試劑準(zhǔn)備:
1. 小鼠免疫球蛋白M(IgM)Elisa Kit使用前將所有的試劑和標(biāo)本緩慢均衡至室溫(18-25oC),試劑不能直接在37oC溶解。
2. 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品):每瓶標(biāo)準(zhǔn)品加入標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1mL,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為2000pg/mL。準(zhǔn)備7個(gè)稀釋標(biāo)準(zhǔn)品的EP管,每個(gè)EP管中加入150μL的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液,如圖所示依次倍比稀釋成不同的梯度, 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液(0pg/mL)直接作為空白孔。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
3. 濃洗滌液:用580mL蒸餾水或去離子水將20mL濃洗滌液稀釋至600mL,進(jìn)行30倍稀釋。
小鼠免疫球蛋白M(IgM)Elisa KitMouse immunoglobulin M, IgM ELISA Kit
免疫球蛋白 M(immunoglobulin M, IgM), 五類免疫球蛋白分子中分子量大的一種。其分子量為900000道爾頓,故又稱為巨球蛋白。在正常小鼠血清中平均濃度為60~180mg%,約占血清總免疫球蛋白的6%。主要存在于血管中,對(duì)防止菌血癥起主要作用。一個(gè)IgM分子由5個(gè)單體通過(guò)J鏈連接成五聚體。這種結(jié)構(gòu)使IgM具有較多的抗原結(jié)合價(jià),可以同時(shí)和數(shù)個(gè)靶細(xì)胞結(jié)合。因此,IgM在機(jī)體抗感染免疫中起主力抗體的作用。IgM的抗菌作用比IgG高1000倍。在種系發(fā)育過(guò)程中,IgM是出現(xiàn)的免疫球蛋白。所提供的ELISA Kit是典型的競(jìng)爭(zhēng)法酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒(ELISA)。預(yù)先包被的抗體為抗鼠IgM抗體,檢測(cè)相為HRP標(biāo)記鼠IgM。樣品和HRP標(biāo)記鼠IgM同時(shí)加入酶標(biāo)板孔反應(yīng)后,PBS或TBS洗滌。隨后加入TMB顯色。TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的待測(cè)蛋白呈反相關(guān)。
產(chǎn)品名稱 | 小鼠免疫球蛋白M(IgM)Elisa Kit |
英文名稱 | Mouse immunoglobulin M, IgM ELISA Kit |
規(guī)格 | 48T/96T |
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公司采用小鼠免疫球蛋白M(IgM)Elisa Kit的全是進(jìn)口原材料研,發(fā)靈敏性高,高效性,*抗體,吸附均勻、吸附性好,回收利用率高、可靠性強(qiáng),無(wú)效包退包換,公司提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù),各種種屬ELISA試劑盒產(chǎn)品齊全,質(zhì)量可靠。
樣本處理及要求:
1. 小鼠免疫球蛋白M(IgM)Elisa Kit血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。
仔細(xì)收集上清,保存過(guò)程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。
2. 血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心。
3. 尿液:用無(wú)菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。
4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
5. 組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè),其余冷凍備用。
6. 標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融.
7. 不能檢測(cè)含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性。
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進(jìn)口原裝腦靜脈血管平滑肌細(xì)胞規(guī)格:5 × 105次方(1ml)
進(jìn)口原裝腦靜脈血管平滑肌細(xì)胞規(guī)格:5 × 105次方(1ml)
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