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SOD檢測(cè)試劑盒的基本原理分析

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  為了測(cè)定SOD的活性,研究人員嘗試了許多間接的或者直接的方法,其中,NBT的間接法zui為常用,因?yàn)樗芊奖?。但是,NBT法有幾個(gè)缺點(diǎn),例如生成的染料水溶性差,而且會(huì)和黃嘌呤氧化酶的還原型發(fā)生反應(yīng)。雖然cytochromeC法也常被用來做SOD檢測(cè),但它和超氧化物反應(yīng)過于劇烈,不能測(cè)定低水平的SOD。SODAssayKit-WST®使用了Dojindo自己發(fā)明的易溶于水的噻唑鹽:WST®-1(2-(4-碘苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯基)-2氫-四唑鹽,二鈉鹽),能夠和超氧陰離子反應(yīng)生成水溶性的染料,因此可以簡(jiǎn)便地進(jìn)行SOD的檢測(cè)。
  
  WST®-1與超氧陰離子反應(yīng)的劇烈程度比cytochromeC小70倍;因此,它的檢測(cè)靈敏度非常高,并且能夠通過將樣品用buffer稀釋,使背景的吸光度zui小化。WST®-1不會(huì)和黃嘌呤氧化酶的還原型發(fā)生反應(yīng),因此,能夠檢測(cè)SOD100%的抑制率。WST®-1被超氧陰離子還原的比率與黃嘌呤氧化酶的活性線性相關(guān),并且會(huì)被SOD所抑制(見下圖)。因此,SOD或者SOD類似物的IC50(50%的抑制濃度)就能用比色法來測(cè)定。
  
  SOD檢測(cè)試劑盒
  
  1、靈敏度高,結(jié)果準(zhǔn)確可靠
  
  2、操作簡(jiǎn)便,重復(fù)性好
  
  3、采用96孔板檢測(cè),省時(shí)省力
  
  4、可一次檢測(cè)多個(gè)樣品
  
  5、采用WST染色方法,可以測(cè)定100%SOD抑制率超氧化物歧化酶(SOD)能夠催化超氧陰離子(O2•-)歧化,生成過氧化氫以及單質(zhì)氧,是一種重要的抗氧化酶。哺乳動(dòng)物細(xì)胞溶質(zhì)中的SOD呈綠色,并且由兩種亞單位構(gòu)成,一種含有銅,另一種含有鋅(Cu/Zn-SOD)。線粒體和細(xì)菌SOD為紅紫色并含有錳(Mn-SOD)。E.coli含有Mn-SOD和Fe-SOD。

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