細(xì)胞消化法 傳代培養(yǎng)
具體操作:
一. 傳代前準(zhǔn)備:
1.預(yù)熱培養(yǎng)用液:把已經(jīng)配制好的裝有培養(yǎng)液、PBS液和胰蛋白酶的瓶子放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱。
2.用75%酒精擦拭經(jīng)過紫外線照射的超凈工作臺和雙手。
3.正確擺放使用的器械:保證足夠的操作空間,細(xì)胞消化法 傳代培養(yǎng) 不僅便于操作而且可減少污染。
4.點(diǎn)燃酒精燈:注意火焰不能太小。
5.準(zhǔn)備好將要使用的消毒后的空培養(yǎng)瓶,放入微波爐內(nèi)高火,8分鐘再次消毒。
6.取出預(yù)熱好的培養(yǎng)用液:取出已經(jīng)預(yù)熱好的培養(yǎng)用液,用酒精棉球擦拭好后方能放入超凈臺內(nèi)。
7.從培養(yǎng)箱內(nèi)取出細(xì)胞:注意取出細(xì)胞時(shí)要旋緊瓶蓋,用酒精棉球擦拭顯微鏡的臺面,再在鏡下觀察細(xì)胞。
8.打開瓶口:將各瓶口一一打開,同時(shí)要在酒精燈上燒口消毒。
二.胰蛋白酶消化;
1.加入消化液:小心吸出舊培養(yǎng)液,用PBS清洗(沖洗),加入適量消化液(胰蛋白酶液),注意消化液的量以蓋住細(xì)胞,*消化溫度是37℃。
2. 顯微鏡下觀察細(xì)胞:倒置顯微鏡下觀察消化細(xì)胞,若胞質(zhì)回縮,細(xì)胞之間不再連接成片,表明此時(shí)細(xì)胞消化適度。
3.吸棄消化液加入培養(yǎng)液:棄去胰蛋白酶液,注意更換吸管,加入新鮮的培養(yǎng)液。
細(xì)胞株查詢:
ACHN 人腎癌細(xì)胞系(ACHN)
AGS 人胃腺癌細(xì)胞
AN3 CA 人子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞(AN3 CA)
Ana-1 小鼠巨噬細(xì)胞
Anglne 人卵巢癌細(xì)胞系(Anglne)
AR42J 胰腺細(xì)胞AR42J
AsPC-1 人轉(zhuǎn)移胰腺腺癌細(xì)胞
B82 鼠細(xì)胞系(B82)
B95-8 絨猴EBV轉(zhuǎn)化的白細(xì)胞
BALB/3T3 clone A31 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞
Bcap-37 人乳腺癌細(xì)胞Bcap-37
Bel-7402 人肝癌細(xì)胞系(Bel-7402)
BEL-7404 人肝癌細(xì)胞
BEL-7405 人肝癌細(xì)胞
Bewo 人絨毛膜腫瘤細(xì)胞系(Bewo)
BGC-823 人胃腺癌細(xì)胞(低分化)
BHK-21 敘利亞倉鼠腎細(xì)胞系(BHK-21)
BI U-87 膀胱癌細(xì)胞(BI U-87)
BRL 大鼠肝細(xì)胞
BSC-1 猴腎細(xì)胞系(BSC-1)
BSG823 人胃癌BSG823
BT-474 [BT474] 人乳腺導(dǎo)管癌細(xì)胞
BT-549 人乳腺管癌細(xì)胞
BxPC-3 人原位胰腺腺癌細(xì)胞
C127 小鼠乳腺腫瘤細(xì)胞
C2C12 小鼠成肌細(xì)胞C2C12
C-33A 人子宮癌細(xì)胞C-33A
C3H/10T1/2, Clone 8 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞
C6 大鼠膠質(zhì)瘤細(xì)胞
C6/36 蚊子細(xì)胞(C6/36)
C8-D1A 鼠小腦細(xì)胞C8-D1A
Ca Ski 人宮頸癌腸轉(zhuǎn)移細(xì)胞
CA46 Burkitts淋巴瘤細(xì)胞系(CA46)
Caco-2 人結(jié)腸腺癌細(xì)胞
CaES-17 人食管癌細(xì)胞CaES-17
Caki-1 人腎透明細(xì)胞癌皮膚轉(zhuǎn)移細(xì)胞
Calu-3 人肺腺癌 (胸水)
Calu-6 人退行性癌細(xì)胞
Caov-3 人乳突狀卵巢腺癌細(xì)胞(Caov-3)
Caski 人宮頸上皮細(xì)胞癌(Caski)
CBRH-7919 大鼠肝癌細(xì)胞
CCD-1095Sk 人乳腺浸潤性導(dǎo)管癌旁皮膚細(xì)胞
CCRF-CEM [CCRF CEM] 人急性淋巴細(xì)胞白血病T淋巴細(xì)胞
CFPAC-1 人胰腺癌細(xì)胞
CGM1 人EB病毒轉(zhuǎn)化的B細(xì)胞
Chang liver 人張氏肝細(xì)胞
CHL 倉鼠肺細(xì)胞
CHMAS 人肥大細(xì)胞白血病細(xì)胞CHMAS
CHO/dhFr- 倉鼠卵巢細(xì)胞,二氫葉酸還原酶缺陷
CHO-K1 倉鼠卵巢細(xì)胞亞株
CHSE 鮭魚胚胎細(xì)胞CHSE
CIK 草魚腎臟細(xì)胞(CIK)
CNE 人鼻咽癌細(xì)胞CNE(低分化)
CNE2 鼻咽癌細(xì)胞CNE2
CoC1 人卵巢癌細(xì)胞系(CoC1)
CoC1/DDP CoC1細(xì)胞耐藥亞株(CoC1/DDP)
COLO 205 人結(jié)腸癌細(xì)胞
COLO-320 人結(jié)腸腺癌細(xì)胞
COS-1 非洲綠猴SV40轉(zhuǎn)化的腎細(xì)胞
