名稱：Y2HGold Yeast Strain 酵母雙雜交用甘油菌

其他名稱：Y2HGold酵母雙雜交用甘油菌

規(guī)格：300μl

運(yùn)輸溫度：干冰運(yùn)輸

保存溫度：-20℃保存

期：1年

應(yīng)用：酵母雙雜交用菌株

產(chǎn)品描述：

酵母雙雜交系統(tǒng)是用于體內(nèi)研究蛋白相互作用的一種便利的工具，常用的如GAL4為基礎(chǔ)的雙雜交系統(tǒng)，使用酵母轉(zhuǎn)錄因子GAL4來(lái)檢測(cè)轉(zhuǎn)錄后的蛋白相互作用。工作原理為：一個(gè)酵母轉(zhuǎn)錄因子GAL4由兩個(gè)可以分開(kāi)，功能上相互的結(jié)構(gòu)域組成，N端有一個(gè)147個(gè)氨基酸組成的DNA結(jié)合域（DNA- BD），C端有一個(gè)由113個(gè)氨基酸組成的轉(zhuǎn)錄域（AD）。DB可以識(shí)別并結(jié)合上游序列（UAS），而AD能UAS下游基因進(jìn)行轉(zhuǎn)錄，單獨(dú)的BD或AD不能基因轉(zhuǎn)錄。正常情況，BD和AD不會(huì)結(jié)合，將待檢測(cè)的分別與BD和AD融合，形成誘餌融合蛋白（bait-DNA）和誘捕融合蛋白（prey-DNA），只有當(dāng)誘餌和誘捕蛋白發(fā)生相互作用，促使BD和AD的相互接近，形成GAL4，從而報(bào)告基因的轉(zhuǎn)錄。

Y2HGold是GAL4系統(tǒng)酵母雙雜交用實(shí)驗(yàn)菌株，能直接轉(zhuǎn)化質(zhì)粒或與MATα型酵母菌株Y187通過(guò)接合（mating）操作進(jìn)行蛋白相互作用驗(yàn)證或雙雜交文庫(kù)篩選和構(gòu)建。Y2HGold-GAL4酵母雙雜交系統(tǒng)需要兩種質(zhì)粒配套使用，分別為pGBKT7和pGADT7。前者篩選標(biāo)志為Trp，用于表達(dá)DNA-BD與誘餌蛋白（bait）的融合蛋白；后者篩選標(biāo)志為Leu，用于表達(dá)AD與誘捕蛋白（prey）的融合蛋白。Y2HGold有四個(gè)報(bào)告基因：AUR1-C，HIS3, ADE2, MEL1，分別由三個(gè)*異源的Gal4反應(yīng)啟動(dòng)元件-G1，G2，M1調(diào)控，這三種啟動(dòng)子只有GAL4識(shí)別的17bp區(qū)相同，其余部分同。這一特征縮減假陽(yáng)性發(fā)生的概率。因?yàn)?，誘捕蛋白單獨(dú)結(jié)合引起假陽(yáng)性都需要識(shí)別3個(gè)不同序列，4個(gè)報(bào)告基因表達(dá)。另外，新報(bào)告基因AUR1-C與以往的營(yíng)養(yǎng)缺陷報(bào)告基因相比，其篩選-金擔(dān)子素（Aureobasidin A，AbA）可以殺死非抗性克隆，大大降低背景克隆的生長(zhǎng)。具有更低背景，這一特點(diǎn)也可降低酵母雙雜交假陽(yáng)性發(fā)生的概率。

基本信息：

培養(yǎng)基：YPDA

培養(yǎng)條件：28℃，YPDA，有氧培養(yǎng)

保存方式：30%甘油，-20℃保存

轉(zhuǎn)化方式：PEG/LiAC；電激；

基本應(yīng)用：酵母雙雜交實(shí)驗(yàn)

保存與運(yùn)輸方法

保存：-20℃保存，一年。運(yùn)輸：干冰運(yùn)輸。

使用說(shuō)明：

齊岳生物提供的各批次質(zhì)粒菌株發(fā)貨前均經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的多重驗(yàn)證，如存在質(zhì)量問(wèn)題，請(qǐng)?jiān)谑盏疆a(chǎn)品三個(gè)月內(nèi)通知我司。收到甘油菌后，請(qǐng)及時(shí)在固體平板上劃線培養(yǎng)，挑取單菌落接種到液體培養(yǎng)基中，震蕩培養(yǎng)后使用并保存新的甘油菌。

注意事項(xiàng)

1.使用甘油菌時(shí)可不*融解，在甘油菌表面蘸取少量涂布固體瓊脂平板即可；也可*融解后使用，但隨著凍融次數(shù)的增加，菌株的活力會(huì)逐漸下降。

2. 為了您的和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

供應(yīng)產(chǎn)品目錄：

 SD/-Ade with Agar
SD/-Ade/-His with Agar
SD/-Ade/-His/-Leu/-Met/-Trp with Agar
SD/-Ade/-His/-Leu/-Met-Trp/-Ura with Agar
SD/-Ade/-His/-Leu/-Trp with Agar
SD/-Ade/-His/-Leu/-Trp/-Ura with Agar
SD/-Ade/-His/-Met with Agar
SD/-Ade/-His/-Trp with Agar
SD/-Ade/-Leu with Agar
SD/-Ade/-Leu/-His with Agar
SD/-Ade/-Leu/-Trp with Agar
SD/-Ade/-Trp with Agar
SD/-Arg/-His/-Leu/-Lys/-Ura with Agar
SD/-Cys/-Met/-Ura with Agar
SD/-Glu/-Ura with Agar
SD/-His with Agar
SD/-His/-Leu with Agar
SD/-His/-Leu/-Met/-Trp with Agar
SD/-His/-Leu/-Met/-Ura with Agar
SD/-His/-Leu/-Trp with Agar
SD/-His/-Leu/-Trp/-Ura with Agar
SD/-His/-Leu/-Ura with Agar
SD/-His/-Trp with Agar
SD/-His/-Trp/-Ura with Agar
SD/-His/-Ura with Agar
SD/-Leu with Agar
SD/-Leu/-Ile/-Val with Agar
SD/-Leu/-Met/-Trp with Agar
SD/-Leu/-Met/-Trp/-Ura with Agar
SD/-Leu/-Trp with Agar
SD/-Leu/-Trp/-Ura with Agar
SD/-Leu/-Ura with Agar
SD/-Met with Agar
SD/-Met/-Trp with Agar
SD/-Trp with Agar
SD/-Trp/-Ura with Agar
SD/-Ura with Agar

yyp2021.2.3