正常細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞查詢（買一株送一株）
一、微量全血培養(yǎng)
（一）原理
人體外周血中淋巴細(xì)胞是成熟的免疫細(xì)胞，正常情況下處于G。期不再增殖。PHA（Phytohemagglutinin，植物血凝素）是人和其它動物淋巴細(xì)胞的有絲分裂刺激劑，它能使處于G0期的淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化為淋巴母細(xì)胞，進(jìn)入細(xì)胞周期開始旺盛的有絲分裂。
人體微量全血培養(yǎng)是一種簡單的淋巴細(xì)胞培養(yǎng)方法。此法采血量少、操作簡便，在 PHA作用下進(jìn)行短期培養(yǎng)即可獲豐富的、有絲分裂活躍的淋巴母細(xì)胞，適于制備核型標(biāo)本。各種因素的效應(yīng)（如病毒、電離輻射、化學(xué)藥劑等）也可在淋巴細(xì)胞的培養(yǎng)條件下進(jìn)行觀察，從而進(jìn)行多種在體內(nèi)無法進(jìn)行的研究。因此它是細(xì)胞生物學(xué)及其它學(xué)科研究中的一種有效的方法。
（二）操作
1．打開超凈臺紫外燈20～30分鐘。洗手、換潔凈白大衣后進(jìn)入操作室。啟動超凈臺，點燃煤氣燈。用75％酒精棉球擦洗手、各種試劑瓶及操作臺面，然后將培養(yǎng)液及肝素、秋水仙素、PHA等所需溶液移入超凈臺。
2．在超凈臺內(nèi)將每個培養(yǎng)瓶裝入5ml培養(yǎng)液及0.2ml PHA溶液，封好備用。
3．用5ml注射器，7號針頭，先吸取少許肝素濕潤針筒，然后從肘靜脈抽血l～2ml。
每個培養(yǎng)瓶接種全血O．2ml左右輕輕搖動使血和培養(yǎng)液混勻。
4．在培養(yǎng)瓶上標(biāo)記好供血者姓名、性別、采血日期等，放入培養(yǎng)箱中37℃培養(yǎng)。每天輕輕震蕩培養(yǎng)瓶二、三次，防止血球沉積并保證血細(xì)胞與培養(yǎng)液充分接觸，促進(jìn)細(xì)胞生長繁殖。
通派細(xì)胞 正常細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞查詢（買一株送一株） ：
人肺鱗癌瘤株LTEP-s
人肺鱗癌細(xì)胞NCI-H1703
人肺鱗癌細(xì)胞NCI-H2170
人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞NCI-H524
人肺腺癌細(xì)胞SPC-A1
人肺癌細(xì)胞A549
人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞H125
人肺癌細(xì)胞H1299
人肺癌細(xì)胞TKB-1
人肺腺癌細(xì)胞LTEP-a-2
人肺腺癌細(xì)胞Lu-165
人大細(xì)胞肺癌細(xì)胞NCI-H460
人肺腺癌細(xì)胞SPC-A-1
人高轉(zhuǎn)移肺癌細(xì)胞095-D
人肺鱗癌細(xì)胞SK-MES-1
人大細(xì)胞肺癌細(xì)胞NCI-H661
人肺黏液上皮樣癌細(xì)胞NCI-H292
人肺退行性癌細(xì)胞Calu-6
人肺腺癌細(xì)胞NCI-H1395
人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞NCI-H358
人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞HCC827
人典型小細(xì)胞肺癌細(xì)胞NCI-H1688
人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞NCI-H1299
人胚肺二倍體細(xì)胞2BS
人支氣管上皮樣細(xì)胞BEAS-2B
人胚肺成纖維細(xì)胞CCC-HPF-1
人胚胎氣管組織來源細(xì)胞CCC-HBE-2
人肺腺癌細(xì)胞Calu-3
人肺退行性癌細(xì)胞Calu-6
人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞DMS 153
人高轉(zhuǎn)移肺癌細(xì)胞95-D
人低分化肺腺癌細(xì)胞GLC-82
人肺細(xì)胞HLF-a
人胚肺二倍體細(xì)胞HEL-1
人胚肺二倍體細(xì)胞HEL-2
正常細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞查詢（買一株送一株）
人肺癌細(xì)胞H1299
人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞HCC827
人胚肺二倍體細(xì)胞KMB-17
人胚肺細(xì)胞系KuMA
人肺鱗癌細(xì)胞LTEP-s
人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞LTEP-sm
人肺鱗癌瘤株LTEP-s
人肺腺癌細(xì)胞LTEP-a-2
人肺腺癌細(xì)胞Lu-165
二、人淋巴細(xì)胞染色體標(biāo)本制備
（一）原理
在淋巴母細(xì)胞分裂高峰時加入秋水仙素，破壞細(xì)胞紡錘體的形成，使細(xì)胞停止在分裂中期。然后收集細(xì)胞，低滲處理，使細(xì)胞脹大，染色體伸展。接著進(jìn)行固定并除去中期分裂相中殘存的蛋白質(zhì)，使染色體清晰且分散良好。再結(jié)合離心技術(shù)去掉紅細(xì)胞碎片，然后采用空氣干燥法制片獲得中期染色體標(biāo)本。
（二）操作
1．微量全血細(xì)胞培養(yǎng)至68小時左右，用1ml注射器 號針頭向每個5ml培養(yǎng)瓶內(nèi)加2滴秋水仙素溶液，搖勻后繼續(xù)培養(yǎng)3小時，此項操作不需要嚴(yán)格無菌。
2．按時終止培養(yǎng)，用吸管溫和吹打成細(xì)胞懸液后，移至10ml離心管中。用天平平衡后以1000rpm離心8分鐘，棄大部上清，剩0.5ml。再吹打成細(xì)胞懸液，加入預(yù)熱37℃的 0.075mol／L的KCL溶液9ml，置37℃水浴中低滲處理30分鐘（這期間配制3:1甲醇一冰醋酸固定液）。
3.向離心管中加入1ml固定液預(yù)固定。平衡后以1000rpm離心8分鐘，同樣剩 0.5ml上清。
4．輕輕將細(xì)胞吹成懸液，加5~6ml固定液，室溫下固定30分鐘。然后離心，棄上清，重復(fù)固定一次。再離心，留0.1～0.2ml上清，吹打成細(xì)胞懸液。
5．吸取1～2滴懸液，在距載片約15cm高度滴于預(yù)冷的干凈載玻片上，迅速對準(zhǔn)細(xì)胞吹氣促進(jìn)染色體分散。斜放載玻片，在空氣中晾干（此期間配制Giemsa染液，Giemsa原液和磷酸緩沖液1:10）。
6．將標(biāo)本面朝下放在染色槽中，加入染液染10分鐘，自來水沖洗，晾干后觀察。
（三）結(jié)果
低倍鏡下，制片質(zhì)量較好的標(biāo)本上可看到有較多的分裂相，染色體之間分散良好，互不重疊。
油鏡下觀察可見每一條染色體都含有兩條染色單體，兩條單體由著絲粒相結(jié)。分區(qū)計數(shù)染色體數(shù)目并判定性別，或拍照后進(jìn)行核型分析。
