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人混合淋巴細(xì)胞反應(yīng)封閉因子(MLRBf)ELISA試劑盒
英文簡稱：Mixed lymphocyte reaction blocking factor (MLRBf) ELISA kit

產(chǎn)品貨號：KS14771

品牌名稱：科順生物 
產(chǎn)品規(guī)格：96T/48T
運輸方式：快遞(根據(jù)客戶要求，選擇具體的運輸方式)
產(chǎn)品價格：*，歡迎在線留言洽談！
使用范圍：僅供科研檢測,不得用于臨床.

人混合淋巴細(xì)胞反應(yīng)封閉因子(MLRBf)ELISA試劑盒實驗原理：

本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中小鼠胰島素（INS）水平。用純化的小鼠胰島素（INS）捕獲抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被的微孔中依次加入小鼠胰島素（INS），再與HRP標(biāo)記的檢測抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的小鼠胰島素（INS）呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中小鼠胰島素（INS）含量。

人混合淋巴細(xì)胞反應(yīng)封閉因子(MLRBf)ELISA試劑盒組成：

試劑盒組成	48孔配置	96孔配置	保存
說明書	1份	1份
封板膜	2片	2片
密封袋	1個	1個
酶標(biāo)包被板	1×48	1×96	2-8℃保存
標(biāo)準(zhǔn)品	0.3ml×6管	0.3ml×6管	2-8℃保存
酶標(biāo)試劑	5 ml×1瓶	10 ml×1瓶	2-8℃保存
樣品稀釋液	3 ml×1瓶	6 ml×1瓶	2-8℃保存
顯色劑A液	3 ml×1瓶	6 ml×1瓶	2-8℃保存
顯色劑B液	3 ml×1瓶	6 ml×1瓶	2-8℃保存
終止液	3 ml×1瓶	6 ml×1瓶	2-8℃保存
20×濃縮洗滌液	15ml×1瓶	25ml×1瓶	2-8℃保存

注：標(biāo)準(zhǔn)品濃度依次為：40、20、10、5、2.5、0 mIU/L.

人混合淋巴細(xì)胞反應(yīng)封閉因子(MLRBf)ELISA試劑盒樣本處理及要求：

1. 血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過程中如出現(xiàn)沉淀，應(yīng)再次離心。

2. 血漿：應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)該再次離心。

3. 尿液：用無菌管收集，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。

4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清：檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。

5. 組織標(biāo)本：切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。

6. 標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實驗。若不能馬上進(jìn)行試驗，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融.

7. 不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。

 

人混合淋巴細(xì)胞反應(yīng)封閉因子(MLRBf)ELISA試劑盒操作步驟

• 標(biāo)準(zhǔn)品的加樣：設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔，標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL；。
• 加樣：分別設(shè)空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。
• 加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑100μl，空白孔除外。
• 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育60分鐘。
• 配液：將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用。
• 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。
• 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘. 
• 終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。
• 測定：以空白孔調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。

人混合淋巴細(xì)胞反應(yīng)封閉因子(MLRBf)ELISA試劑盒注意事項：

• 試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
• 濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結(jié)果。
• 各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間zuei好控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。
• 請每次測定的同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線，zuei好做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高（樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔第yi孔的OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測定，計算時請后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。
• 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
• 底物請避光保存。
• 嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行，試驗結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).
• 所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
• 本試劑不同批號組分不得混用。

10. 如與英文說明書有異，以英文說明書為準(zhǔn)。

計算：

以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo)，OD值為縱坐標(biāo)，    

在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線，根據(jù)樣品的OD      

值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度；再乘以稀釋      

倍數(shù)；或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計算出標(biāo)      

準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值      

代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋      

倍數(shù)，即為樣品的實際濃度。                  

人混合淋巴細(xì)胞反應(yīng)封閉因子(MLRBf)ELISA試劑盒相關(guān)優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品:

KS15818 猴zi血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子受體3(VEGFR3/Flt4)ELISA試劑盒

KS15819 猴zi血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子(VEGF)ELISA試劑盒

KS15820 猴zi性激素結(jié)合球蛋白(SHBG)ELISA試劑盒

KS15821 猴zi脫氫表雄酮(DHEA)ELISA試劑盒

KS15822 猴zi天*氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)ELISA試劑盒

KS15823 猴zi瘦素(LEP)ELISA試劑盒

KS15824 猴zi神經(jīng)型一氧化氮合成酶(nNOS)ELISA試劑盒

KS15825 猴zi*抗*復(fù)合物(TAT)ELISA試劑盒

KS15826 猴zi內(nèi)皮型一氧化氮合成酶(eNOS)ELISA試劑盒

KS15827 猴zi免疫球蛋白G(IgG)ELISA試劑盒

KS15828 猴zi類風(fēng)濕因子(RF)ELISA試劑盒

KS15829 猴zi巨噬細(xì)胞炎性蛋白3α(MIP3α/CCL20)ELISA試劑盒

KS15830 猴zi甲狀旁腺激素(PTH)ELISA試劑盒

KS15831 猴zi過氧化氫酶(CAT)ELISA試劑盒

KS15832 猴zi*還原酶(GR)ELISA試劑盒

KS15833 猴zi*S轉(zhuǎn)移酶(GSTs)ELISA試劑盒

KS15834 猴zi睪酮(T)ELISA試劑盒

KS15835 猴zi分泌型免疫球蛋白A(sIgA)ELISA試劑盒

KS15836 猴zi雌激素(E)ELISA試劑盒

KS15837 猴zi雌二醇(E2)ELISA試劑盒

KS15838 猴zi補(bǔ)體蛋白4(C4)ELISA試劑盒

KS15839 猴zi補(bǔ)體蛋白3(C3)ELISA試劑盒

KS15840 猴zi白介素15(IL15)ELISA試劑盒

KS15841 猴ziβ淀粉樣蛋白140(Aβ140)ELISA試劑盒

KS15842 猴ziN端前腦鈉素(NTproBNP)ELISA試劑盒

KS15843 猴脂聯(lián)素(ADP)ELISA試劑盒

KS15844 猴胰島素樣生長因子1(IGF1)ELISA試劑盒

KS15845 猴血纖蛋白原降解產(chǎn)物(FDP)ELISA試劑盒

KS15846 猴透明質(zhì)酸(HA)ELISA試劑盒

KS15847 猴三dian甲狀腺原氨酸(T3)ELISA試劑盒

KS15848 猴絨毛膜*(CG)ELISA試劑盒

KS15849 猴前蛋白轉(zhuǎn)化酶枯草溶菌素9(PCSK9)ELISA試劑盒

KS15850 猴*(COR)ELISA試劑盒

KS15851 猴尿微量白蛋白(ALB)ELISA試劑盒

KS15852 猴*酶1(ARG1)ELISA試劑盒

KS15853 猴甲狀腺素(T4)ELISA試劑盒