檢測目的：用于測定血清，血漿及相關(guān)液體等樣本。例如適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標(biāo)本..需要而未提供

產(chǎn)品全稱：ADH 進(jìn)口檢測試劑盒

英文名稱：ADH ELISA Kit

產(chǎn)品貨號：A097016

規(guī)格：48T/96T

服務(wù)：公司產(chǎn)品僅用于科研可提供免費(fèi)代測服務(wù)，以及產(chǎn)品說明書和技術(shù)指導(dǎo)等

保存環(huán)境：2-8℃低溫、避光、防潮

主要成分：酶標(biāo)板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等

試劑盒組成及試劑配制 ：

檢測程序：

1.  加樣：每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品 100ul ，將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。

2.  洗板：用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌 4-6 次，向?yàn)V紙上印干。

3.  每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。

4.  洗板：同前。

5.  每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul 。將反應(yīng)板置 37 ℃ 3 0 分鐘。

6.  洗板：同前。

7.  每孔加入底物工作液100ul ，置 37   ℃ 暗處反應(yīng)15 分鐘。

8.  每孔加入100ul 終止液混勻。

9.  30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在 45 0 nm 處測 吸光值。

樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備：

ELISA試劑盒液體樣本：包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。

（1）血清

室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。

（2）血漿：

應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。

（3）尿液：

用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。

（4）細(xì)胞培養(yǎng)上清：

檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。

（5）培養(yǎng)細(xì)胞

檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。

（6）組織標(biāo)本

切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。

P16（抗人；抗兔；抗小鼠；抗大鼠）100微克Malachite-green broth （ｂａｓｅ）孔雀石綠肉湯（基礎(chǔ)）5-O-甲基維斯米醇 4'-O-beta-Glucopyranosyl-5-O-Methylv

P21（抗人；抗兔；抗小鼠；抗大鼠）100微克Malt extract agar麥芽瓊脂D-甘露糖鹽鹽

P27（抗人；抗兔；抗小鼠；抗大鼠）100微克Malt extract broty 麥芽瓊脂瓊脂糖3：1HRB

P35（抗人；抗兔；抗小鼠；抗大鼠）100微克Mannitol salt phenol-red agar甘露鹽酚紅瓊脂4-溴聯(lián)苯

P35/P25（抗人；抗兔；抗小鼠；抗大鼠）100微克Maximum Recovery Diluent 大恢復(fù)稀釋液偶氮胂Ⅲ

Annexin V（抗人；抗兔；抗小鼠；抗大鼠）100微克M-Broth M肉湯/甘露糖肉湯人巨噬炎性蛋白1α（MIP-1α/CCL3）ELISA試劑盒,

PAR-1（抗人；抗兔；抗小鼠；抗大鼠）100微克Mcaso broth with novobiocin( Mtsb+N) m乙白大豆肉湯（含新生素）人白介素13（IL-13）ELISA試劑盒,IL-13 ELISA kit

PAR-2（抗人；抗兔；抗小鼠；抗大鼠）100微克Meat liver agar 肉肝瓊脂人CD30分子（CD30）ELISA試劑盒,CD30 ELISA kit

PAR-3（抗人；抗兔；抗小鼠；抗大鼠）100微克m EC-broth with Nocobiocin mEC肉湯（含新生素）人核仁形成區(qū)嗜銀蛋白（Ag-NORs）ELISA試劑盒,Ag-NORs ELISA kit

PARP（抗人；抗兔；抗小鼠；抗大鼠）100微克Agar MFC Mfc 瓊脂人抗乙型肝炎病e抗體（HBeAb）ELISA試劑盒, HBeAb ELISA

AKT（抗人；抗兔；抗小鼠；抗大鼠）100微克Enterobacteriac enrichment broth acc.to MOSSEL腸桿菌富集肉湯人軍團(tuán)菌抗原（LP Ag）ELISA試劑盒,LP Ag ELISA

P38（抗人；抗兔；抗小鼠；抗大鼠）100微克MRS agar Lactobacillus agar acc.to DEMAN,ROGOSA and SHARPE MRS人細(xì)菌性?。˙V）ELISA試劑盒, BV ELISA

PDGF-A（抗人；抗兔；抗小鼠；抗大鼠）100微克瓊脂/乳菌瓊脂人GTP活化蛋白（GAP）ELISA試劑盒, GAP ELISA

PDGF-B（抗人；抗兔；抗小鼠；抗大鼠）100微克MRS agar Lactobacillus broth acc.to DEMAN,ROGOSA and SHARPE MRS人低密度脂蛋白受體（LDLR）ELISA試劑盒,LDLR ELISA

VEGF（抗人；抗兔；抗小鼠；抗大鼠）100微克瓊脂/乳菌瓊脂人1,25二羥基D3（1,25-（OH）2D3/DVD/DHVD 3）ELISA試劑盒,1,
ADH 進(jìn)口檢測試劑盒馬來氟吡汀信號轉(zhuǎn)導(dǎo)蛋白亞基7A抗體植

馬來氟吡汀(標(biāo)準(zhǔn)品)凋亡抑制因子抗體植鈣

氟維司群D型產(chǎn)氣莢膜梭菌抗體植鈉

氟維司群降鈣素抗體植鋅

氟維司群20號染色體開放閱讀框14抗體酯蟾配基

結(jié)締組織生長因子抗體重樓皂E

性T抗原-4抗體重樓皂I

降鈣素受體抗體重樓皂II

操作流程：

（1）待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl，每種樣品設(shè)3個平行孔；設(shè)兩個陰性對照孔，每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl；另設(shè)一個空白對照孔，加入純細(xì)胞裂解液100μl。

（2）酶標(biāo)板置4℃，包被過夜。

（3）洗板：吸干孔內(nèi)反應(yīng)液，用洗滌液過洗一遍（將洗滌液注滿板孔后，即甩去），之后將洗滌液注滿板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。

（4）陰性對照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。

（5）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。

（6）洗板，同（4）。

（7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。

（8）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。

（9）洗板，同（4）。

（10）每孔加TMB顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應(yīng)15-20min。

（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。

（12）分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，最終測得的OD值為兩者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。

（13）數(shù)據(jù)處理：在得出標(biāo)本（S）和陰性對照（N）的 OD值后，計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)。