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ELISA試劑盒價(jià)格實(shí)驗(yàn)結(jié)果

閱讀:132發(fā)布時(shí)間:2018-1-17

ELISA試劑盒價(jià)格實(shí)驗(yàn)結(jié)果
1、定量測(cè)定:用己知量的標(biāo)準(zhǔn)品作一系列稀釋后進(jìn)行ELISA測(cè)定,與待測(cè)標(biāo)本同時(shí)進(jìn)行測(cè)定,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,結(jié)果以量或活性單位表示之。
2、半定量測(cè)定:結(jié)果一般以滴度表示。將標(biāo)本連續(xù)稀釋后,進(jìn)行ELISA檢測(cè),在陽(yáng)性臨界值以上的zui高稀釋度即為該標(biāo)本的“滴度”。
3、定性測(cè)定
(1)陽(yáng)性判定值法(cut-off value,CO值):一般為陰性對(duì)照的平均A值加一個(gè)常數(shù),試劑制備嚴(yán)格標(biāo)準(zhǔn)化,要先計(jì)算出陽(yáng)性對(duì)照A值平均數(shù)和陰性對(duì)照A值平均數(shù)。標(biāo)本A值≥CO值即為陽(yáng)性。
(2)抑制率法:在競(jìng)爭(zhēng)抑制法中結(jié)果可用抑制率表示。抑制率(%)=(A陰性對(duì)照A- A待測(cè))/陰性對(duì)照X100%,一般以抑制率≥50%為陽(yáng)性。
樣本處理及要求:
1. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過(guò)程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。
2. 血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心。3. 尿液:用無(wú)菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。
4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
5. 組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后,稱(chēng)取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè),其余冷凍備用。
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