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羅布羅布芽生菌PCR檢測(cè)試劑盒操作方法:
1、從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2、設(shè)置規(guī)范品孔和樣本孔,規(guī)范品孔各加不同濃度的規(guī)范品50μL;
3、樣本孔先加待測(cè)樣本10μL,再加樣本稀釋液40μL;空白孔不加。
4、除空白孔外,規(guī)范品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)符號(hào)的檢測(cè)抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5、棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板)。
6、每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7、每孔加入停止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。
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