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技術(shù)文章

人C型鈉尿肽ELISA試劑盒實驗原理

閱讀:1744發(fā)布時間:2011-7-20

人C型鈉尿肽ELISA試劑盒自備材料:
1. 蒸餾水。
2. 加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。
3. 振蕩器及磁力攪拌器等。

人C型鈉尿肽ELISA試劑盒實驗原理:
本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中人C型鈉尿肽(CNP)水平。用純化的人C型鈉尿肽(CNP)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入C型鈉尿肽(CNP),再與HRP標記的C型鈉尿肽(CNP)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的C型鈉尿肽(CNP)呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中人C型鈉尿肽(CNP)濃度。

人C型鈉尿肽ELISA試劑盒樣品收集、處理及保存方法:

1、 血清……操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血紅細胞迅速小心地分離。
2、 血漿……EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
3、 細胞上清液……1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4、 組織勻漿……將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液。
5、 保存……如果樣品不立即使用,應將其分成小部分-70℃保存,避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。


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