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進(jìn)口ELISA試劑盒價(jià)格實(shí)驗(yàn)經(jīng)驗(yàn)分享

閱讀:159發(fā)布時(shí)間:2018-5-23

進(jìn)口ELISA試劑盒價(jià)格實(shí)驗(yàn)經(jīng)驗(yàn)分享
1、包被原的性質(zhì)很重要,蛋白濃度,是否降解,這關(guān)系到你做出的抗體可不可以被其識(shí)別,所以保存抗原很重要,我做重組蛋白時(shí),師兄都嚴(yán)格警告我一定要在冰浴下緩慢融化就是這個(gè)道理。還有有的包被原可能不是蛋白,對(duì)于*和脂類物質(zhì)或小分子物質(zhì)我們要事先對(duì)其改造再加以包被,我把方法簡要的列出如下:①親和素*:先親和素先包被載體,加入*化的DNA,這種包被方法均勻、牢固,已擴(kuò)大應(yīng)用于各種抗原物質(zhì)的定量測定。②脂類物質(zhì):可將其在有機(jī)溶劑(例如乙醇)中溶解后加入ELISA板孔中,開蓋置冰箱過夜或冷風(fēng)吹干,待酒精揮發(fā)后,讓脂質(zhì)自然干固在固相表面。③小分子必須依靠和大的蛋白載體偶聯(lián)后才能固定在固相載體上。
2、包被液的選擇,一般選擇ph9.6的碳酸鹽緩沖液。但有時(shí)由于試驗(yàn)的需要,包被原的特殊性也可能采用中性的緩沖溶液來包。應(yīng)注意以下原理:由于蛋白質(zhì)與聚苯乙烯固相載體是通過物理吸附結(jié)合的,靠的是蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)上的疏水基團(tuán)與固相載體表面的疏水基團(tuán)間的作用,這種物理吸附是非特異性的,受蛋白質(zhì)的分子量、等電點(diǎn)、濃度等的影響,大分子蛋白質(zhì)較小分子蛋白質(zhì)通常含有更多的疏水基團(tuán),故更易吸附到固相載體表面。具體的試驗(yàn)還要有堅(jiān)固的理論外也要實(shí)踐,看一下zui終可不可以應(yīng)用到自己試驗(yàn)當(dāng)中去。
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