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技術(shù)文章

人青少年2型血色素沉著癥/幼年型血色病相關(guān)蛋白2ELISA試劑盒

閱讀:72          發(fā)布時間:2020-3-16

人青少年2型血色素沉著癥/幼年型血色病相關(guān)蛋白2(HFE2)ELISA試劑盒
英文簡稱People Teens with type 2 hemochromatosis / juvenile hemochromatosis-associated protein 2 (HFE2) ELISA kit

產(chǎn)品貨號:KS15069

品牌名稱:科順生物 
產(chǎn)品規(guī)格:96T/48T
運(yùn)輸方式:快遞(根據(jù)客戶要求,選擇具體的運(yùn)輸方式)
產(chǎn)品價格:*,歡迎在線留言洽談!
使用范圍:僅供科研檢測,不得用于臨床.

人青少年2型血色素沉著癥/幼年型血色病相關(guān)蛋白2(HFE2)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理:

本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中小鼠胰島素(INS)水平。用純的小鼠胰島素(INS)捕獲抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被的微孔中依次加入小鼠胰島素(INS),再與HRP標(biāo)記的檢測抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催下轉(zhuǎn)成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的小鼠胰島素(INS)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中小鼠胰島素(INS)含量。

人青少年2型血色素沉著癥/幼年型血色病相關(guān)蛋白2(HFE2)ELISA試劑盒組成

試劑盒組成

48孔配置

96孔配置

保存

說明書

1份

1份

 

封板膜

2片

2片

 

密封袋

1個

1個

 

酶標(biāo)包被板

1×48

1×96

2-8℃保存

標(biāo)準(zhǔn)品

0.3ml×6管

0.3ml×6管

2-8℃保存

酶標(biāo)試劑

5 ml×1瓶

10 ml×1瓶

2-8℃保存

樣品稀釋液

3 ml×1瓶

6 ml×1瓶

2-8℃保存

顯色劑A液

3 ml×1瓶

6 ml×1瓶

2-8℃保存

顯色劑B液

3 ml×1瓶

6 ml×1瓶

2-8℃保存

終止液

3 ml×1瓶

6 ml×1瓶

2-8℃保存

20×濃縮洗滌液

15ml×1瓶

25ml×1瓶

2-8℃保存

注:標(biāo)準(zhǔn)品濃度依次為:40、20、10、5、2.5、0 mIU/L.

人青少年2型血色素沉著癥/幼年型血色病相關(guān)蛋白2(HFE2)ELISA試劑盒樣本處理及要求

1. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。

2. 血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心。

3. 尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。

4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。

5. 組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。

6. 標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融.

7. 不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧物酶的(HRP)活性。

 

人青少年2型血色素沉著癥/幼年型血色病相關(guān)蛋白2(HFE2)ELISA試劑盒操作步驟

  • 標(biāo)準(zhǔn)品的加樣:設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;。
  • 加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
  • 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑100μl,空白孔除外。
  • 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育60分鐘。
  • 配液:將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用。
  • 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
  • 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘. 
  • 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
  • 測定:以空白孔調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。

人青少年2型血色素沉著癥/幼年型血色病相關(guān)蛋白2(HFE2)ELISA試劑盒注意事項(xiàng)

  • 試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
  • 濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。
  • 各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時間zuei好控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。
  • 請每次測定的同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線,zuei好做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔第yi孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。
  • 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
  • 底物請避光保存。
  • 嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).
  • 所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
  • 本試劑不同批號組分不得混用。

10. 如與英文說明書有異,以英文說明書為準(zhǔn)。

計算:

以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),    

在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的OD      

值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋      

倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計算出標(biāo)      

準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值      

代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋      

倍數(shù),即為樣品的實(shí)際濃度。                  

人青少年2型血色素沉著癥/幼年型血色病相關(guān)蛋白2(HFE2)ELISA試劑盒相關(guān)優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品:

KS15035 人嘌呤核苷酸磷酸化酶(PNP)ELISA試劑盒

KS15036 人平滑肌肌動蛋白(SMA)ELISA試劑盒

KS15037 人蘋果酸脫氫酶1(MDH1)ELISA試劑盒

KS15038 人*龍(PS)ELISA試劑盒

KS15039 人*/*富含性剪接因子(SFPQ)ELISA試劑盒

KS15040 人*羥化酶(PHD)ELISA試劑盒

KS15041 人*肽酶(PEPD)ELISA試劑盒

KS15042 人葡萄糖6磷酸酶/葡萄糖6磷酸酯酶(G6Pase)ELISA試劑盒

KS15043 人葡萄糖6磷酸脫氫酶(G6PD)ELISA試劑盒

KS15044 人葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白3(GLUT3)ELISA試劑盒

KS15045 人葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白4(GLUT4)ELISA試劑盒

KS15046 人前病毒整合位點(diǎn)1(Pim1)ELISA試劑盒

KS15047 人前膠原C內(nèi)肽酶增強(qiáng)子1(PCOLCE1)ELISA試劑盒

KS15048 人前顆粒蛋白(PGRN)ELISA試劑盒

KS15049 人前列環(huán)素(PGI2)ELISA試劑盒

KS15050 人前列腺素A1(PGA1)ELISA試劑盒

KS15051 人前列腺素D2(PGD2)ELISA試劑盒

KS15052 人前列腺素D合成酶(PTGDS)ELISA試劑盒

KS15053 人前列腺素H2(PGH2)ELISA試劑盒

KS15054 人前鐵調(diào)素(ProHepc)ELISA試劑盒

KS15055 人潛伏轉(zhuǎn)化生長因子β結(jié)合蛋白2(LTBP2)ELISA試劑盒

KS15056 人羥基賴正己氨酸(HLNL)ELISA試劑盒

KS15057 人羥甲基戊二酸單酰*(HMGCoA)ELISA試劑盒

KS15058 人羥甲基戊二酸單酰*還原酶(HMGCoAR)ELISA試劑盒

KS15059 人羥賴氨酸糖苷(HOLG)ELISA試劑盒

KS15060 人橋粒糖蛋白2(DSC2)ELISA試劑盒

KS15061 人橋粒芯糖蛋白1(DGSE1)ELISA試劑盒

KS15062 人橋粒芯糖蛋白2(DSG2)ELISA試劑盒

KS15063 人橋粒芯糖蛋白3(Dsg3)ELISA試劑盒

KS15064 人鞘氨醇(SPH)ELISA試劑盒

KS15065 人鞘氨醇激酶1(SPK1)ELISA試劑盒

KS15066 人鞘脂激活蛋白原(PSAP)ELISA試劑盒

KS15067 人切除修復(fù)交叉互補(bǔ)基因1(ERCC1)ELISA試劑盒

KS15068 人親環(huán)蛋白A(PPIA/CYPA)ELISA試劑盒

KS15069 人青少年2型血色素沉著癥/幼年型血色病相關(guān)蛋白2(HFE2)ELISA試劑盒

KS15070 人清道夫受體類B成員1(SCARB1)ELISA試劑盒

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