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當前位置:上海撫生實業(yè)有限公司>>生化檢測試劑盒>>海藻糖系列>> TPP海藻糖6磷酸酯酶檢測試劑盒微量法
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產(chǎn)品型號
品 牌
廠商性質經(jīng)銷商
所 在 地上海市
更新時間:2022-03-17 20:54:25瀏覽次數(shù):230次
聯(lián)系我時,請告知來自 智慧城市網(wǎng)貨號 | FS-01S63603 |
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商品介紹:
測定意義
海藻糖是功能性低聚糖,具有非還原性、保濕性、熱酸穩(wěn)定性、抗凍結性等特性,是細胞在不良環(huán)境條件下產(chǎn)生的一種重要的抗逆應激物之一,它對生物大分子和生物體組織有著非特異性的保護作用。海藻糖合成酶(Trehalose Synthase)催化麥芽糖合成海藻糖,是海藻糖生物合成的關鍵途徑之一。
測定原理:
TS催化麥芽糖產(chǎn)生海藻糖,使用糖化酶分解剩余麥芽糖為葡萄糖,通過葡萄糖氧化酶法測定葡萄糖含量,按照麥芽糖減少的量表示海藻糖合酶活性。
需自備的儀器和用品:
分光光度計、水浴鍋、可調式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 檢測方法 | 規(guī)格 | 貨號 |
TPP海藻糖6磷酸酯酶檢測試劑盒微量法 | 微量法 | 100管/48樣 | FS-01S63603 |
產(chǎn)品內(nèi)容:
酸性提取液:25mL×1 瓶,4℃保存;
堿性提取液:25mL×1 瓶,4℃保存;
試劑一:液體 5mL×1 瓶,4℃保存;
試劑二:液體 1.5mL×1 支,4℃保存
試劑三:粉劑×1 支,-20℃保存,用時加入 1.6mL 雙蒸水,混勻,4℃保存一周;
試劑四:粉劑×1 支,4 ℃保存,用時加入 1.9mL 雙蒸水,混勻,4℃保存一周;
試劑五:液體 0.7mL×1 支,4 ℃保存;
試劑六:液體 10mL×1 瓶,4 ℃保存;
試劑七:自備。19.2mL 乙醇和 0.8mL 蒸餾水充分混合備用。
NAD 標準品:粉劑×1 支,-20℃保存。臨用前加入 1.5mL 蒸餾水,即 2umol/mL,將其稀釋為 1.25nmol/mL 的 NAD 標準溶液備用。
NADH 標準品:粉劑×1 支,-20℃保存。臨用前加入 1.4mL 蒸餾水,即 2umol/mL,將其稀釋為 1.25nmol/mL 的 NADH 標準溶液備用。
操作步驟:
一、NAD+和 NADH 的提取:
1、血清(漿)中 NAD+和 NADH 的提?。?/span>
NAD+的提?。喝?0.1mL 血清(漿),加入 0.5mL 酸性提取液,煮沸 5min (蓋緊,以防止水分 散失),冰浴冷卻后,10000g 4℃離心 10min;取上清 200uL,加入等體積堿性提取液;混勻,10000g 4℃離心 10min,取上清,冰上保存待測。
NADH 的提取:取 0.1mL 血清(漿),加入 0.5mL 堿性提取液,煮沸 5min(蓋緊,以防止水分 散失),冰浴冷卻后,10000g 4℃離心 10min,取上清 200uL,加入等體積酸性提取液;混勻,10000g 4℃離心 10min,取上清,冰上保存待測。
2、組織中 NAD+和 NADH 的提取:
NAD+的提?。悍Q取約 0.1g 組織,加入 0.5mL 酸性提取液,冰浴研磨,煮沸 5min(蓋緊,以防 止水分散失),冰浴冷卻后,10000g 4℃離心 10min,取上清 200uL,加入等體積堿性提取液混勻, 10000g 4℃離心 10min,取上清,冰上保存待測。
