成纖維細(xì)胞 培養(yǎng)細(xì)胞觀察

細(xì)胞接種或傳代以后，實驗者每天或至多間隔1～2d，要對細(xì)胞做常規(guī)性檢查。觀察細(xì)胞形態(tài)和生長情況以及培養(yǎng)的pH變化、有無污染等。根據(jù)細(xì)胞動態(tài)變化，做換液或傳代處理，如發(fā)現(xiàn)異常情況應(yīng)及時采取措施。

1. 細(xì)胞形態(tài) 生長狀態(tài)良好的細(xì)胞，在一般顯微鏡下觀察時可見，細(xì)胞透明度大、折光性強(qiáng)、輪廓不清。細(xì)胞生長不良時，輪廓增強(qiáng)，胞質(zhì)中常出現(xiàn)空泡、脂滴和其他顆粒狀物，細(xì)胞之間空隙加大，細(xì)胞形態(tài)可變得不規(guī)則甚至失去原有特點，如上皮細(xì)胞變成類上皮細(xì)胞等。某些染料當(dāng)細(xì)胞死亡時能透過變性的胞膜與解體的細(xì)胞核DNA結(jié)合，而令其著色。因而常用臺盼藍(lán)(trypan blue) 鑒別細(xì)胞死活，活細(xì)胞不著色，死細(xì)胞核呈藍(lán)色。通派（上海）細(xì)胞庫：www.shtpbio.com

2. 細(xì)胞生長 初代培養(yǎng)或傳代的細(xì)胞懸液接種以后，經(jīng)過長短不同的潛伏期后開始增殖。傳代細(xì)胞系、胚胎組織或幼體組織一般在第二天即可見細(xì)胞生長，一周內(nèi)便可連接成片。接種細(xì)胞長滿瓶壁后，應(yīng)及時做再培養(yǎng)。否則由于營養(yǎng)物消耗和代謝積累，細(xì)胞即進(jìn)入停止期或退化期。此時細(xì)胞輪廓增強(qiáng)，細(xì)胞內(nèi)常出現(xiàn)顆粒狀堆積物，為膨脹的線粒體，細(xì)胞質(zhì)呈空泡化，細(xì)胞變圓、粗糙，嚴(yán)重時細(xì)胞從瓶壁脫落，只有及時再做傳代處理，才能使細(xì)胞繼續(xù)生長繁殖。

3. 營養(yǎng)液 正常情況下，培養(yǎng)液呈桃紅色。如果細(xì)胞維持在pH6.5～6.6條件下，細(xì)胞會脫落死亡。當(dāng)培養(yǎng)液酸化變黃時，說明培養(yǎng)液中代謝產(chǎn)物已堆積到一定量，需要更換新鮮培養(yǎng)液。培養(yǎng)液中如加Hepes或用5％CO2溫箱培養(yǎng)可使pH維持相對穩(wěn)定。更換營養(yǎng)液的時間，可依營養(yǎng)物的消耗而定，細(xì)胞生長旺盛時2～3d換一次，生長緩慢時，3～4d亦可。要特別注意各種細(xì)胞對pH值要求是不一樣的。

4. 微生物污染 微生物污染培養(yǎng)細(xì)胞培養(yǎng)物后會出現(xiàn)pH值改變，培養(yǎng)液呈現(xiàn)混濁狀。細(xì)菌感染后，由于細(xì)菌的運動，光鏡觀察可見有微閃光；真菌感染則在鏡下見許多細(xì)絲狀菌絲，有時還密集有群集孢子；支原體的污染需要借助一些檢測手段才可檢出。細(xì)胞污染以后一般應(yīng)當(dāng)廢棄，對于重要的細(xì)胞株，可以參考相關(guān)專著，介紹采取一些措施清除污染。比較重要的實驗、珍貴的細(xì)胞，至少由兩個實驗人員獨立培養(yǎng)操作，或由一個人分次(不同時)操作。除培養(yǎng)實驗室的衛(wèi)生條件外，空氣中的濕度與微生物污染關(guān)系密切。重要的、周期長的實驗盡量安排在空氣濕度低的秋冬季進(jìn)行。

