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用熒光激活的細(xì)胞分類儀檢測(cè)調(diào)亡細(xì)胞2014/9/2

1）原位缺口翻譯檢測(cè)裂解的dna段1．取106經(jīng)促調(diào)亡物質(zhì)處理的細(xì)胞，用1％BSA-PBS洗滌細(xì)胞后加入0.1mlFITC標(biāo)記的抗CD4或抗CD8單克隆抗體，4℃20分鐘。用1％BSA-PBS洗滌細(xì)胞...

士鋒生物羊水細(xì)胞染色體標(biāo)本制備2014/8/29

一、原理人的羊水細(xì)胞能長(zhǎng)成單層并可連續(xù)進(jìn)行傳代培養(yǎng)，但它們的一些特征與一般成纖維細(xì)胞不同。在羊水中存在著各種不同類型的胎兒細(xì)胞，依據(jù)其外形和生長(zhǎng)特征可區(qū)分為以下三類：上皮細(xì)胞（E）、成纖維細(xì)胞（F）和...

細(xì)胞學(xué)技術(shù)的一般環(huán)節(jié)簡(jiǎn)介2014/8/25

一、紡錘體阻斷劑（Spindleinhibitor）在有絲分裂過程中，隨著紡錘絲的形成，染色體被牽引到一起難以觀察其形態(tài)。紡錘體的形成在于細(xì)胞質(zhì)和紡錘體成分的粘度之間的平衡，因此，改變細(xì)胞質(zhì)的粘度，即...

如何進(jìn)行293細(xì)胞的大規(guī)模培養(yǎng)2014/8/21

293細(xì)胞是腺病毒載體的包裝細(xì)胞。腺病毒是繼逆轉(zhuǎn)錄病毒后用于基因治療研究的熱門載體。直接將腺病毒載體導(dǎo)入人體內(nèi)表達(dá)目的基因，治療惡性腫瘤、心血管疾病或一些遺傳疾病已取得可喜進(jìn)展；利用腺病毒載體在包裝細(xì)...

細(xì)胞融合法提高HBsAg表達(dá)量方法研究2014/8/14

【摘要】目的提高HBsAg的表達(dá)量。方法將CHO-C28細(xì)胞與NS-1細(xì)胞融合，用反向血凝法檢測(cè)滴度。結(jié)果融合后第11天，出現(xiàn)瞬時(shí)高表達(dá)，HBsAg表達(dá)量zui高為1:2048，而對(duì)照僅為1:256。...

士鋒生物其他細(xì)胞培養(yǎng)用液2014/8/12

在細(xì)胞培養(yǎng)過程中，除了培養(yǎng)基外，還經(jīng)常用到一些平衡鹽溶液、消化液、pH調(diào)整液等。一、平衡鹽溶液（balancedsaltsolution,BSS）:主要是由無機(jī)鹽、葡萄糖組成，它的作用是維持細(xì)胞滲透壓...

士鋒生物細(xì)胞傳代培養(yǎng)2014/8/7

一、原理細(xì)胞在培養(yǎng)瓶長(zhǎng)成致密單層后，已基本上飽和，為使細(xì)胞能繼續(xù)生長(zhǎng)，同時(shí)也將細(xì)胞數(shù)量擴(kuò)大，就必須進(jìn)行傳代（再培養(yǎng)）。傳代培養(yǎng)也是一種將細(xì)胞種保存下去的方法。同時(shí)也是利用培養(yǎng)細(xì)胞進(jìn)行各種實(shí)驗(yàn)的必經(jīng)過程...

士鋒生物細(xì)胞培養(yǎng)室建立的細(xì)節(jié)問題2014/8/6

一、建細(xì)胞間的一些細(xì)節(jié)問題：1、甲醛薰蒸：資料（internet）：40％甲醛溶液(藥用規(guī)格、福建三明化工總廠出品)，用量30ml／m3，室內(nèi)溫度21～24℃，相對(duì)濕度75％～85％，加熱薰蒸使蒸汽彌...

士鋒生物建立細(xì)胞系或細(xì)胞株2014/8/4

各種已被命名和經(jīng)過細(xì)胞生物學(xué)鑒定的細(xì)胞系或細(xì)胞株，都是一些形態(tài)比較均一、生長(zhǎng)增殖比較穩(wěn)定的和生物性狀清楚的細(xì)胞群。因此凡符合上述情況的細(xì)胞群也可給以相應(yīng)的名稱，即文獻(xiàn)中常稱之為已鑒定的細(xì)胞（Certi...

細(xì)胞形態(tài)觀察及大小測(cè)量2014/7/31

一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?.了解動(dòng)、植物細(xì)胞的一般形態(tài)結(jié)構(gòu)特點(diǎn)2.掌握顯微測(cè)量的基本方法二、實(shí)驗(yàn)原理任何動(dòng)、植物細(xì)胞都具有特定的形態(tài)結(jié)構(gòu)，對(duì)其進(jìn)行固定和染色等處理，便可以在顯微鏡下分辨清楚，然后借用目鏡測(cè)微尺和鏡...

士鋒生物染色體核型分析實(shí)驗(yàn)2014/7/29

一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康膶W(xué)習(xí)和掌握核型分析的方法。二、實(shí)驗(yàn)原理核型亦稱染色體組型，是指體細(xì)胞有絲分裂中期細(xì)胞核(或染色體組)的表型。每一個(gè)體細(xì)胞含有兩組同樣的染色體，用2n表示。其中與性別直接有關(guān)的染色體，即性染...

PCR技術(shù)應(yīng)用進(jìn)展介紹2014/7/24

理，許多學(xué)者充分發(fā)揮創(chuàng)造性思維，對(duì)PCR技術(shù)進(jìn)行研究和改進(jìn)，使PCR技術(shù)得到了進(jìn)上步地完善，并在此基礎(chǔ)上派生出了許多新的用途.1、原位PCR技術(shù)原位PCR就是在組織細(xì)胞里進(jìn)行pcr反應(yīng)，它結(jié)合了具有細(xì)...

PCR反應(yīng)特點(diǎn)2014/7/23

特異性強(qiáng)pcr反應(yīng)的特異性決定因素為：①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;②堿基配對(duì)原則;③Taqdna聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;④靶基因的特異性與保守性。其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合...

總RNA的提取、分離，mRNA的分離2014/7/21

實(shí)驗(yàn)?zāi)康模貉芯炕虻谋磉_(dá)和調(diào)控時(shí)常常要從組織和細(xì)胞中分離和純化RNA，RNA質(zhì)量的高低常常影響cDNA文庫、RT-PCR、NorthernBlot、點(diǎn)雜交及5’RAGE等分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的成敗。實(shí)驗(yàn)原理...

oligo知識(shí)大總結(jié)2014/7/18

zui長(zhǎng)聽說的是Oligo(dT)，主要是由T(胸腺嘧啶）構(gòu)成的核苷酸鏈，其次Oligo引物設(shè)計(jì)軟件，由于其操作的簡(jiǎn)便性和引物分析設(shè)計(jì)的功能強(qiáng)大而風(fēng)靡,Oligo芯片是微陣列的一種，又稱寡核苷酸微陣列...