COS-7 非洲綠猴SV40轉(zhuǎn)化的腎細(xì)胞
CRFK 貓腎細(xì)胞
CTLA4 Ig-24 中國倉鼠卵巢細(xì)胞
CV-1 [Part of the Wistar Special Collection] 非洲綠猴腎細(xì)胞
CW-2 人結(jié)腸腺癌細(xì)胞
Dami 人巨核細(xì)胞白血病細(xì)胞
Daudi 人成巨核細(xì)胞白血病細(xì)胞
DLD-1 人結(jié)直腸腺癌上皮細(xì)胞
DMS153 人小細(xì)胞肺癌DMS153
DT40 雞淋巴瘤細(xì)胞
DU 145 人前列腺癌細(xì)胞
EAC-E2G8 鼠腹水瘤(EAC-E2G8)
EBTr (NBL-4) 牛胚氣管細(xì)胞
Eca-109 人食道癌細(xì)胞Eca-109
ECV-304 人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞系(ECV-304)(具有T24細(xì)胞特性)
EL-4 小鼠淋巴瘤(EL-4)
EPC 鯉魚上皮細(xì)胞EPC
ES-2 人卵巢透明細(xì)胞癌
F56 人腺癌細(xì)胞系(F56)
F81 貓腎細(xì)胞
FaDu 人咽鱗癌細(xì)胞
FG 牙鲆細(xì)胞FG
菌種 :
粘質(zhì)沙雷氏菌 Serratia marcescens
粘質(zhì)賽氏桿菌 Serratia marcescens
粘質(zhì)沙雷菌 Serratia marcescens
粘質(zhì)沙雷氏菌 Serratia marcescens
無花果沙雷氏菌 Serratia ficaria
深海絲氨酸球菌 Serinicoccus profundi
反芻月形單胞菌反芻亞種
牛月形單胞菌 Selenomonas bovis
鮭色沉積物桿狀菌 Sediminibacterium salmoneum
嗜鹽沉積物桿菌 Sediminibacillus halophilus
白色沉積物桿菌 Sediminibacillus albus
罕見斯卡多維氏菌 Scardovia inopinatum
蘇氏血桿菌 Sanguibacter suarezii
土壤血桿菌 Sanguibacter soli
海血桿菌 Sanguibacter marinus
科氏血桿菌 Sanguibacter keddieii
菊粉血桿菌
考氏棲鹽水芽孢桿菌 Salsuginibacillus kocurii
嗜鹽棲鹽水芽孢桿菌 Salsuginibacillus halophilus
腸沙門氏菌腸亞種 Salmonella enterica subsp. enterica
肋生鹽弧菌肋生亞種 Salinivibrio costicola subsp. costicola
熱帶鹽水孢菌 Salinispora tropica
棲沙鹽水孢菌 Salinispora arenicola
土壤鹽坑微菌
玫瑰色鹽水球菌 Salinicoccus roseus
青島鹽水球菌 Salinicoccus qingdaoensis
昆明鹽水球菌 Salinicoccus kunmingensis
西班牙鹽水球菌 Salinicoccus hispanicus
耐鹽鹽水球菌 Salinicoccus halodurans
嗜堿鹽水球菌 Salinicoccus alkaliphilus
新疆鹽地桿菌 Salinibacterium xinjiangense
阿穆爾斯克灣鹽地桿菌 Salinibacterium amurskyense
康氏鹽漬芽孢桿菌 Salinibacillus kushnerii
艾丁湖鹽漬芽孢桿菌
嗜鹽鹽漬微菌 Salimicrobium halophilus
白色鹽漬微菌 Salimicrobium album
需鹽需鹽桿菌 Salegentibacter salegens
米氏需鹽桿菌 Salegentibacter mishustinae
海參需鹽桿菌 Salegentibacter holothuriorum
成鏈需鹽桿菌 Salegentibacter catena
新疆糖絲菌 Saccharothrix xinjiangensis
德克薩斯糖絲菌 Saccharothrix texasensis
丁香糖絲菌 Saccharothrix syringae
易變糖絲菌易變亞種 Saccharothrix mutabilis subsp. mutabilis
易變糖絲菌野山羊亞種 Saccharothrix mutabilis subsp. capreolus
長孢糖絲菌 Saccharothrix longispora
西班牙糖絲菌 Saccharothrix espanaensis
淡藍(lán)褐糖絲菌 Saccharothrix coeruleofusca
澳大利亞糖絲菌 Saccharothrix australiensis
塔氏糖多孢菌 Saccharopolyspora taberi
針脊孢糖多孢菌 Saccharopolyspora spinosporotrichia
刺糖多孢菌 Saccharopolyspora spinosa
山東糖多孢菌 Saccharopolyspora shandongensis
直桿糖多孢菌 Saccharopolyspora rectivirgula
江西糖多孢菌