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技術(shù)文章

重組人骨形態(tài)發(fā)生蛋白2(rhBMP-2)ELISA試劑盒說明書

閱讀:110          發(fā)布時間:2020-1-6

重組人骨形態(tài)發(fā)生蛋白2(rhBMP-2)ELISA試劑盒
英文簡稱Recombinant human bone morphogenetic protein 2 (rhBMP-2) ELISA Kit

產(chǎn)品貨號:KS13958

品牌名稱:科順生物 
產(chǎn)品規(guī)格:96T/48T
運輸方式:快遞(根據(jù)客戶要求,選擇具體的運輸方式)
產(chǎn)品價格:*,歡迎在線留言洽談!
使用范圍:僅供科研檢測,不得用于臨床.

重組人骨形態(tài)發(fā)生蛋白2(rhBMP-2)ELISA試劑盒實驗原理:

本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中小鼠胰島素(INS)水平。用純的小鼠胰島素(INS)捕獲抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被的微孔中依次加入小鼠胰島素(INS),再與HRP標記的檢測抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催下轉(zhuǎn)成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的小鼠胰島素(INS)呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中小鼠胰島素(INS)含量。

重組人骨形態(tài)發(fā)生蛋白2(rhBMP-2)ELISA試劑盒組成

試劑盒組成

48孔配置

96孔配置

保存

說明書

1份

1份

 

封板膜

2片

2片

 

密封袋

1個

1個

 

酶標包被板

1×48

1×96

2-8℃保存

標準品

0.3ml×6管

0.3ml×6管

2-8℃保存

酶標試劑

5 ml×1瓶

10 ml×1瓶

2-8℃保存

樣品稀釋液

3 ml×1瓶

6 ml×1瓶

2-8℃保存

顯色劑A液

3 ml×1瓶

6 ml×1瓶

2-8℃保存

顯色劑B液

3 ml×1瓶

6 ml×1瓶

2-8℃保存

終止液

3 ml×1瓶

6 ml×1瓶

2-8℃保存

20×濃縮洗滌液

15ml×1瓶

25ml×1瓶

2-8℃保存

注:標準品濃度依次為:40、20、10、5、2.5、0 mIU/L.

重組人骨形態(tài)發(fā)生蛋白2(rhBMP-2)ELISA試劑盒樣本處理及要求

1. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應再次離心。

2. 血漿:應根據(jù)標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應該再次離心。

3. 尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。

4. 細胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。

5. 組織標本:切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本?/span>后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。

6. 標本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融.

7. 不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧物酶的(HRP)活性。

 

重組人骨形態(tài)發(fā)生蛋白2(rhBMP-2)ELISA試劑盒操作步驟

  • 標準品的加樣:設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;。
  • 加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
  • 加酶:每孔加入酶標試劑100μl,空白孔除外。
  • 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育60分鐘。
  • 配液:將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用。
  • 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。
  • 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘. 
  • 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。
  • 測定:以空白孔調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。

重組人骨形態(tài)發(fā)生蛋白2(rhBMP-2)ELISA試劑盒注意事項

  • 試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。
  • 濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。
  • 各步加樣均應使用加樣器,并經(jīng)常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間zuei好控制在5分鐘內(nèi),如標本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。
  • 請每次測定的同時做標準曲線,zuei好做復孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標準品孔第yi孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。
  • 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
  • 底物請避光保存。
  • 嚴格按照說明書的操作進行,試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.
  • 所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
  • 本試劑不同批號組分不得混用。

10. 如與英文說明書有異,以英文說明書為準。

計算:

以標準物的濃度為橫坐標,OD值為縱坐標,    

在坐標紙上繪出標準曲線,根據(jù)樣品的OD      

值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋      

倍數(shù);或用標準物的濃度與OD值計算出標      

準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值      

代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋      

倍數(shù),即為樣品的實際濃度。                  

重組人骨形態(tài)發(fā)生蛋白2(rhBMP-2)ELISA試劑盒相關(guān)優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品:

KS11925 犬內(nèi)皮型一氧化氮合成酶(eNOS)ELISA試劑盒

KS11926 人膜橋蛋白(ponticulin)ELISA試劑盒

KS10324 豬白介素3(IL-3)ELISA試劑盒

KS11928 人抗流行性出血熱病毒抗體IgG(EHF)ELISA試劑盒

KS11929 人肝素結(jié)合性表皮生長因子(HB-EGF)ELISA試劑盒

KS11930 人OJ抗體/抗異亮氨酰tRNA合成酶抗體(OJ/IleRS)ELISA試劑盒

KS11931 人抗可提取核抗原抗體(ENA-Ab)ELISA試劑盒

KS11932 雞轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGF-β1)ELISA試劑盒

KS11933 人抗SS-A/Ro抗體ELISA試劑盒

KS11934 小鼠水通道蛋白5(AQP-5)ELISA試劑盒

KS11935 人松弛肽/松弛素(RLN)ELISA試劑盒

KS11936 人抗丁型肝炎病毒抗體(anti-HDV)ELISA試劑盒

KS11937 人可溶性瘦素受體(sLR)ELISA試劑盒

KS11938 小鼠丙酮酸激酶(PK)ELISA試劑盒

KS11939 人*型纖溶酶原激活物(uPA)ELISA試劑盒

KS11940 雞腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導配體3(TRAIL-R3)ELISA試劑盒

KS11941 人26S蛋白酶體(26SPSM)ELISA試劑盒

KS11942 人協(xié)同刺激分子受體(CMR)ELISA試劑盒

KS11943 人DNA結(jié)合蛋白(DBP)ELISA試劑盒

KS11944 鴨白介素4(IL-4)ELISA試劑盒

KS11945 兔*(NA)ELISA試劑盒

KS11946 兔子層連蛋白/板層素(LN)ELISA試劑盒

KS13353 豬白介素4(IL-4)ELISA試劑盒

KS11948 大鼠載脂蛋白B100(apo-B100)ELISA試劑盒

KS11949 人血管內(nèi)皮細胞生長因子受體2(VEGFR-2)ELISA試劑盒

KS11950 人神經(jīng)營養(yǎng)因子3(NT-3)ELISA試劑盒

KS11951 人內(nèi)脂素/內(nèi)臟脂肪素(visfatin)ELISA試劑盒

KS11952 人肽聚糖(PG)ELISA試劑盒

KS11953 人*(AP)ELISA試劑盒

KS11954 人甘丙肽/甘丙素(GAL)ELISA試劑盒

KS11955 小鼠神經(jīng)營養(yǎng)因子4(NT-4)ELISA試劑盒

KS11956 人細胞角蛋白18(CK-18)ELISA試劑盒

KS11957 人乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白(LF/LTF)ELISA試劑盒

KS11958 大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶9/明膠酶B(MMP-9/GelatinaseB)ELISA試劑盒

KS11959 小鼠阿糖胞苷ELISA試劑盒

KS11960 兔子補體片斷3a(C3a)ELISA試劑盒

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