成纖維細(xì)胞 培養(yǎng)細(xì)胞觀察
人胚肺成纖維細(xì)胞MRC-5    細(xì)胞株 來源 
人胚肺成纖維細(xì)胞CCC-HPF-1  細(xì)胞株 來源
人胚胎氣管組織來源細(xì)胞CCC-HBE-2  細(xì)胞株 來源
人胚胎肺成纖維細(xì)胞WI-38  細(xì)胞株 來源
SV-40Z轉(zhuǎn)化肺成纖維細(xì)胞WI38/VA13  細(xì)胞株 來源
人胚肺二倍體細(xì)胞2BS  細(xì)胞株 來源
人胚肺二倍體細(xì)胞KMB-17  細(xì)胞株 來源
人肺細(xì)胞HLF-a  細(xì)胞株 來源
人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞DMS 153  細(xì)胞株 來源
人胚肺細(xì)胞 VA13細(xì)胞WI-38 VA13亞系 2RA  細(xì)胞株 來源
人胚肺二倍體細(xì)胞HEL-1  細(xì)胞株 來源
人胚肺細(xì)胞系KuMA  細(xì)胞株 來源
人肺轉(zhuǎn)化細(xì)胞系A(chǔ)E1201    細(xì)胞株 來源
人肺鱗癌細(xì)胞NCI-H226  細(xì)胞株 來源
人胚肺二倍體細(xì)胞HEL-2  細(xì)胞株 來源
人支氣管上皮樣細(xì)胞BEAS-2B  細(xì)胞株 來源
人胚肺轉(zhuǎn)化細(xì)胞SL-1  細(xì)胞株 來源
人肺腺癌細(xì)胞Calu-3  細(xì)胞株 來源

成纖維細(xì)胞 培養(yǎng)細(xì)胞觀察
體內(nèi)細(xì)胞培養(yǎng)及其操作步驟

1． 瘤細(xì)胞懸液接種
（1）無菌選取生長良好(有光澤，淡紅色)瘤組織或?qū)?shù)生長期培養(yǎng)瘤細(xì)胞。   
（2）在PBS中將瘤組織剪碎后用勻漿器研磨，經(jīng)80～100目篩網(wǎng)過濾成細(xì)胞懸液。
（3）培養(yǎng)細(xì)胞應(yīng)用PBS洗兩遍。
（4）計數(shù)并調(diào)整細(xì)胞濃度至107～108／ml。
（5）常規(guī)消毒后，于接種部位(通常為背部或腋窩腹股溝皮下)用醫(yī)用注射器皮下潛行一段后注入細(xì)胞懸液(0.1ml／部位，＞106細(xì)胞)。初次接種成功率低，細(xì)胞數(shù)盡可能多一些。
（6）次日注意觀察動物一般情況。初次接種一般有一段較長的潛伏期，以后隨著傳代潛伏期逐漸縮短，zui后固定為一個相對穩(wěn)定的時間。
2． 腹水瘤的建立與腹水瘤的接種 將實體瘤細(xì)胞直接種于小鼠腹腔、腹壁或其他部位，引起腹水，腹水中含有瘤細(xì)胞，將這種腹水反復(fù)傳代，即可成為腹水瘤。初次傳代時，腹水常呈血性(含大量紅細(xì)胞)，反復(fù)傳代后腹水逐漸變成乳白色。腹水瘤的接種過程如下。
（1）將凍存或培養(yǎng)的腹水瘤細(xì)胞離心和洗滌，進(jìn)行細(xì)胞計數(shù)。
（2）消毒動物，左下腹穿刺接種106腹水瘤細(xì)胞。
（3）接種腹水瘤細(xì)胞后約7~12d，待小鼠腹部明顯膨大。用碘酒棉球消毒小鼠腹部，用9號針頭抽取腹水，也可行腹部解剖后，用滴管吸取。每只小鼠可抽3~5ml。
（4）抽取的腹水經(jīng)3000rpm離心15min，收集上清，分裝凍存?zhèn)溆谩?/p>

