人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞H125細(xì)胞

一、放射自顯影
1.把干燥的凝膠或印跡緊密貼放在X-射線膠片乳膠層上。Kodak XAR或Fuji RX膠片比較合適。帶有14C或35S標(biāo)記的印跡或樣品必須按正確的方向把正面貼在膠片上以保證充分曝光。
2.在室溫下置于一個(gè)密封蔽光的容器中適當(dāng)時(shí)間。
3.根據(jù)制造商推薦的方法操作。
二、PPO熒光顯影
PPO-浸潤凝膠  
1.電泳后或染色后，把凝膠放入脫色劑（7%冰醋酸，25%甲醇）振蕩30分鐘。小心倒掉脫色劑、DMSO廢液并去掉多余水分。加入5倍凝膠體積的DMSO廢液。
2.試問下振蕩45分鐘，去掉DMSO廢液，再加入5倍凝膠體積的新鮮DMSO。
3。室溫下振蕩45分鐘，把DMSO導(dǎo)入DMSO廢液貯存器，在DMSO中加入5倍凝膠體積的22%PPO。
4.試問下振蕩45分鐘，把PPO/DMSO倒回貯液器，作為日常工作，這個(gè)溶液可再次使用（一個(gè)帶有35S的甲硫氨酸的500ml原液可供使用。
5.那PPO浸潤的凝膠放在緩緩流動的水中，當(dāng)PPO擴(kuò)散出來是，凝膠立即變白。
6.用新鮮的水流輕輕沖洗30分鐘到一個(gè)小時(shí)，取出凝膠并按常法干燥。
7.把凝膠或印跡緊密貼在X射線膠片乳化層上。
8.置于一個(gè)-70攝氏度的密封蔽光的容器中適當(dāng)時(shí)間。
9.根據(jù)儀器制造商上海通派生物科技有限公司推薦的方法操作。
注意事項(xiàng)
如果凝膠上蛋白質(zhì)使用的是3H放射標(biāo)記同位素，膠片應(yīng)預(yù)先曝光以便在放射性衰變與膠片變黑程度間保持一個(gè)線性關(guān)系。
有一些公司供應(yīng)商品話的PPO替代物 它們使用方便，但比PPO要貴許多。
用增感屏
1.把一張X-射線膠片放在烏酸鈣增感屏上。然后把凝膠或印跡正確貼放在膠片乳膠層上。
2.置于一個(gè)-70攝氏度的密封、蔽光的容器里適當(dāng)時(shí)間。
3.按供應(yīng)商的說明操作。

人胚肺成纖維細(xì)胞MRC-5  
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SV-40Z轉(zhuǎn)化肺成纖維細(xì)胞WI38/VA13  
人胚肺二倍體細(xì)胞2BS  
人胚肺二倍體細(xì)胞KMB-17  
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人胚肺二倍體細(xì)胞HEL-1  
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人肺轉(zhuǎn)化細(xì)胞系A(chǔ)E1201    
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人胚肺二倍體細(xì)胞HEL-2  
人支氣管上皮樣細(xì)胞BEAS-2B  
人胚肺轉(zhuǎn)化細(xì)胞SL-1  
人肺腺癌細(xì)胞Calu-3  
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