上海遠(yuǎn)慕生物詳細(xì)為您介紹葡聚糖凝膠G-10操作步驟，分離技巧及其他咨訊說明，本司所供應(yīng)的葡聚糖凝膠系列產(chǎn)品有很多，包含有：葡聚糖凝膠LH-20，葡聚糖凝膠LH-60，葡聚糖凝膠G-15，葡聚糖凝膠G-25，葡聚糖凝膠G-50，葡聚糖凝膠G-75，葡聚糖凝膠G-100，葡聚糖凝膠G-150，葡聚糖凝膠G-200，更多產(chǎn)品請！

中文名：葡聚糖凝膠G-10

中文別名：交聯(lián)葡聚糖凝膠G-10；交聯(lián)右旋糖酐凝膠G-10

英文名：Sephadex G-10

供應(yīng)商：上海遠(yuǎn)慕

包裝：25g,100g,500g

PH：2～13

保存：RT

干顆粒直徑：40～120um

床體積毫升/克干分子篩：2～3ml/g

性狀：白色珠粒或粉末，屬親水性凝膠；性穩(wěn)定，不溶于水，弱酸和堿溶液，遇強(qiáng)酸能使糖苷鍵分解

葡聚糖凝膠G-10

葡聚糖凝膠G-10操作步驟：

1、乙醇浸泡在室溫下，將干粉浸泡于50-60%乙醇中至少24小時(shí)；并不斷攪拌以保證凝膠溶脹，用無鹽水洗去殘存的乙醇濾干。

2、無鹽水浸泡室溫下，在無鹽水中充分溶脹24小時(shí)，間隙攪拌，以保證凝膠的*溶脹。

3、鹽酸浸泡在常溫下再用0.1MHCl浸泡12小時(shí)，間隙攪拌，濾干，水洗只中性。

4、裝柱將溶脹好的凝膠根據(jù)裝柱要求一次性置入柱內(nèi)，注意保持濕態(tài)裝柱，并避免柱內(nèi)產(chǎn)生氣泡或斷層。

5、平衡上樣前平衡層析柱至少3-5個(gè)柱體積直到記錄儀基線變得平穩(wěn)為止(流出液的PH值等于上柱的Buffer的PH值)。

6、上樣凝膠過濾的上樣量一般為5%的柱床體積，我們建議初次上樣控制在1-2%的床體積，視分離情況可以調(diào)整;脫鹽時(shí)上樣量可以達(dá)到20%的柱床體積；柱高的選擇也與分離要求相關(guān)，柱高控制在40-50cm以下，過高的凝膠層會引起較大的反壓，應(yīng)當(dāng)盡可能避免；難分離物質(zhì)要有一定柱高和流速控制，脫鹽時(shí)高徑比為5：1即可。

7、洗脫方法可以用無鹽水，也可以采用上柱時(shí)的緩沖液洗脫;在上柱Buffer中加入NaCl等梯度洗脫或鹽梯度洗脫也可以*分離純化。

8、清洗每次用完之后，將柱子里的緩沖液置換為去離子水，然后用20%的乙醇封存。

9、在位清洗(CIP)凝膠使用十次后作一次CIP，目的是去除柱床內(nèi)沉淀的及頑固殘留的蛋白；方法是以40cm/h用0.1M氫氧化鈉反向洗四個(gè)柱體積，再以至少三個(gè)柱體積平衡緩沖液再生。

葡聚糖凝膠G-10分離技巧：

1、分離時(shí)流速不可太快，切切不可心急，所謂欲速則不達(dá)；接餾分時(shí)可開全速，節(jié)省時(shí)間。

2、柱子盡可能長，葡聚糖凝膠柱長的增加將極大地改善分離，所不要吝惜填料，寧可將填料全裝在一根大柱子中，不要將填料裝成幾根小柱。

3、餾分一定要接的細(xì)，可1/10，或1/20 個(gè)保留體積接成一餾分。

4、洗脫體積一般為2-3個(gè)保留體積，對特殊保留強(qiáng)的化合物，可洗脫5個(gè)保留體積。

5、鞣質(zhì)成分死吸附嚴(yán)重，如不在乎填料者，可用SephadexLH20分鞣質(zhì)。

6、葡聚糖凝膠對黃酮類成分的分離效果，方法很成型，有大量文獻(xiàn)參考。

7、填料反復(fù)使用，每次用完，一般可用甲醇將柱子洗干凈，然后用下一次分離的起步溶劑將甲醇替換出來，待用；暫時(shí)不用試可以水洗→含水醇洗(醇的濃度逐步遞增)→醇洗，zui后泡在醇中貯于磨口瓶中備用；如長期不用時(shí)，可在以上處理基礎(chǔ)上，減壓抽干，再用少量乙迷洗凈抽干，室溫充分揮散至無醚味后，60～80°C干燥后保存。

葡聚糖凝膠G-10說明：

葡聚糖凝膠有不同的粒度！超細(xì)級的葡聚糖凝膠是用于需要*分辨率的柱色譜和薄層色譜，粗級和中級的凝膠用于制備性色譜過程，可在較低的壓力下獲得較高的流速；另外，粗級也可用于批量工藝。

化學(xué)穩(wěn)定性葡聚糖凝膠不溶于一切溶劑(除非它被化學(xué)降解)；它在水，鹽溶液，堿和弱酸性溶液中都是穩(wěn)定的，在強(qiáng)酸中凝膠骨架的糖苷鍵被水解；長期接觸氧化劑將破壞凝膠，因而應(yīng)避免使用。

物理穩(wěn)定性葡聚糖凝膠并不熔融，可以在濕態(tài)，中性PH進(jìn)行滅菌；干態(tài)的凝膠加熱至120℃以上將開始焦糖化，葡聚糖凝膠的機(jī)械強(qiáng)度取決于交聯(lián)度。

G型的葡聚糖凝膠有各種不同的交聯(lián)度，因此它們的溶脹度和分級分離范圍也有所不同；葡聚糖凝膠的溶脹度基本上不因鹽和洗滌劑的存在而受影響。

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