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西安齊岳生物科技有限公司

靶向修飾納米紅細(xì)胞膜包裹阿霉素(納米科研遞釋系統(tǒng))

時(shí)間:2021-3-5閱讀:587
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靶向修飾納米紅細(xì)胞膜包裹阿霉素(納米科研遞釋系統(tǒng))

西安齊岳生物供應(yīng)靶向修飾納米紅細(xì)胞膜包裹阿霉素FA/PEG-DOX-Nano-RBCs,西安齊岳生物科技有限公司是一家集工業(yè)生產(chǎn),分子生物、生化試劑、常規(guī)試劑、常用耗材與試劑代理生物科研公司,齊岳生物擁有一站式實(shí)驗(yàn)室采購(gòu)服務(wù)能力,產(chǎn)品鏈供應(yīng)完備,涉及有機(jī)金屬試劑、常用生化試劑、分子生物學(xué)試劑、分子生物學(xué)領(lǐng)域等相關(guān)產(chǎn)品、現(xiàn)我們提供定制產(chǎn)品靶向修飾納米紅細(xì)胞膜包裹阿霉素FA/PEG-DOX-Nano-RBCs產(chǎn)品,將制備方法總結(jié)如下:

采用低滲裂解法及納米擠出工藝, 制備了和聚乙二醇共同修飾的納米紅細(xì)胞膜科研載體, 并以此負(fù)載鹽酸阿霉素構(gòu)建了一種 具有長(zhǎng)循環(huán) 和 靶向雙重作用的納米科研遞釋系統(tǒng)(FA/PEG-DOX-Nano-RBCs)。 該載藥系統(tǒng)利用了紅細(xì)胞膜的生物相容性, PEG 長(zhǎng)循環(huán)作用及配體的識(shí)別靶向性質(zhì), 有望阿霉素的抗藥效, 降低其副作用, 對(duì)于拓展重大的細(xì)胞具有較好的應(yīng)用意義。

FA/PEG-DOX-Nano-RBCs的制備流程圖如圖1所示,其具體操作過(guò)程如下:

(1) 壓積紅細(xì)胞的提取

大鼠眼眶靜脈叢取全血,4000 rpm離心10min棄去血漿和白細(xì)胞層,加入4倍體積預(yù)冷的 PBS溶液充分吹打,4000rpm離心10min棄上清,并重復(fù)上述操作3次,得到壓積紅細(xì)胞。

 

(2) 血影紅細(xì)胞(ghost)的制備

取1mL 壓積紅細(xì)胞, 加入4倍體積低滲0.25×PBS 溶液4 ℃孵育20 min (5 min 上下顛倒一次),6000rpm 離心10min,棄上清,再加入4倍體積低滲PBS溶液反復(fù)清洗直到上清無(wú)色, 制得血影紅細(xì)胞 。

 

配體修飾過(guò)程制備

取相同體積PBS配制的FA-PEG-DSPE 以 mPEG-DSPE溶液加入上述制備的血影細(xì)胞中 , 于37℃搖床上孵育1h,4000rpm離心5min游離FA-PEG-DSPE及mPEG-DSPE, 制得及PEG修飾后的血影紅細(xì)胞。

 

(4)FA/PEG-DOX-RBCs的制備

取1mL經(jīng)修飾的血影紅細(xì)胞,加入4倍體積濃度的DOX(溶于0.25×PBS) 溶液, 4℃條件下振搖孵育30min,加入計(jì)算體積的10×PBS濃縮液,室溫振搖孵育90min。 6000rpm 離心10 min, 棄上清,用 PBS 溶液洗滌三次,充分棄去游離 DOX, 加入 4 倍體積PBS溶液,混勻,得到 FA/PEG-DOX-RBCs混懸液。

 

(5)FA/PEG-DOX-Nano-RBC的制備

取上述制備的 FA/PEG-DOX-RBCs 混懸液 5 mL,用 20%功率探頭聲5min, 其次采用脂質(zhì)擠出法使其依次通過(guò) 800 nm、 400 nm、 200 nm、 100 nm 孔徑的 聚 碳 酸 酯 膜 21 次 , 得 到 FA/PEG-DOX-Nano-RBC 混 懸 液 。 將FA/PEG-DOX-Nano-RBC 混懸液置于 5 mL 濾離心管內(nèi), 6000 rpm離心 10 min,甩去游離 DOX, 將濾離心后得到的 FA/PEG-DOX-Nano-RBC 重新懸浮于 PBS溶液中, 4 ℃避光儲(chǔ)存于冰箱中備用。

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溫馨提示:西安齊岳生物科技有限公司供應(yīng)的產(chǎn)品用于科研,不能用于其他用途,axc,2020.03.05

 

 

 

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