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技術文章

倒平板.細菌培養(yǎng).分子生物學實驗的技巧和注意事項

閱讀:40          發(fā)布時間:2025-1-10
在生物實驗中相信大家都經常要倒平板,細菌培養(yǎng),分子生物學實驗等等。醫(yī)藥企業(yè)中倒平板更是家常便飯,環(huán)境監(jiān)測、水監(jiān)測、微生物檢查等,初學者往往都倒不好,現(xiàn)在總結幾點小技巧供大家參考:
  一、防止倒皿時的冷凝:
  1、有經驗的都知道,手心不燙手背燙,這是一個經驗數(shù)據,此時的溫度在45度左右,倒平板。
  2、如果要連續(xù)倒多個皿,尤其是在冬天往往容易凝固,一旦凝固則需要再加熱到較高溫度才能溶化(玻璃體的特性)。所以建議此時有個50度的恒溫水浴開著,隨時把裝培養(yǎng)基的三角瓶放進去效果會好不少。
  二、培養(yǎng)皿中有冷凝水:
  一般來說,都會有幾滴,影響不大。如果過多則需要注意。大概的情況是:
  1、倒皿前將平皿最好保持在35-40度的溫度(觸手有溫熱感),
  2、保持平皿靜置環(huán)境溫度高一些。
  三、倒已冷卻的瓊脂培養(yǎng)基:
  對已冷卻的培養(yǎng)基再融化頗感頭痛心煩,因為放在電爐上烤不僅需要耐心,還得加上小心,一不留神就會沖濕瓶塞;重新放入滅菌鍋加熱吧,好是好,可又嫌費事。解決方法是用微波爐加熱,又快又好,融得,用著放心。當然,裝培養(yǎng)基所用的三角瓶得能夠放入微波爐才行:250ml.
  沒有微波爐怎么辦?用電爐要加小心了,在電爐上直接加熱融化營養(yǎng)瓊脂時應注意在融化到上面剩最后薄薄的一層時應用小火,緩慢加熱,防止氣體沖破薄層時導致爆沸,營養(yǎng)瓊脂沖出三角瓶。
  四、倒平皿保持均一性:日水一次性平板圖
  傾注平皿要左三圈,右三圈的晃動,注意不要把平皿蓋沾上,并且要輕輕晃動。
  五、具體對待:
  前面幾點講了倒平皿的最適溫度保持在35-40度,但不同品牌的瓊脂質量不一樣,同樣按照國標中的配方瓊脂含量1.5%, 有些瓊脂凝固很快,有些凝固慢一些,還有環(huán)境溫度偏低,瓊脂凝固也會快一些,要根據實際情況,適當調整瓊脂的含量,在室溫較低時我們所配的培養(yǎng)基瓊脂 用量就偏少一些,還有在倒平板和混勻時動作要快一些,室溫實在太低,也可以把培養(yǎng)皿放到烘箱中適當加熱一下(40度左右)。
  六、避免氣泡:
  還有同學反映在倒平板時會產生氣泡,主要遵守以上各點,加熱不要過高,融化即可,加強操作練習,還有就是倒的時候要慢點,最好能夠貼著平皿的壁倒下去。

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