人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞NCI-H209  細(xì)胞株 來源
人低分化肺腺癌細(xì)胞GLC-82  細(xì)胞株 來源
人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞NCI-H446  細(xì)胞株 來源
人非小細(xì)胞肺腺癌細(xì)胞NCI-H157  細(xì)胞株 來源
人肺鱗癌細(xì)胞NCI-H520  細(xì)胞株 來源
人肺巨細(xì)胞癌高轉(zhuǎn)移細(xì)胞株P(guān)G-BE1  細(xì)胞株 來源
人肺巨細(xì)胞癌低轉(zhuǎn)移細(xì)胞株P(guān)G-LH7  細(xì)胞株 來源
人肺癌細(xì)胞A-427  細(xì)胞株 來源
人低分化肺腺癌細(xì)胞SK-LU-1  細(xì)胞株 來源
人肺支氣管癌細(xì)胞NCI-H1650  細(xì)胞株 來源
人非小細(xì)胞肺腺癌細(xì)胞NCI-H1975  細(xì)胞株 來源
人非小細(xì)胞肺腺癌細(xì)胞NCI-H2087  細(xì)胞株 來源
人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞NCI-H2227  細(xì)胞株 來源
人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞NCI-H23  細(xì)胞株 來源
人肺腺鱗癌細(xì)胞NCI-H596  細(xì)胞株 來源
人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞NCI-H838  細(xì)胞株 來源
人肺鱗癌細(xì)胞LTEP-s  細(xì)胞株 來源

人原鈣黏素1(PCDH1)ELISA 試劑盒   免費待測 96T *
人白介素2受體(IL-2R)ELISA 試劑盒   免費待 96T  *
人皮膚T細(xì)胞虜獲趨化因子(CTACK/CCL27)ELISA 試劑盒   免費待測 96T *
人胸腎表達(dá)趨化因子(BRAK/CXCL14)ELISA 試劑盒   免費待測 96T *
人B-淋巴細(xì)胞趨化因子1(BLC-1/CXCL13)ELISA 試劑盒   免費待測96T*
人結(jié)締組織活化肽Ⅲ(CTAPⅢ)ELISA 試劑盒   免費待測 96T *
人巨噬細(xì)胞集落刺激因子受體(M-CSFR)ELISA 試劑盒   免費待測 96T *
人免疫球蛋白A Fc段受體Ⅰ(FcαRⅠ/CD89)ELISA 試劑盒   免費待測 96T*
人免疫球蛋白E Fc段受體Ⅱ(FcεRⅡ/CD23)ELISA 試劑盒   免費待測96T *
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人免疫球蛋白G Fc段受體Ⅰ(FcγRⅠ/CD64)ELISA 試劑盒   免費待測 96T *
人免疫球蛋白G Fc段受體Ⅲ(FcγRⅢ/CD16)ELISA 試劑盒    免費待測 96T *
人免疫球蛋白G Fc段受體Ⅱ(FcγRⅡ/CD32)ELISA 試劑盒    免費待測 96T *
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人粒細(xì)胞趨化蛋白-2(GCP-2/CXCL6)ELISA 試劑盒   免費待測 96T *
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人肺部活化調(diào)節(jié)趨化因子(PARC/CCL18)ELISA試劑盒   免費待測 96T *
人黏膜地址素細(xì)胞黏附分子(MAdCAM-1)ELISA 試劑盒   免費待測 96T *
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人可溶性CD21(CR2/sCD21)ELISA 試劑盒   免費待測 96T*
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人轉(zhuǎn)化生長因子β2(TGFβ2)ELISA 試劑盒    免費待測96T *