ACP核酸檢測（PCR熒光探針法）

2023年10月21日 12:45通派（上海）生物科技有限公司點(diǎn)擊量：603

ACP核酸檢測（PCR熒光探針法）

實(shí)驗(yàn)?zāi)康模簷z測動(dòng)物肺臟、淋巴結(jié)等組織中鸚鵡熱衣原體(ACP)DNA，用于鸚鵡熱衣原體(ACP)感染的輔助診斷及流行病學(xué)調(diào)查。其檢測結(jié)果僅供參考。

實(shí)驗(yàn)方法：選取一對ACP特異性引物和一條特異性熒光探針，應(yīng)用堿裂解法提取DNA，在耐熱DNA聚合酶（Taq酶）作用下，配以FQ-Buffer(內(nèi)含Mg2+、Tris-HCl等)、四種核苷酸單體（dNTPs）等成分，通過PCR-熒光探針體外擴(kuò)增法對鸚鵡熱衣原體(ACP)一段高保守區(qū)域進(jìn)行擴(kuò)增，從而達(dá)到快速實(shí)時(shí)定量檢測之目的。

動(dòng)物組織標(biāo)本采集：取發(fā)病動(dòng)物肺臟、淋巴結(jié)等組織1g左右，轉(zhuǎn)至1.5ml離心管中，密閉送檢。

提取組織：取約100mg組織加1ml生理鹽水，研磨成組織勻漿，取50ul勻漿液轉(zhuǎn)至一潔凈的1.5ml離心管中。

組織DNA提取：向標(biāo)本中加入50ul核酸提取液充分混勻，100℃烈解10min。13,000rpm 離心3min，取上清液4ul做PCR反應(yīng)。

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