智慧城市網(wǎng)技術(shù)文章
人*型纖溶酶原激活因子（uPA）ELISA試劑盒說明書
閱讀：60 發(fā)布時(shí)間：2020-3-12人*型纖溶酶原激活因子(uPA)ELISA試劑盒
英文簡稱：Human urokinase-type plasminogen activator (uPA) ELISA kit
產(chǎn)品貨號：KS1510
品牌名稱：科順生物
產(chǎn)品規(guī)格：96T/48T
運(yùn)輸方式：快遞(根據(jù)客戶要求，選擇具體的運(yùn)輸方式)
產(chǎn)品價(jià)格：*，歡迎在線留言洽談！
使用范圍：僅供科研檢測,不得用于臨床.
人*型纖溶酶原激活因子(uPA)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理：
本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中小鼠胰島素（INS）水平。用純化的小鼠胰島素（INS）捕獲抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被的微孔中依次加入小鼠胰島素（INS），再與HRP標(biāo)記的檢測抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的小鼠胰島素（INS）呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中小鼠胰島素（INS）含量。
人*型纖溶酶原激活因子(uPA)ELISA試劑盒組成：
試劑盒組成 | 48孔配置 | 96孔配置 | 保存 |
說明書 | 1份 | 1份 |
|
封板膜 | 2片 | 2片 |
|
密封袋 | 1個(gè) | 1個(gè) |
|
酶標(biāo)包被板 | 1×48 | 1×96 | 2-8℃保存 |
標(biāo)準(zhǔn)品 | 0.3ml×6管 | 0.3ml×6管 | 2-8℃保存 |
酶標(biāo)試劑 | 5 ml×1瓶 | 10 ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
樣品稀釋液 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
顯色劑A液 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
顯色劑B液 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
終止液 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
20×濃縮洗滌液 | 15ml×1瓶 | 25ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
注：標(biāo)準(zhǔn)品濃度依次為：40、20、10、5、2.5、0 mIU/L.
人*型纖溶酶原激活因子(uPA)ELISA試劑盒樣本處理及要求：
1. 血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過程中如出現(xiàn)沉淀，應(yīng)再次離心。
2. 血漿：應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)該再次離心。
3. 尿液：用無菌管收集，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。
4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清：檢測分泌性的成份時(shí)，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
5. 組織標(biāo)本：切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。
6. 標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融.
7. 不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。
人*型纖溶酶原激活因子(uPA)ELISA試劑盒操作步驟
- 標(biāo)準(zhǔn)品的加樣：設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔，標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL；。
- 加樣：分別設(shè)空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。
- 加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑100μl，空白孔除外。
- 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育60分鐘。
- 配液：將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用。
- 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。
- 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.
- 終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。
- 測定：以空白孔調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
人*型纖溶酶原激活因子(uPA)ELISA試劑盒注意事項(xiàng)：
- 試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
- 濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶，洗滌時(shí)不影響結(jié)果。
- 各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性，以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間zuei好控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。
- 請每次測定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線，zuei好做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高（樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔第yi孔的OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測定，計(jì)算時(shí)請后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。
- 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
- 底物請避光保存。
- 嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行，試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).
- 所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
- 本試劑不同批號組分不得混用。
10. 如與英文說明書有異，以英文說明書為準(zhǔn)。
計(jì)算：
以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo)，OD值為縱坐標(biāo)，
在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線，根據(jù)樣品的OD
值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度；再乘以稀釋
倍數(shù)；或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)
準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值
代入方程式，計(jì)算出樣品濃度，再乘以稀釋
倍數(shù)，即為樣品的實(shí)際濃度。
人*型纖溶酶原激活因子(uPA)ELISA試劑盒相關(guān)優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品:
KS12920 大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶8/中性粒細(xì)胞膠原酶(MMP-8)ELISA試劑盒
KS12921 兔8-異構(gòu)前列腺素(8-epi-PGF2α)ELISA試劑盒
KS11692 豬超氧化物歧化酶(SOD)ELISA試劑盒
KS12923 *GFc段受體Ⅱ(FcγRⅡ/CD32)ELISA試劑盒
KS12924 雞巨噬細(xì)胞替代激活相關(guān)化學(xué)因子1(AmAC-1)ELISA試劑盒
KS12925 *樣轉(zhuǎn)錄體受體(ILTsR/LIR/CD85)ELISA試劑盒
KS12926 人*6(VB6)ELISA試劑盒
KS12927 人抗BP180抗體(BP180-Ab)ELISA試劑盒
KS12928 大鼠胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白4(IGFBP-4)ELISA試劑盒
KS12929 人胃動(dòng)素(MTL)ELISA試劑盒
KS12930 大鼠Ⅲ型膠原(ColⅢ)ELISA試劑盒
KS12931 大鼠白血病抑制因子(LIF)ELISA試劑盒
KS18052 豬超氧化物歧化酶1(SOD1)ELISA試劑盒
KS12933 小鼠乙型肝炎e抗原(HBeAg)ELISA試劑盒
KS12934 人八聚體轉(zhuǎn)錄因子(OTF2A)ELISA試劑盒
KS12935 人纖溶酶原(Plg)ELISA試劑盒
KS17880 豬成纖維細(xì)胞生長因子19(FGF19)ELISA試劑盒
KS12937 小鼠免疫球蛋白M(IgM)ELISA試劑盒
KS12938 小鼠細(xì)胞周期素D1(Cyclin-D1)ELISA試劑盒
KS12939 人脂磷壁酸(LTA)ELISA試劑盒
KS12940 人乳tou狀瘤病毒抗體IgM(HPV-IgM)ELISA試劑盒
KS12941 人纖溶酶原激活物抑制因子1(PAI-1)ELISA試劑盒
KS12942 大鼠血管活性腸肽(VIP)ELISA試劑盒
KS12943 人可溶性白細(xì)胞分化抗原30配體(sCD30L)ELISA試劑盒
KS12944 小鼠Ⅲ型前膠原肽(PⅢNP)ELISA試劑盒
KS12945 小鼠載脂蛋白E(Apo-E)ELISA試劑盒
KS12946 小鼠熱休克因子1(HSF1)ELISA試劑盒
KS12947 小鼠中性粒細(xì)胞趨化蛋白2(NAP-2/CXCL7)ELISA試劑盒
KS12948 小鼠免疫球蛋白G(IgG)ELISA試劑盒
KS12949 大鼠*(trypsin)ELISA試劑盒
KS12950 人脂蛋白α(Lp-α)ELISA試劑盒
KS12951 人巨噬細(xì)胞炎性蛋白5(MIP-5)ELISA試劑盒
KS12952 人抗滋養(yǎng)膜細(xì)胞抗體(ATA)ELISA試劑盒
KS12953 人透明質(zhì)酸酶(HAase)ELISA試劑盒
KS12954 小鼠白介素-5(IL-5)ELISA試劑盒
KS12955 人抗鼠抗體(HAMA)ELISA試劑盒