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羊源性成分（Ovine）核酸檢測試劑盒說明書

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上海博湖生物科技有限公司

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產(chǎn)品簡介

羊源性成分（Ovine）核酸檢測試劑盒說明書中含有聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)所需要各種試劑組分，如：引物、dNTPs、緩沖液、Taq酶等，PCR反應(yīng)液混合液中加入檢測樣品，即可進(jìn)行PCR擴(kuò)增反應(yīng)。PCR擴(kuò)增產(chǎn)物經(jīng)瓊脂糖電泳染色判斷，陽性樣本將在相應(yīng)大小的片段處出現(xiàn)特異性條帶。

詳細(xì)介紹

產(chǎn)品名稱：羊源性成分(Ovine)核酸檢測試劑盒說明書
規(guī)格：48T/盒
編號：BH-P4836
分類：熒光-PCR法
儲存條件：-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸：低溫、避光，快遞免費(fèi)送貨上門。
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規(guī)格及成分：
產(chǎn)品名稱成分編號十孔盒包裝
MMLV 逆轉(zhuǎn)錄酶-RI 混合液 101105A 20 μL
MMLV Buffer-dNTP 混合液 101105B 60 μL
微量核酸沉淀劑 50903 400 μL
TdT（末端轉(zhuǎn)移酶） 120312 10 μL
2×TdT Buffer（含 dATP） 101105 200 μL
PCR MagicMix 3.0（含染料） 90805B 1mL×2
5′-RACE 引物 A-引物 B 混合液 yw373374 200 μL
5′-RACE 引物 C yw375 200 μL
RNase-Free 水 80403 1 mL
使用手冊 101105sc 1 份
使用方法:
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意：DNA 純化方法是決定檢測靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA，后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。
二、制備 Cps 標(biāo)準(zhǔn)曲線（以 10-10E6 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原，本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對照，只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽性對照。
1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管，分別為 6，5，4，3，2 和 1 號。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水（用帶芯槍頭，下同）。
3. 先將本試劑盒提供的陽性對照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL（注：請不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL，建議每次稀釋 10 倍，梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL）。
4. 在 6 號管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 10E6 拷貝/μL 的陽性對照。
5. 換槍頭，從 6 號管中取 5 μL 溶液到 5 號管中，充分震蕩 1 分鐘，得 10E5拷貝/μL 的陽性對照。
6. 換槍頭，從 5 號管中取 5 μL 溶液到 4 號管中，重復(fù)上面的操作直到得到 6個(gè)稀釋度的陽性對照。
7. NC 管中不加任何陽性對照。
8. 從 1-6 號管中分別取 5 μL 和待測樣品一起進(jìn)行定量 PCR（見下步），每個(gè)樣品做 3 次重復(fù)。PCR 后得到每個(gè)陽性對照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值，并以之為縱軸，以濃度的對數(shù)值為橫軸，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
數(shù)據(jù)采集：
鸚鵡熱衣原體PCR試劑盒品牌具體操作按所用儀器*的流程進(jìn)行。本產(chǎn)品中所含的熒光染料在不結(jié)合DNA 時(shí)，大吸收光譜在 471nm，結(jié)合 DNA 時(shí)的大吸收光譜在 500nm，大發(fā)射光譜在 530nm。
數(shù)據(jù)處理:
鸚鵡熱衣原體PCR試劑盒品牌以 Cps 陽性對照濃度的 log 值為橫軸，以 Ct 值為縱軸，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。再以待測樣品濃度的 log 為橫軸，以 Ct 值為縱軸，通過待測樣品的 Ct 值計(jì)算出樣品 DNA 的濃度。
人臍動脈內(nèi)皮細(xì)胞RNAHUAEC miRNA5 μg硫酸*質(zhì)量規(guī)格：含量≥670µg/mgIsepamicine Sulphate

G401細(xì)胞，人腎癌Wilms細(xì)胞大鼠垂體細(xì)胞,RPC細(xì)胞 CL-0462UMR-106(大鼠骨肉瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2蓓薩羅丁;貝沙羅汀質(zhì)量規(guī)格：>99%Bexarotene

HCC94(人子宮鱗癌細(xì)胞(高分化)) 5×106cells/瓶×2氯前列醇鈉(D型）質(zhì)量規(guī)格：>98.5%D-Cloprostenol sodium

hCD133+-CB-c single donor 從臍帶血提取的人類CD133+祖細(xì)胞(hCD133+-CB)，單一捐獻(xiàn)者 100000 大鼠垂體細(xì)胞RPC氯前列醇鈉(DL型）質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,USP34DL-Cloprostenol sodium

CSC, 小鼠心肌細(xì)胞*(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品Ligustrazine HCl
人角膜上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL二甲基亞砜(AR,>99%(GC)) Dimethyl sulfoxide質(zhì)量規(guī)格：AR,>99%(GC)

HPT-8細(xì)胞，小鼠飼養(yǎng)層上皮細(xì)胞 293(轉(zhuǎn)染腺病毒E1A基因的人腎上皮細(xì)胞) 長白山豬胚胎皮膚成纖維樣細(xì)胞;201184二甲基亞砜(>99.8%(GC)) Dimethyl sulfoxide質(zhì)量規(guī)格：>99.8%(GC)

EFNB2 Protein Human 重組人 Ephrin-B2 / EFNB2 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽)二甲基亞砜(分子生物學(xué),≥99.9%) Dimethyl sulfoxide質(zhì)量規(guī)格：分子生物學(xué),≥99.9%

EA.hy926(人臍靜脈細(xì)胞融合細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 大隱靜脈平滑肌細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)二甲基亞砜(多肽合成) Dimethyl sulfoxide質(zhì)量規(guī)格：多肽合成

人腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞HBMEC二甲基亞砜(藥用級) Dimethyl sulfoxide質(zhì)量規(guī)格：藥用級
羊源性成分(Ovine)核酸檢測試劑盒說明書QGY-7701(人肝癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 大鼠 EphA3 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 醋酸組氨瑞林 Histrelin Acetate質(zhì)量規(guī)格：BR,度>98%

人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞;COLO 205*V鉀Penicillin V potassium salt質(zhì)量規(guī)格：1440~1680 U/mg,BR

CD47 Others Human 人 CD47 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 2'-脫氧*2'-deoxyinosine質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

mEPC, 小鼠內(nèi)皮祖細(xì)胞-骨髓*Nifekalant hydrochloride質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

3T3TK細(xì)胞，小鼠成纖維細(xì)胞 TNFa轉(zhuǎn)染耐VP16絨癌細(xì)胞,JEG-3-VP16-TNFa細(xì)胞人滑膜細(xì)胞RNAHS miRNA5 μg*(標(biāo)準(zhǔn)品)Nifekalant hydrochloride質(zhì)量規(guī)格：HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品
注意事項(xiàng)：
①加入試劑的順序應(yīng)*，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測試劑盒說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長時(shí)間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時(shí)，避免使用帶金屬部分的加樣器。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄，不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。