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恒遠ELISA技術(shù)對抗體的4個重點問題解答
閱讀：1259 發(fā)布時間：2014-12-17 Abcam品牌抗體試劑是上海恒遠主營且熱銷的產(chǎn)品系列之一，昨日下午，我公司ELISA技術(shù)對抗體的4個重點問題做出了分析解答，供您參考。
問題一：當(dāng)選擇一個肽用于免疫原，什么是重要的？
答：通常蛋白的C端或N端是蛋白質(zhì)中暴露機會zui高的部分。另外，為了模仿蛋白的行為，合成的肽應(yīng)該有類似于蛋白質(zhì)“cut out off”后的結(jié)構(gòu)和電荷。因此：
1. 來源于C端的多肽那么N端應(yīng)用乙?；揎棧?br /> 2. 來源于N端的多肽那么C端應(yīng)用酰胺化修飾；
3. 來源于內(nèi)部序列的多肽則需要肽的兩端都修飾。
問題二：什么樣的抗原(s)可以用于注射？
答：天然蛋白，重組蛋白，多肽碳水化合物或其他微生物、細(xì)菌、病毒提取物可用于免疫接種，需要大小為5-10 kDa的小分子誘導(dǎo)充分的免疫反應(yīng)，有生物毒害的材料禁止用于免疫接種。上海恒遠提示：
1. 如果抗體作用于變性的靶標(biāo)蛋白，變性的抗原是。
2. 如果使用的抗體的目標(biāo)蛋白質(zhì)是天然蛋白，非變性的抗原是。
3. 并不是所有anti-peptide抗體都能識別天然蛋白質(zhì)，因此謹(jǐn)慎選擇肽序列是至關(guān)重要的。
4. 通過重組蛋白在細(xì)菌表達體系誘導(dǎo)所制備的抗體在某些情況下無法識別天然蛋白質(zhì)。原因可能是在細(xì)菌細(xì)胞中表達的蛋白質(zhì)抗原發(fā)生錯誤的折疊。不能保證用于任何的免疫反應(yīng)中都能得到很好的成功。
問題三：用于免疫接種的抗原需要多少量？
答：這取決于抗原的免疫原性。在標(biāo)準(zhǔn)試驗方案中，我們使用：大約500μg肽/動物/15周齡，約400μg蛋白質(zhì)/動物/15周齡。
如果所選動物抗原和抗體之間的關(guān)聯(lián)性較低，免疫接種時較少量的抗原(少于10μg)也是可以接受的。我們還可以使用自己的免疫方案。上海恒遠提醒注意：如果蛋白質(zhì)需要濃縮，在某些情況下，在濃縮設(shè)備中蛋白會部分附著在膜上從而部分蛋白質(zhì)損失。
問題四：為什么抗原誘導(dǎo)反應(yīng)只會產(chǎn)生一些IgM抗體？
答：由于缺乏T細(xì)胞刺激，高度保守的哺乳動物蛋白質(zhì)的響應(yīng)往往很薄弱，主要導(dǎo)致IgM抗體的產(chǎn)生，不過，也有例外。如果是保守的哺乳動物抗原，則使用親源關(guān)系遠的物種。
2014年末優(yōu)惠產(chǎn)品展示(部分)：
| 一抗 | 二抗 |
| 促腎上腺皮質(zhì)激素抗體 | 成骨特異性轉(zhuǎn)錄因子抗體 |
| F-肌動蛋白抗體 | CREB結(jié)合蛋白抗體 |
| 神經(jīng)絲蛋白抗體 | CBX5抗體 |
| 內(nèi)收蛋白抗體 | 瓜氨酸環(huán)肽抗體 |
| 腎上腺髓質(zhì)素抗體 | 巨噬細(xì)胞炎性蛋白3α抗體 |
| 腺苷受體A3抗體 | 細(xì)胞周期相關(guān)激酶抗體 |
| alpha-2腎上腺素能受體抗體 | 氨肽酶N抗體 |
| 芳香烴受體抗體 | 凝血調(diào)節(jié)蛋白抗體 |
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