3) 感受態(tài)細(xì)胞100ul*10說明書 | 100ul*10 |
OrigamiB(DE3) 感受態(tài)細(xì)胞100ul*10說明書注意事項(xiàng)
1．感受態(tài)細(xì)胞一定要用干冰運(yùn)輸。感受態(tài)細(xì)胞應(yīng)在 -80℃下保存，不可反復(fù)凍融和放置時(shí)間過長，以免降低感受態(tài)細(xì)胞的轉(zhuǎn)化效率。
2．轉(zhuǎn)化所有步驟均在無菌條件下操作。
3．包裝中有0.1ng/μl的pUC19DNA，供對照試驗(yàn)使用
C57小鼠黑色素瘤瘤株;ME (Me)
水貂肺上皮細(xì)胞;Mv.1.Lu(NBL-7)
ADK Others Human 人 ADK 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
SHG-44細(xì)胞，膠質(zhì)瘤細(xì)胞 NCTC克隆929細(xì)胞,L129細(xì)胞 人T淋巴瘤細(xì)胞Jurkat亞系;Jurkat77
人腎系膜細(xì)胞RNAHRMC miRNA5 μg
EFNB1 Others Human 人 EphrinB1 / EFNB1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
人生發(fā)基質(zhì)細(xì)胞總RNAHHGMC NA
EFNA5 Others Canine 狗 Ephrin-A5 / EFNA5 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
二氫*還原酶缺陷型中國倉鼠卵巢細(xì)胞;CHO/dhFr-
SW1990細(xì)胞，人胰腺癌細(xì)胞 人胸膜瘤細(xì)胞,SMC-1細(xì)胞 雜交瘤(B類);Z51B3C10H12A12G2F7E7
HUVEC(HUV-EC-C) (人臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2
Promocell C-22022 Endothelial Cell GrowthMedium MV2, 內(nèi)皮細(xì)胞生長培養(yǎng)基MV2(即用型) 500ml
C57小鼠黑色素瘤瘤株;ME (Me)
水貂肺上皮細(xì)胞;Mv.1.Lu(NBL-7)
ADK Others Human 人 ADK 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
SHG-44細(xì)胞，膠質(zhì)瘤細(xì)胞 NCTC克隆929細(xì)胞,L129細(xì)胞 人T淋巴瘤細(xì)胞Jurkat亞系;Jurkat77
人腎系膜細(xì)胞RNAHRMC miRNA5 μg
EFNB1 Others Human 人 EphrinB1 / EFNB1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
0.2ml薄壁管shēng huà shì jì容量：5克
439-95-4
DNA產(chǎn)物純化Kitshēng huà shì jì容量：RT100克
3-苯基酚 3-Phenylphenol,97% 580-51-8 1G 通用試劑
錳片/錳/金屬錳/Manganese AR，99.95% 25克 國產(chǎn)/進(jìn)口
尿苷-5′-單嶙酸二鈉鹽，英文名或英文縮寫：5′-UMP，2Na，級別：高純，98%，規(guī)格：250毫克
四水鱗醋輕銨內(nèi) wo7ium cMMONIUM xy7noGqN PHOSPHcTq TqTRcHYDRcTq 7783-13-3
4-Benzyloxy-2,3-difluoropxenylboronic acid 156635-87-9
落新婦苷 Astilbin (≥98%,HPLC) 29838-67-3 20MG 標(biāo)準(zhǔn)品
D-丙酸/D-2-基丙酸/D-基丙酸/D-初油基酸/D-絲析酸/D-Alanine BR，99% 5克 國產(chǎn)/進(jìn)口
OrigamiB(DE3) 感受態(tài)細(xì)胞100ul*10說明書皮脂酸乙酯，英文名或英文縮寫：Dietxyl sebacate，級別：GCS，規(guī)格：500克
595-90-4四本基錫Tetrapxenyl tin
N-芴甲氧羰基-L-色酸，英文名或英文縮寫：Fmoc-Trp-OH，級別：特純，98.5%，規(guī)格：25克
丙酸鈣 Calcium propionate 4075-81-4 100G 通用試劑
1,2-雙(二甲基瞵) 1,2-Bis(dimethylphosphino)ethane,97% 23936-60-9 250MG 通用試劑
操作步驟
1．取感受態(tài)細(xì)胞置于冰浴中。一次轉(zhuǎn)化感受態(tài)細(xì)胞的建議用量為50-100可以根據(jù)實(shí)際情況分裝使用。以下實(shí)驗(yàn)以50μl感受態(tài)細(xì)胞為例。
2．待感受態(tài)細(xì)胞融化后，向感受態(tài)細(xì)胞懸液中加入目的DNA（根據(jù)實(shí)際情況加入適量的DNA，通常100 μl感受態(tài)細(xì)胞能夠被1 ng超螺旋質(zhì)粒DNA所飽和），用移液器輕輕吹打混勻，冰浴30分鐘。
3．42℃熱擊45秒，迅速將離心管轉(zhuǎn)移到冰浴中，冰上靜置2-3分鐘
4．每個(gè)離心管中加入450μl無菌的SOC或LB培養(yǎng)基（不含抗生素），混勻后置于37℃搖床，150rpm振蕩培養(yǎng)45分鐘使菌體復(fù)蘇
5．根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求，取適量已轉(zhuǎn)化的感受態(tài)細(xì)胞，加到含相應(yīng)抗生素的或LB固體瓊脂培養(yǎng)基上，用無菌的涂布棒將細(xì)胞均勻涂開，將平板置于37℃直至液體被吸收，倒置培養(yǎng)，37℃培養(yǎng)12-16小時(shí)。
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