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外泌體制備指南:
一、貼壁/懸浮細胞(收集細胞上清,除去細胞或細胞碎片)
(1)貼壁細胞培養(yǎng)誘導結束后,培養(yǎng)液;
(2)加入適量的PBS緩沖液沖洗-次,*FBS;
(3)按每10cm皿(約107細胞) 10m|培養(yǎng)基,換外泌體無血清培養(yǎng)基培養(yǎng)至少48hr (細胞融合率
至少70%以上) ;
(4)48hr后,收集細胞上清,并于3000x g離心15min,細胞或細胞碎片;
(5)放入-80°C冰箱中保存。
二、提前做好血清或者血漿的分離
(1)全血:通過采采集后,經(jīng)過抗凝處理的血液。
(2)血漿:經(jīng)過抗凝處理的全血,進行低速離心后的上清液,為淡液體。
(3)血清:不經(jīng)過抗凝處理的血液,讓它自行凝固,在進行低速離心后的上清液,為淡液體。
不同樣本提取的外泌體比照圖:
血漿樣本圖 血漿提取后的外泌體
全血樣本-已溶血狀態(tài) 溶血后提取的外泌體
具體全血樣本操作如下:
步驟一 | 采集外周血2mL (采血時間一般為早晨或上午),迅速轉入EDTA抗凝管中,渦旋或用移液器Tip混勻; |
步驟二 | 在1小時(室溫條件下)或2小時(4C條件下)內進行下面的操作: 4°C, 1900g (1568rpm) 離心10分鐘;
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步驟三 | 吸取約1 mL上清轉至潔凈的1.5 mL離心管中,16,000g (13,200rpm), 4'C, 離心10分鐘,小心吸取.上清到新的離心管中; |
步驟四 | 放入-80°C冰箱中保存;
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步驟五 | 填寫樣本登記單,記錄樣本名稱、類型、編號、取樣日期、樣本處理過程等情況。
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產品供應:
胞外囊泡/細胞微粒/微囊泡/外泌體/EVs/exosomes |
含RNA和的小膜泡 (30-150nm) |
綿羊網(wǎng)織紅細胞-外泌體 |
直徑40-100nm的盤狀囊泡 |
exosome/外泌體 |
細胞內溶酶體微粒內陷形成的多囊泡體 |
多囊泡體外膜與細胞膜融合后釋放到胞外基質中 |
細胞在正常及病理狀態(tài)下均可分泌外泌體 |
細胞類型均可分泌外泌體 |
性分泌的膜泡 |
外泌體含和鞘磷脂 |
肥大細胞分泌外泌體 |
mRNA,exosomes具有生物活性 |
41860種、2838種microRNA、3408種mRNA |
Rabs蛋白/鳥苷酸三磷酸酶(GTPases) |
調節(jié)外泌體膜與受體細胞的融合 |
外泌體中含RAB4, RAB5和 RAB11,RAB7 和 RAB9 |
膜聯(lián)蛋白1、2、4、5、6、7、11 |
四跨膜蛋白家族(CD63, CD81 和CD9) |
熱休克蛋白家族((HSP60, HSP70, HSPA5, CCT2 和HSP90 |
細胞性的蛋白包括A33(結腸上皮細胞來源) |
MHC-Ⅱ(抗原提呈細胞來源) |
CD86(抗原提呈細胞來源) |
乳凝集素(不成熟的樹突狀細胞) |
外泌體中的蛋白含代謝類的酶 |
GAPDH |
烯醇化酶 1 |
醛縮酶 1 |
PKM2 |
PGK1 |
PDIA3 |
GSTP1 |
DPP4 |
AHCY |
TPL1 |
蛋白 |
P4HB |
LDH |
親環(huán)素 A |
FASN, |
MDH1 |
CNP |
核糖體蛋白(RPS3) |
信號轉導因子 |
黑色素分化相關因子 |
ARF1 |
CDC42 |
人類紅細胞膜整合蛋白 |
SLC9A3R1 |
粘附因子 |
MFGE8 |
整合素 |
細胞骨架蛋白 |
泛素 |
人體內多種細胞及體液均可分泌外泌體 |
應用:機體應答 |
抗原提呈 |
細胞遷移 |
侵襲 |
細胞膜外泌體 |
外泌體產生于細胞中的多泡體 |
外泌體研究整體方案設計; |
外泌體提取/粒徑測量/電鏡檢測; |
外泌體蛋白組/轉錄組 |
客戶提供樣本提取外泌體 |
外泌體抽離/抽提 |
全自動外泌體熒光檢測分析系統(tǒng) |
外泌體分離產品和工具 |
外泌體分離/提取 |
外泌體整體服務 |
外泌體lncRNA芯片 |
外泌體small RNA |
外泌體提取 |
外泌體染色:PKH67/PKH26 |
外泌體WB鑒定 |
CD81外泌體慢包裝 |
CD63外泌體慢包裝 |
CD9外泌體慢包裝 |
外泌體粒徑檢測 |
外泌體電鏡檢測/透射電鏡 |
外泌體蛋白組分析 |
外泌體標記/鑒定/分離/提取/ |
外泌體(Exosomes)鑒定 |
外泌體marker抗體 |
外泌體CD9抗體 |
外泌體CD81抗體 |
外泌體CD63抗體 |
外泌體分離單克隆抗體 |
Anti CD9,CD63,CD81 |
細胞外囊泡標記外泌體單克隆抗體 |
細胞外囊泡(外泌體和微囊泡) |
標記外泌體試劑 |
外泌體流式細胞分子 |
外泌體細胞成像 |
外泌體細胞結構成像 |
外泌體標記化學 |
外泌體熒光選擇標記 |
外泌體分析 |
外泌體科學 |
外泌體細胞示蹤 |
外泌體細胞追蹤 |
外泌體細胞形態(tài)學 |
外泌體單細胞分析 |
外泌體微生物分析 |
外泌體熒光微孔 |
外泌體RNA-微生物 |
FITC外泌體捕獲親和磁珠 |
CD63抗體捕獲外泌體 |
靶向外泌體 |
靶向衍生外泌體 |
外泌體仿生靶向科研 |
外泌體仿生納米科研/顆粒 |
外泌體可誘導 T 細胞的凋亡 |
調控功能性 T 細胞 (Treg) |
誘導 M2 巨噬細胞的極化 |
自然殺傷細胞 (NK) 的抗性 |
樹突狀細胞的 (DC) 分化為成熟 DC |
外泌體基因改造 |
上述產品用于科研,產品和相關檢測服務均可提供!
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