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人補(bǔ)體因子I（CFI）ELISA試劑盒說明書
閱讀：55 發(fā)布時(shí)間：2020-2-19人補(bǔ)體因子I(CFI)ELISA試劑盒
英文簡(jiǎn)稱：Human complement factor I (CFI) ELISA kit
產(chǎn)品貨號(hào)：KS14533
品牌名稱：科順生物
產(chǎn)品規(guī)格：96T/48T
運(yùn)輸方式：快遞(根據(jù)客戶要求，選擇具體的運(yùn)輸方式)
產(chǎn)品價(jià)格：*，歡迎在線留言洽談！
使用范圍：僅供科研檢測(cè),不得用于臨床.
人補(bǔ)體因子I(CFI)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理：
本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中小鼠胰島素（INS）水平。用純化的小鼠胰島素（INS）捕獲抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被的微孔中依次加入小鼠胰島素（INS），再與HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的小鼠胰島素（INS）呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD值），通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中小鼠胰島素（INS）含量。
人補(bǔ)體因子I(CFI)ELISA試劑盒組成：
試劑盒組成 | 48孔配置 | 96孔配置 | 保存 |
說明書 | 1份 | 1份 |
|
封板膜 | 2片 | 2片 |
|
密封袋 | 1個(gè) | 1個(gè) |
|
酶標(biāo)包被板 | 1×48 | 1×96 | 2-8℃保存 |
標(biāo)準(zhǔn)品 | 0.3ml×6管 | 0.3ml×6管 | 2-8℃保存 |
酶標(biāo)試劑 | 5 ml×1瓶 | 10 ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
樣品稀釋液 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
顯色劑A液 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
顯色劑B液 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
終止液 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
20×濃縮洗滌液 | 15ml×1瓶 | 25ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
注：標(biāo)準(zhǔn)品濃度依次為：40、20、10、5、2.5、0 mIU/L.
人補(bǔ)體因子I(CFI)ELISA試劑盒樣本處理及要求：
1. 血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過程中如出現(xiàn)沉淀，應(yīng)再次離心。
2. 血漿：應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)該再次離心。
3. 尿液：用無菌管收集，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。
4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清：檢測(cè)分泌性的成份時(shí)，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
5. 組織標(biāo)本：切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè)，其余冷凍備用。
6. 標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融.
7. 不能檢測(cè)含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。
人補(bǔ)體因子I(CFI)ELISA試劑盒操作步驟
- 標(biāo)準(zhǔn)品的加樣：設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔，標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL；。
- 加樣：分別設(shè)空白孔（空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測(cè)樣品10μl（樣品終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。
- 加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑100μl，空白孔除外。
- 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育60分鐘。
- 配液：將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用。
- 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。
- 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.
- 終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。
- 測(cè)定：以空白孔調(diào)零，450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度（OD值）。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
人補(bǔ)體因子I(CFI)ELISA試劑盒注意事項(xiàng)：
- 試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
- 濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶，洗滌時(shí)不影響結(jié)果。
- 各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性，以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間zuei好控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。
- 請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線，zuei好做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過高（樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔第yi孔的OD值），請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測(cè)定，計(jì)算時(shí)請(qǐng)后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。
- 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
- 底物請(qǐng)避光保存。
- 嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行，試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).
- 所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
- 本試劑不同批號(hào)組分不得混用。
10. 如與英文說明書有異，以英文說明書為準(zhǔn)。
計(jì)算：
以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo)，OD值為縱坐標(biāo)，
在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線，根據(jù)樣品的OD
值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度；再乘以稀釋
倍數(shù)；或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)
準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值
代入方程式，計(jì)算出樣品濃度，再乘以稀釋
倍數(shù)，即為樣品的實(shí)際濃度。
人補(bǔ)體因子I(CFI)ELISA試劑盒相關(guān)優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品:
KS11895 人細(xì)胞絨毛蛋白/埃茲蛋白(cytovillin/ezrin)ELISA試劑盒
KS11896 大鼠紅細(xì)胞生成素受體(EPOR)ELISA試劑盒
KS11897 人白介素12(IL-12/P70)ELISA試劑盒
KS11898 人環(huán)磷酸鳥苷(cGMP)ELISA試劑盒
KS11899 兔子神經(jīng)膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP)ELISA試劑盒
KS17891 豬白介素22(IL22)ELISA試劑盒
KS11901 大鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子B(VEGF-B)ELISA試劑盒
KS11902 小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子4(TIMP-4)ELISA試劑盒
KS11903 大鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體1(VEGFR-1)ELISA試劑盒
KS11904 人17羥孕酮(17-OHP)ELISA試劑盒
KS11905 人抗IgE受體抗體ELISA試劑盒
KS11906 人潛伏膜蛋白1(LMP-1)ELISA試劑盒
KS11907 雞B因子(BF)ELISA試劑盒
KS11908 小鼠鐵蛋白(FE)ELISA試劑盒
KS11909 人胸腺嘧啶核苷磷酸化酶(TP)ELISA試劑盒
KS11910 小鼠胃腸癌標(biāo)志物CA199ELISA試劑盒
KS18064 豬白介素2受體α(IL2Rα)ELISA試劑盒
KS11912 大鼠血纖蛋白原(Fbg)ELISA試劑盒
KS11913 小鼠顆粒酶B(Gzms-B)ELISA試劑盒
KS11914 人乙酰肝素酶(HPA)ELISA試劑盒
KS11915 人游離雌三醇(FE3)ELISA試劑盒
KS11916 人尿微量白蛋白(ALB)ELISA試劑盒
KS11917 人微管相關(guān)蛋白2(MAP-2)ELISA試劑盒
KS11918 小鼠皮質(zhì)酮/腎上腺酮(CORT)ELISA試劑盒
KS11919 人神經(jīng)肽Y(NP-Y)ELISA試劑盒
KS11920 兔子血小板因子4(PF-4/CXCL4)ELISA試劑盒
KS11921 犬血栓前體蛋白(TpP)ELISA試劑盒
KS11922 人抗BB抗體(BB-Ab)ELISA試劑盒
KS11923 小鼠結(jié)合珠蛋白/觸珠蛋白(Hpt/HP)ELISA試劑盒
KS11924 大鼠骨保護(hù)素(OPG)ELISA試劑盒
KS11925 犬內(nèi)皮型一氧化氮合成酶(eNOS)ELISA試劑盒
KS11926 人膜橋蛋白(ponticulin)ELISA試劑盒
KS10324 豬白介素3(IL-3)ELISA試劑盒
KS11928 人抗流行性出血熱病毒抗體IgG(EHF)ELISA試劑盒
KS11929 人肝素結(jié)合性表皮生長(zhǎng)因子(HB-EGF)ELISA試劑盒
KS11930 人OJ抗體/抗異亮氨酰tRNA合成酶抗體(OJ/IleRS)ELISA試劑盒