大鼠骨粘連蛋白(ON)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理為酶聯(lián)免疫法（簡(jiǎn)稱ELISA），ELISA檢測(cè)敏感性高，特異性強(qiáng)，操作簡(jiǎn)單等特點(diǎn)得到國(guó)內(nèi)外眾多科研工作者的認(rèn)可和推崇，被廣泛應(yīng)用在免疫學(xué)各領(lǐng)域中，酶聯(lián)免疫法ELISA試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)，依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體，經(jīng)過(guò)溫育并*洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD 值），計(jì)算樣品濃度。

規(guī)格：

48T和96T，48T可以測(cè)42樣本，96T可以測(cè)90樣本

應(yīng)用范圍：

僅限科研使用，請(qǐng)勿用于醫(yī)藥、臨床診斷或治療，食品及化妝品等用途。

樣本類型：

人動(dòng)植物組織、細(xì)胞、血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液等生物類液體樣本均可檢測(cè)。

樣本收集注意事項(xiàng)：

收集標(biāo)本前必須清楚要檢測(cè)的成份是否足夠穩(wěn)定。對(duì)收集后當(dāng)天進(jìn)行檢測(cè)的標(biāo)本，儲(chǔ)存在4 ℃?zhèn)溆?，如有特殊原因需要周期收集?biāo)本，將標(biāo)本及時(shí)分裝后放在-20 ℃或-70 ℃條件下保存。避免反復(fù)凍融。標(biāo)本2 -8 ℃可保存48小時(shí)，-20 ℃可保存 1個(gè)月。-70 度可保存6個(gè)月。部分激素類標(biāo)本需添加抑肽酶。

大鼠骨粘連蛋白(ON)ELISA試劑盒規(guī)格及配置

96孔板試劑盒配置

微孔酶標(biāo)板12孔×8條，標(biāo)準(zhǔn)品(濃度見(jiàn)說(shuō)明)0.3mL*6管，樣本稀釋液6mL，檢測(cè)抗體-HRP10mL，20×洗滌緩沖液25mL，底物A6mL，底物B6mL，終止液6mL，封板膜2張，說(shuō)明書1份，自封袋1個(gè)

48孔板試劑盒配置

微孔酶標(biāo)板12孔×4條，標(biāo)準(zhǔn)品(濃度見(jiàn)說(shuō)明)0.3mL*6管，樣本稀釋液3mL，檢測(cè)抗體-HRP5mL，20×洗滌緩沖液15mL，底物A3mL，底物B3mL，終止液3mL，封板膜2張，說(shuō)明書1份，自封袋1個(gè)

大鼠骨粘連蛋白(ON)ELISA試劑盒自備物品

一、酶標(biāo)儀（要求波長(zhǎng)450）

二、加樣器：5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。

三、37℃恒溫箱

大鼠骨粘連蛋白(ON)ELISA試劑盒操作步驟

一、從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。

二、設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔，標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL；

三、樣本孔先加待測(cè)樣本10μL，再加樣本稀釋液40μL；空白孔不加。

四、除空白孔外，標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過(guò)氧化物酶（HRP）標(biāo)記的檢測(cè)抗體100μL，用封板膜封住反應(yīng)孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

五、棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液，靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復(fù)洗板5次（也可用洗板機(jī)洗板）。

六、每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。

七、每孔加入終止液50μL，15min內(nèi)，在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。

大鼠骨粘連蛋白(ON)ELISA試劑盒結(jié)果判斷

繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線（詳情可見(jiàn)合肥萊爾生物科技有限公司，行業(yè)新聞文章ELISA試劑盒標(biāo)準(zhǔn)曲線制作）：在Excel工作表中，以標(biāo)準(zhǔn)品濃度作橫坐標(biāo)，對(duì)應(yīng)OD值作縱坐標(biāo)，繪制出標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸曲線，按曲線方程計(jì)算各樣本濃度值。