NADH 的提取:稱取約 0.1g 組織,加入 0.5mL 堿性提取液,冰浴研磨,煮沸 5min(蓋緊,以防 止水分散失),冰浴冷卻后,10000g 4℃離心 10min,取上清 200uL,加入等體積酸性提取液混勻, 10000g 4℃離心 10min,取上清,冰上保存待測。
3、細胞或細菌中 NAD+和 NADH 的提?。?/span>
NAD+的提?。菏占?500 萬細胞或細菌,加入 0.5mL 酸性提取液,超聲波破碎 1min(強度 20% 或 200W,超聲 2s,停 1s),煮沸 5min(蓋緊,以防止水分散失),冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心 10min,取上清液 200uL 另一新的離心管中,加入等體積的堿性提取液使之中和,混勻,10000g 4℃ 離心 10min,取上清,冰上保存待測。
NADH 的提取:收集 500 萬細胞或細菌,加入 0.5mL 堿性提取液,超聲波破碎 1min(強度 20% 或 200W,超聲 2s,停 1s),煮沸 5min(蓋緊,以防止水分散失),冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心 10min,取上清液 200uL 另一新的離心管中,加入等體積的酸性提取液使之中和,混勻,10000g 4℃ 離心 10min,取上清,冰上保存待測。
注意事項:
1、公司產(chǎn)品僅用于科研操作過程應避光。不可將試劑一、二、三和四混合后再加,必須分開加。
2、反應過程要注意避光。
3、當吸光值大于 1 時,建議稀釋后測量,計算公式中應當乘以稀釋倍數(shù)。
下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品:
豬載脂蛋白C3(ApoC3)聯(lián)免疫試劑盒 LuteolibacterPdx1 (D59H3) XP® Rabbit mAb
豬血管緊張II (ANG II)聯(lián)免疫試劑盒 小葉相思根瘤Pdx1 (D59H3) XP® Rabbit mAb
豬腎小球組織糖基化終末產(chǎn)物(GTEAGE)聯(lián)免疫試劑盒 類諾卡氏屬IWS1 Antibody
豬N-乙酰β-D-基葡萄糖苷(NAGase)聯(lián)免疫試劑盒梭屬MEF2D Antibody
豬解整合金屬蛋白10(ADAM10)聯(lián)免疫試劑盒 蘇云金芽胞桿亞亞種HSP60 (D6F1) XP® Rabbit mAb (PE Conjugate)
豬脫氧核糖核I(DNase-I)聯(lián)免疫試劑盒 叢毛紅曲PERK (D11A8) Rabbit mAb
豬Ⅲ型膠原(COL3)聯(lián)免疫試劑盒 東方伊薩酵母PERK (D11A8) Rabbit mAb
豬雷帕霉靶蛋白(mTOR)聯(lián)免疫試劑盒 釀酒酵母EAAT1 (D44E2) XP® Rabbit mAb
豬促睡眠肽α(δSIP-α)聯(lián)免疫試劑盒 蠟樣芽孢桿EAAT1 (D44E2) XP® Rabbit mAb
豬甘露聚糖結合凝集相關絲蛋白1(MASP1)聯(lián)免疫試劑盒 禽白血病病α-Smooth Muscle Actin (1A4) Mouse mAb (IHC Formulated)
豬CCAAT增強子結合蛋白δ(C/EBPδ)聯(lián)免疫試劑盒 淡紫青霉EAAT1 (D20D5) Rabbit mAb
豬C型鈉尿肽(CNP)聯(lián)免疫試劑盒 印度芽孢桿PPP2R4 (5G3) Mouse mAb
豬普列克底物蛋白同源物樣結構域家族A成員2(PHLDA2)聯(lián)免疫試劑盒洋蔥伯克霍爾德氏PPP2R5D (H5D12) Mouse mAb
豬粘蛋白5B(MUC5B)聯(lián)免疫試劑盒絨毛栓PPP2R2A (2G9) Mouse mAb
豬XV 型膠原(COL15)聯(lián)免疫試劑盒 酮丁梭PPP2R2A (2G9) Mouse mAb
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