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當(dāng)前位置:西安齊岳生物科技有限公司>>技術(shù)文章>>齊岳提供吖啶酯NSP-SA-NHS熒光標(biāo)記物的用量對照表
吖啶酯NSP-SA-NHS cas199293-83-9
吖啶酯(NSP-DMAE-NHS)外觀為粉末,cAs號194357-64-7,是一種重要的化學(xué)發(fā)光試劑。Y啶酯具有反應(yīng)條件溫和、重現(xiàn)性好、發(fā)光、發(fā)光強(qiáng)度強(qiáng)等特點(diǎn),應(yīng)用于無機(jī)有機(jī)化合物、環(huán)境監(jiān)測、生物及科研分析等領(lǐng)域,另外也普遍用于多種類型的靈敏檢測和診斷。
吖啶用量對照表
連接及純化
舉例針對標(biāo)記抗體抗體的分子量為 180kd 對應(yīng) 15 倍的吖啶酯。如果用戶的待標(biāo)記樣品是其他的分子量,請參考附表 1 改變試劑的配比。
1.取 10 µL 稀釋吖啶酯母液 (2.5mg/ml),加入 90 µL 無水 DMSO(or DMF) 稀釋10倍,配成吖啶酯工作液 (0.25mg/ml)。
2.使用0.2M NaHCO3 (pH=9.0)溶液稀釋 50µg 的抗體至 300 µL,加入 10 µL吖啶酯工作液 (0.25mg/ml)(參考附表 1)。
3.錫箔紙包好,室溫標(biāo)記0.5~1h。
4.淬滅反應(yīng),加入 100 µL 標(biāo)記終止緩沖液,室溫混勻 30 分鐘(注:如果標(biāo)記較充分,也可以跳過此步驟,直接進(jìn)行柱純化)。
5. 脫鹽柱純化,收集吖啶標(biāo)記蛋白組分并檢測濃度,請參考說明書后文。
6. 檢測標(biāo)記的蛋白,取10µL吖啶標(biāo)記蛋白,放于黑色96孔板中,向每個(gè)微孔注入 50 µL~150µL吖啶酯發(fā)光液,立即檢測,如果發(fā)光過強(qiáng),可以對標(biāo)記蛋白再進(jìn)行若干倍的稀釋,使其在儀器的發(fā)光檢測限內(nèi)。注:吖啶酯發(fā)光液現(xiàn)用現(xiàn)配,或者將NaOH溶液和分別配成2x母液,使用的時(shí)候再1:1進(jìn)行混合。
7. 吖啶酯標(biāo)記的蛋白可以在酸性緩沖液中4℃避光存儲(chǔ)(注意補(bǔ)加疊氮鈉等防腐劑),如果儲(chǔ)存不佳,則請避光保存于-20℃或者-80℃。
我們有化學(xué)發(fā)光試劑、化學(xué)發(fā)光底物、發(fā)光標(biāo)記物、發(fā)光劑、染料探針類、微生物和酶的顯色底物以及體外診斷試劑。我們還可以接受定制合成服務(wù),對科研機(jī)構(gòu)支持。
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