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閱讀:714發(fā)布時(shí)間:2014-11-3
在細(xì)胞培養(yǎng)中zui常用的抗生素是*與*
細(xì)胞在單純的細(xì)胞培養(yǎng)基中不能存活,在特殊類型的細(xì)胞培養(yǎng)中必須提供某些痕量營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)及生長(zhǎng)因子才能使細(xì)胞得以生長(zhǎng)并維持生長(zhǎng)狀態(tài)?;A(chǔ)培養(yǎng)基常常要添加血清,血清終濃度多為5~20%。特殊用途的血清來源須用經(jīng)驗(yàn)確定,廣泛應(yīng)用的血清種類有馬血清與胎牛血清。胎牛血清中富含有絲分裂因子,常選其作增殖細(xì)胞用的血清,也用于細(xì)胞系和原代培養(yǎng)。而馬血清常常用來作有絲分裂后的神經(jīng)元培養(yǎng)。然而,很多人也將胎牛血清用于神經(jīng)元培養(yǎng),也有人用馬血清來培養(yǎng)膠質(zhì)細(xì)胞。用大鼠進(jìn)行神經(jīng)元培養(yǎng)的某些研究者喜歡使用同型血清;人類的胎盤血清,亦曾用于神經(jīng)組織的器官類型的培養(yǎng),也用在一些特殊培養(yǎng)種類中。
在細(xì)胞培養(yǎng)中zui常用的抗生素是*與*。這兩種抗生素?;旌鲜褂?。在一些實(shí)驗(yàn)室里,它們常規(guī)加入所有的培養(yǎng)基中。*通常有廣譜抗菌效應(yīng),并具有溶液穩(wěn)定性,故也被一些實(shí)驗(yàn)室使用,特別是當(dāng)有低水平的污染存在時(shí)更是這樣。以上這些試劑對(duì)霉菌與酵母菌的污染均無效。盡管很多實(shí)驗(yàn)室在細(xì)胞系的培養(yǎng)基中常規(guī)加入抗生素作繼代培養(yǎng),但仍建議不要在原代培養(yǎng)中加入抗生素,其理由之一是獲得的細(xì)胞是無菌的,原代培養(yǎng)時(shí)的細(xì)菌污染很少發(fā)生。其次,盡管認(rèn)為抗生素對(duì)細(xì)胞代謝的影響可忽略,但避免使用它們,以免細(xì)胞生長(zhǎng)環(huán)境的不穩(wěn)定。zui重要的是要意識(shí)到培養(yǎng)中主要污染物的類型,它們通常暗示了問題的來源。
細(xì)胞培養(yǎng)基現(xiàn)在已成為應(yīng)用于生命科學(xué)的主要技術(shù)之一,它是從動(dòng)物或植物移取的細(xì)胞、組織或器官并將它們?cè)谟欣谏L(zhǎng)的人工環(huán)境中培養(yǎng)的統(tǒng)稱。細(xì)胞zui適生長(zhǎng)的基本環(huán)境要求是:控制的溫度,良好的細(xì)胞附著基質(zhì)和適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)液和培養(yǎng)箱,能夠保持正確的pH值和滲透壓。在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)中zui重要和zui關(guān)鍵的一步是選擇適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)液用于體外培養(yǎng)。生長(zhǎng)培養(yǎng)基或培養(yǎng)基是液體或凝膠狀態(tài)的,設(shè)計(jì)用于支持微生物、細(xì)胞或小的植株生長(zhǎng)。培養(yǎng)基是控制*的細(xì)胞生長(zhǎng)zui重要和zui復(fù)雜的因素。細(xì)胞培養(yǎng)基通常包括適當(dāng)?shù)募?xì)胞能量來源和調(diào)節(jié)細(xì)胞周期的化合物。一個(gè)典型的培養(yǎng)基還需要補(bǔ)充氨基酸,維生素,無機(jī)鹽,葡萄糖,和血清,以提供生長(zhǎng)因子,激素,和附著因子。除了營(yíng)養(yǎng)外,培養(yǎng)基也有助于保持培養(yǎng)體系中的pH值和滲透壓平衡。
胎牛血清是動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)基zui常見的補(bǔ)充成分。它用來作為一種成本相對(duì)較低的補(bǔ)充成分,提供動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)*的培養(yǎng)基。這些補(bǔ)充劑能夠?yàn)椴环€(wěn)定或不溶于水的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)提供載體或螯合劑,提供激素和生長(zhǎng)因子,蛋白酶抑制劑,并結(jié)合并中和有毒部分。無血清培養(yǎng)基:培養(yǎng)基中含有血清存在有很多缺點(diǎn),可能會(huì)成為免疫學(xué)研究中潛在的嚴(yán)重誤解的原因。為了克服使用血清的這些缺點(diǎn),一些無血清培養(yǎng)基中已經(jīng)開發(fā)出來了。這些培養(yǎng)基通常是專門配制的,用以單一類型細(xì)胞的培養(yǎng),包含確定量的純化的生長(zhǎng)因子、脂蛋白和其它蛋白質(zhì),而這些物質(zhì)本來是由血清提供的。這些培養(yǎng)基也被稱為“確定的培養(yǎng)基”,因?yàn)檫@些培養(yǎng)基中的物質(zhì)是可知的。
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