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在了解了實(shí)驗(yàn)?zāi)康闹螅P(guān)于這個(gè)實(shí)驗(yàn)有以下幾個(gè)問題需要大家思考:
1.種子成分很復(fù)雜,脂肪的提取如何進(jìn)行?
2.什么是粗脂肪?
(答:脂肪不溶于水,易溶于有機(jī)溶劑(如石油醚)。利用這一特性,選用有機(jī)溶劑直接浸提出樣品中的脂肪進(jìn)行測定。提取物中除脂肪之外,還有游離脂肪酸、石蠟、磷脂、固醇、色素、有機(jī)酸等物質(zhì),故浸提物稱粗脂肪。)通過以上問題的思考,我們知道了脂肪的提取主要是利用其易溶于有機(jī)溶劑的特性。具體的實(shí)驗(yàn)操作粗脂肪的提取,一般采用索氏脂肪提取器。
利用脂類物質(zhì)溶于有機(jī)溶劑的特性。在索氏提取器中用有機(jī)溶劑(本實(shí)驗(yàn)用石油醚,沸程為 30 ~ 60 ℃)對樣品中的脂類物質(zhì)進(jìn)行提取。
種子粗脂肪的提取圖 索氏脂肪提取器
1. 浸提管 2. 通氣管 3. 虹吸管 4. 小燒瓶 5. 冷凝管
索氏提取器是由提取瓶、提取管、冷凝器三部分組成的,提取管兩側(cè)分別有虹吸管和連接管。各部分連接處要嚴(yán)密不能漏氣。提取時(shí),將待測樣品包在脫脂濾紙包內(nèi),放入提取管內(nèi)。提取瓶內(nèi)加入石油醚,加熱提取瓶,石油醚氣化,由連接管上升進(jìn)入冷凝器,凝成液體滴入提取管內(nèi),浸提樣品中的脂類物質(zhì)。待提取管內(nèi)石油醚液面達(dá)到一定高度,溶有粗脂肪的石油醚經(jīng)虹吸管流入提取瓶。流入提取瓶內(nèi)的石油醚繼續(xù)被加熱氣化、上升、冷凝,滴入提取管內(nèi),如此循環(huán)往復(fù),直到抽提*為止。
三、材料、儀器與試劑
(一)實(shí)驗(yàn)材料
大豆、花生、蓖麻、向日葵、芝麻等油料種子。
(二)儀器設(shè)備
索氏提取器( 50 mL ),燒杯,干燥器,脫脂濾紙,鑷子,分析天平,烘箱,恒溫水浴,脫脂棉。
(三)試劑
石油醚(化學(xué)純,沸程 30 ~ 60 ℃)。
四、實(shí)驗(yàn)操作
1.將洗凈、晾干的芝麻種籽放在 80 ~ 100 ℃烘箱中烘 4 小時(shí)。待冷卻后,準(zhǔn)確地稱取 2 ~ 4 g ,置于研缽中研磨細(xì),將研碎的樣品及擦凈研缽的脫脂棉一并用脫脂濾紙包住用絲線扎好,勿讓樣品漏出?;蛴锰刂频臑V紙斗裝樣品后,斗口用脫脂棉塞好。放入索氏提取器的提取管內(nèi),zui后再用石油醚洗凈研缽后倒入提取管內(nèi)。
2. 洗凈索氏提取瓶,在 105 ℃烘箱內(nèi)烘干至恒重,記錄重量。將石油醚加到提取瓶內(nèi)約為瓶容積的 1/2 ~ 2/3 。把提取器各部分連接后,接口處不能漏氣。用 70 ~ 80 ℃恒溫水浴加熱提取瓶,使抽提進(jìn)行 16 小時(shí)左右,直至抽提管內(nèi)的石油醚用濾紙檢驗(yàn)無油跡為止。此時(shí)表示提取*。
3. 提取完畢,取出濾紙包,再回餾一次,洗滌提取管。再繼續(xù)蒸餾,當(dāng)提取管中的石油醚液面接近虹吸管口而未流入提取瓶時(shí),倒出石油醚。若提取瓶中仍有石油醚,繼續(xù)蒸餾,直至提取瓶中石油醚*蒸完。取下提取瓶,洗凈瓶的外壁,放入 105 ℃烘箱中烘干至恒重,記錄重量。
五、注意事項(xiàng)
1.本法采用沸點(diǎn)低于 60 ℃的有機(jī)溶劑,不能提取出樣品中結(jié)合狀態(tài)的脂類,故此法又稱為游離脂類定量測定法。
2.待測樣品若是液體,應(yīng)將一定體積的樣品滴在脫脂濾紙上在60~80℃烘箱中烘干后放入提取管內(nèi)。
3.本法使用有機(jī)溶劑石油醚(沸程 30 ~ 60 ℃)故加熱時(shí)不能用明火。
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