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細(xì)胞角蛋白18抗體

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產(chǎn)品簡介

細(xì)胞角蛋白18抗體經(jīng)過*實(shí)踐已經(jīng)發(fā)展的相當(dāng)成熟,在免疫學(xué)診斷中的應(yīng)用也相當(dāng)廣泛。

詳細(xì)介紹

 細(xì)胞角蛋白18抗體 動(dòng)物體內(nèi)單抗的方法迄今為止,通常情況下均采用動(dòng)物體內(nèi)單抗的方法,鑒于絕大多數(shù)動(dòng)物用雜交瘤均由BALB/c小鼠的骨髓瘤細(xì)胞與同品系的脾細(xì)胞融合而得,因此使用的動(dòng)物當(dāng)然*BALB/c小鼠。本方法即將雜交瘤細(xì)胞接種于小鼠腹腔內(nèi),在小鼠腹腔內(nèi)生長雜交瘤,并產(chǎn)生腹水,因而可得到大量的腹水單抗且抗體濃度很高??梢娫摲ú僮骱啽?、經(jīng)濟(jì),不過,腹水中?;煊行∈蟮母鞣N雜蛋白(包括Ig),因此在很多情況下要提純后才能使用,而且還有污染動(dòng)物病毒的危險(xiǎn),故而用SPF級小鼠。 細(xì)胞角蛋白18抗體
A、材料:a. 成年BALB/c小鼠。b. 降植烷(Pristane)或液體石蠟。c. 處于對數(shù)生*的雜交瘤細(xì)胞。
B、方法:a. 腹腔接種降植烷或液體石蠟,每只小鼠0.3-0.5ml。b. 7-10天后腹腔接種用PBS或無血清培養(yǎng)基稀釋的雜交瘤細(xì)胞,每只小鼠5×105/0.2ml。c. 間隔5天后,每天觀察小鼠腹水產(chǎn)生情況,如腹部明顯膨大,以手觸摸時(shí),皮膚有緊張感,即可用16號針頭采集腹水,一般可連續(xù)采2-3次,通常每只小鼠可采5-10ml腹水;d. 將腹水離心(2000r/min 5分鐘),除去細(xì)胞成分和其他的沉淀物,收集上清,測定抗體效價(jià),分裝,-70℃凍存?zhèn)溆?,或凍干保存?br />公司產(chǎn)品詳情請參閱有關(guān)詳細(xì)論述鏈接點(diǎn)擊:Human adenylyl cyclase 1,AC-1 人腺苷酸環(huán)化酶1(AC-1)
Human Soluble Adenylate Cyclase,sAC 人可溶性腺苷酸環(huán)化酶(sAC)
Human Ornithine decarboxylase,ODC 人*脫羧酶(ODC)
Human protein tyrosine kinase,PTK 人蛋白*激酶(PTK/CD115)
Human protein tyrosine phosphatase,PTP/PTPase 人蛋白*磷酸酶(PTP/PTPase/CD148)
Human TNF α converting enzyme,TACE 人腫瘤壞死因子α轉(zhuǎn)化酶(TACE)
Human Polymorphonuclear Elastase,PMN Elastase 人多形核白細(xì)胞彈性蛋白酶(PMN Elastase)
Human urokinase-type plasminogen activator,uPA/PLAU 人*型纖溶酶原激活物(uPA/PLAU)
Human urokinase-type plasminogen activator,uPA/PLAU 人*8(KLK 8)
Human Kallikrein 6,KLK 6 人*6(KLK 6)
Human Fructose-1,6-bisphosphate aldolase,FDA 人果糖1,6二磷酸醛縮酶(FDA)
Human cathepsin D,cath-D 人組織蛋白酶D(cath-D)
Human hormone sensitive lipase,HSL 人激素敏感性脂肪酶(HSL)
Human pancreatickininogenase,PK 人*(PK)
Human aconitase 2,ACO-2 人烏頭酸酶2(ACO-2)
Human 26S proteasome,26S PSM 人26S蛋白酶體(26S PSM)
Human Cyclin-dependent kinase 4,CDK-4 人周期素依賴性激酶4(CDK-4)

(2) 體外培養(yǎng)單抗的方法總體上講,雜交瘤細(xì)胞系并不是嚴(yán)格的貼壁依賴細(xì)胞(anchorage dependent cell,ADC),因此既可以進(jìn)行單層細(xì)胞培養(yǎng),又可以進(jìn)行懸浮培養(yǎng)。雜交瘤細(xì)胞的單層細(xì)胞培養(yǎng)法是各個(gè)實(shí)驗(yàn)室zui常用的手段,即將雜交瘤細(xì)胞加入培養(yǎng)瓶中,以含10-15%小牛血清的培養(yǎng)基培養(yǎng),細(xì)胞濃度以1×106-2×106/ml為佳,然后收集培養(yǎng)上清,其中單抗含量約10-50ug/ml。顯然,這種方法制備的單抗量極為有限,無疑是不適用于單抗的大規(guī)模。要想在體外大量制備單抗,就必須進(jìn)行雜交瘤細(xì)胞的大量(高密度)培養(yǎng)。單位體積內(nèi)細(xì)胞數(shù)量越多,細(xì)胞存活時(shí)間越長,單抗的濃度就越高,產(chǎn)量就越大。 
 


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