輔酶ⅠNAD(H)活性測(cè)試盒_微量法(輔酶Ⅰ類(lèi))

產(chǎn)品規(guī)格 : 100管/48樣

質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)：企業(yè)標(biāo)準(zhǔn)

測(cè)試方法：微量法

產(chǎn)品包裝：液體盒裝

運(yùn)輸條件：快遞包郵

應(yīng)用范圍：僅供科研研究使用

保存條件：低溫避光保存

供 應(yīng) 商： 上海紀(jì)寧實(shí)業(yè)有限公司

測(cè)定意義：

輔酶ⅠNAD(H)廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中，NAD+是糖酵解（EMP）和三羧酸循環(huán)（TCA）的主要?dú)涫荏w，生成的 NADH 經(jīng)呼吸電子鏈（ETC）傳遞把電子交給氧， 在合成 ATP 的同時(shí)，形成大量的 ROS，同時(shí)NADH 再生為 NAD+。糖、脂、蛋白質(zhì)三大代謝物質(zhì)分解中的氧化反應(yīng)絕大部分通過(guò)這一體系完成。NAD(H)含量和 NADH/NAD+比值的高低可用于評(píng)價(jià)糖酵解和 TCA 循環(huán)的強(qiáng)弱。較高的 NAD(H)及 NADH/NAD+比值說(shuō)明細(xì)胞呼吸耗氧量較高，處于過(guò)氧化狀態(tài)。此外，NADH/NAD+比值升高也可抑制糖酵解和 TCA 循環(huán)。另外，NAD+降解產(chǎn)物對(duì)細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)、代謝和基因表達(dá)等具有重要的調(diào)控作用。

測(cè)定原理：

分別用酸性和堿性提取液提取樣品中 NAD+和 NADH，NADH 通過(guò) PMS 的遞氫作用，還原氧化型噻唑藍(lán)（MTT）為甲瓚，在 570nm 下檢測(cè)吸光值；而 NAD+可被乙醇脫氫酶還原為NADH，進(jìn)一步采用 MTT 還原法檢測(cè)。

需自備的儀器和用品：

可見(jiàn)分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、移液器、1 mL 玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。

注  意：

正式測(cè)定之前選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測(cè)定。

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試劑的組成和配制：

酸性提取液：液體 50mL×1 瓶，4℃保存； 堿性提取液：液體 50mL×1 瓶，4℃保存；

試劑一：液體 15 mL×1 瓶，4℃保存；

試劑二：液體 4 mL×1 瓶，4℃保存；

試劑三：粉劑×1 瓶，-20 ℃保存，用時(shí)加入 4mL 蒸餾水，混勻，用不完的試劑 4℃保存一周；

試劑四：粉劑×1 瓶，4 ℃保存，用時(shí)加入 4mL 蒸餾水，混勻，用不完的試劑 4℃保存一周；

試劑五：液體 1.8mL×1 支，4 ℃保存；

試劑六：液體 30mL×1 瓶，4 ℃保存；

試劑七：液體 50mL×1 瓶，4 ℃保存。