細(xì)胞：NCTC2472細(xì)胞

中文名稱：小鼠纖維肉瘤細(xì)胞

生長特性：貼壁細(xì)胞

培養(yǎng)基：DMEM-H +10%FBS（GIBCO胎牛血清）

凍存條件：50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO

細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程（ 請嚴(yán)格遵照無菌操作）

1． 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS 緩沖液潤洗細(xì)胞兩次，加 2-3 ml 0.25% 胰_酶進行消化細(xì)胞（注意把握消化時間，通?？刂圃?1-2min）

2． 鏡下觀察消化情況，在細(xì)胞邊緣縮小，貼壁松動時（不建議消化到細(xì)胞漂?。┤サ粢萠酶，加 6~8ml 培養(yǎng)基，輕輕吹打細(xì)胞層，盡量把細(xì)胞層吹落，吹散。

3． 取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中，添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基，把細(xì)胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

4． 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況，定期換液（每周 2-3 次），待細(xì)胞密度達(dá)到 80%以后重復(fù) 1 項操作或凍存。

（網(wǎng)絡(luò)信息主針對網(wǎng)絡(luò)推廣作用，僅供參考，細(xì)胞培養(yǎng)請咨詢細(xì)胞庫管理員，以細(xì)胞庫管理員提供給您的信息為準(zhǔn)，操作前，如果有不明白之處，先咨詢細(xì)胞庫管理員，避免不必要的損失；）

光遺傳學(xué)涉及到對神經(jīng)元進行遺傳修飾，使其產(chǎn)生一種光敏蛋白，當(dāng)暴露在光照中時就會發(fā)送電信號。到目前為止光遺傳學(xué)技術(shù)主要被用于研究大腦如何工作。

探索將其作為一種治療手段的可行性，但對大腦進行不可逆的基因操控所引發(fā)的擔(dān)憂成為他們面臨的最大障礙。

在實驗室里修改了小鼠的干細(xì)胞，然后將它們移植到小鼠的腿部神經(jīng)中。這樣做的目的是，一旦有問題出現(xiàn)，移植的干細(xì)胞能夠更容易被去除。

研究在小鼠胚胎干細(xì)胞中插入了編碼光響應(yīng)蛋白的藻類基因，通過添加信號分子，使干細(xì)胞發(fā)育成負(fù)責(zé)讓信號在脊髓和身體其他部位來回傳遞的運動神經(jīng)元。

接下來這些神經(jīng)元被植入自身神經(jīng)已被切斷的小鼠的坐骨神經(jīng)。待5周后植入神經(jīng)元與肌肉融合，研究對小鼠實施了麻醉，剖開其皮膚，并用藍(lán)色脈沖光照射神經(jīng)。他們觀察到，小鼠腿部肌肉產(chǎn)生了收縮反應(yīng)。

目前大部分正在開發(fā)的針對癱瘓病人的治療方法都需要對他們的神經(jīng)或肌肉進行電刺激。如果患者的痛神經(jīng)元仍能工作，這可能給他們帶來痛苦。此外，電刺激會使肌肉收縮過于用力，很快出現(xiàn)肌肉疲勞。而光遺傳學(xué)方法對肌纖維的刺激則更為平緩。

為了讓這項技術(shù)更適用于人體，研究正在開發(fā)一種護腕形式的發(fā)光二極管，其可與皮膚下的微型電池組相連，作用于周圍神經(jīng)。他們還試圖用患者皮膚培育的誘導(dǎo)多能干細(xì)胞(iPS細(xì)胞)來替代胚胎干細(xì)胞，這樣患者就無需借助藥物來抑制免疫反應(yīng)。

目標(biāo)是幫助那些無力控制呼吸肌的運動神經(jīng)元病人。正在研制一個可以反復(fù)照亮胸膈神經(jīng)的心臟起搏器，并計劃在豬身上進行測試，希望用它恢復(fù)豬的呼吸能力。