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西安齊岳生物科技有限公司

LAP和Irgacure熒光引發(fā)劑在生物墨水中對(duì)細(xì)胞存活率的影響

時(shí)間:2021-2-2閱讀:681
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光引發(fā)劑(photoinitiator)又稱光敏劑(photosensitizer)或光固化劑(photocuring agent),是一類能在紫外光區(qū)(250~420nm)或可見光區(qū)(400~800nm)吸收波長(zhǎng)的能量,產(chǎn)生自由基、陽離子等,從而引發(fā)單體聚合交聯(lián)固化的化合物。

光引發(fā)劑通常用于生物打印作為膠凝過程的一部分以固化生物墨水,這種交聯(lián)過程可能會(huì)影響細(xì)胞的生存率。用光引發(fā)劑Irgacure和苯基-2,4,6-*基苯甲?;⑺徜嚕ㄒ卜Q為L(zhǎng)AP )測(cè)試聚合過程中各步驟對(duì)細(xì)胞活力的影響。雖然暴露于自由基或Irgacure表明生存能力下降,但光照和暴露于LAP本身并不影響生存力。當(dāng)與GelMA一起使用時(shí),自由基聚合過程不會(huì)影響到細(xì)胞活率。

添加光引發(fā)劑

,在攪拌和加熱(65℃)下將0.5%(w / v)LAP溶液和0.5%(w / v)Irgacure溶液溶解在細(xì)胞培養(yǎng)基中。然后,將在具有LAP或Irgacure的96孔板中培養(yǎng)的細(xì)胞暴露于10nm / cm2強(qiáng)度的405nm光2分鐘,然后與未暴露于光的光引發(fā)劑培養(yǎng)的細(xì)胞對(duì)照相比較。每組拍攝的亮視野圖像表明改變了用Irgacure培養(yǎng)的細(xì)胞或那些用LAP或Irgacure暴露于光下的細(xì)胞的細(xì)胞形態(tài)(圖2)。沒有引發(fā)劑的細(xì)胞和沒有光暴露的具有LAP的細(xì)胞表現(xiàn)出與2D對(duì)照相似的細(xì)胞形態(tài)。ATP數(shù)據(jù)顯示暴露于不含光的LAP的細(xì)胞與沒有光敏引發(fā)劑的細(xì)胞相比沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。

在暴露于沒有引發(fā)劑,LAP或Irgacure的0,30和120秒藍(lán)光后24小時(shí)的細(xì)胞的明場(chǎng)圖像(10x)。的成纖維細(xì)胞形態(tài)在沒有引發(fā)劑的組中以及暴露于 Biokey(LAP)和0秒藍(lán)光的細(xì)胞中是的。其他組的異常形態(tài)。

過72小時(shí)的ATP結(jié)果顯示沒有引發(fā)劑的組以及暴露于BioKey(LAP)和0秒藍(lán)光的組之間沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。暴露于Irgacure或光引發(fā)劑和藍(lán)光的組具有統(tǒng)計(jì)上較低的ATP活性。具有不同(*)的組表示統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p <0.05)。

在用BioKey(LAP)和Irgacure光引發(fā)劑交聯(lián)的BioGel(GelMA)上接種細(xì)胞。具有不同(*)的組表示統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p <0.05)。用0.5%(w / v)LAP或Irgacure分別產(chǎn)生10%(w / v)GelMA的薄膜。通過暴露于405nm或365nm波長(zhǎng)聚合后,將細(xì)胞接種到每個(gè)薄膜上。在1天和3天,在這些組中都沒有發(fā)現(xiàn)ATP活性的統(tǒng)計(jì)學(xué)差異和培養(yǎng)聚苯乙烯(TCPS)的2D對(duì)照。在7天,兩種細(xì)胞接種到GelMA和LAP上,接種到GelMA和Irgacure上的細(xì)胞表現(xiàn)出更高的ATP活動(dòng)比2D控制。

當(dāng)暴露于活化的光引發(fā)劑時(shí),Irgacure和LAP的細(xì)胞活力均下降。沒有單體發(fā)生反應(yīng),光引發(fā)劑的活化會(huì)釋放不會(huì)終止的自由基,使細(xì)胞長(zhǎng)時(shí)間暴露于這些顆粒。正如預(yù)期的那樣,這種暴露導(dǎo)致細(xì)胞活力下降,這通過明場(chǎng)成像和ATP活性是的。然而,當(dāng)與光可交聯(lián)材料如LAP組合使用時(shí),細(xì)胞活力不受影響,如通過ATP活性所證明的。

暴露于未活化的Irgacure也會(huì)影響生存力,因?yàn)楸┞队跊]有光的引發(fā)劑的細(xì)胞表現(xiàn)出比2D對(duì)照更低的ATP活性。暴露于未的LAP不會(huì)影響活力,這表明當(dāng)光敏交聯(lián)載有細(xì)胞的材料時(shí),該光引發(fā)劑可能是Irgacure的替代品。

光聚合過程可以可行的3D蜂窩結(jié)構(gòu)。盡管Irgacure和LAP在與GelMA結(jié)合時(shí)產(chǎn)生能夠支持活細(xì)胞群的水凝膠,但是暴露于Irgacure即使沒有自由基也降低了細(xì)胞存活力,這表明LAP可能是用于制造光交聯(lián)的細(xì)胞負(fù)載水凝膠的的替代方案。

西安齊岳生物是集化學(xué)和定制與一體的化學(xué)公司,可以提供3D打印結(jié)合生物墨水材料,為打印出的細(xì)胞或提供更接近體內(nèi)的生長(zhǎng)環(huán)境,可應(yīng)用于再生和工程中心臟、皮膚、軟骨、骨骼等構(gòu)建;以及體外檢測(cè)模型構(gòu)建,來進(jìn)行科研代謝和篩選、化妝品檢測(cè)、生物材料和干細(xì)胞的體外分化等研究。

甲基丙烯?;髂z(GelMA)
甲基丙烯酰化透明質(zhì)酸(HAMA)
甲基丙烯?;浌撬?CSMA)
甲基丙烯?;T逅峒{(ALMA)
甲基丙烯?;燃谆鶜ぞ厶?CMCSMA)
甲基丙烯酰化絲素蛋白(FibMA)
甲基丙烯?;裥湍z原(Col1MA)
甲基丙烯酰化彈性蛋白(ElaMA)
甲基丙烯?;嗡?HepMA)
豬源Ⅰ型膠原(ColI)
豬源彈性蛋白(Elastin)
關(guān)節(jié)軟骨生物墨水
纖維軟骨生物墨水
彈力軟骨生物墨水
懸浮打印支撐材料
生物材料MA化定制服務(wù)
CELLINK A
CELLINK A-RGD
CELLINK Bioink
CELLINK BONE
CELLINK FIBRIN
CELLINK LAMININK+
CELLINK LAMININK 111
CELLINK LAMININK 121
CELLINK LAMININK 411
CELLINK LAMININK 521
CELLINK RGD
CELLINK SKIN
Coll 1
ColMA
Bio Conductink
GelMA
GelMA A

以上內(nèi)容來自小編zzj 2021.2.2

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