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人1,25二羥基*3ELISA試劑盒說明書
閱讀：83 發(fā)布時間：2019-12-27人1,25二羥基*3(1,25-(OH)2D3/DVD/DHVD 3)ELISA試劑盒
英文簡稱：Person 1,25-dihydroxyvitamin D3 (1,25- (OH) 2D3 / DVD / DHVD 3) ELISA kit
產(chǎn)品貨號：KS13474
品牌名稱：科順生物
產(chǎn)品規(guī)格：96T/48T
運輸方式：快遞(根據(jù)客戶要求，選擇具體的運輸方式)
產(chǎn)品價格：*，歡迎在線留言洽談！
使用范圍：僅供科研檢測,不得用于臨床.
人1,25二羥基*3(1,25-(OH)2D3/DVD/DHVD 3)ELISA試劑盒實驗原理：
本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中小鼠胰島素（INS）水平。用純化的小鼠胰島素（INS）捕獲抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被的微孔中依次加入小鼠胰島素（INS），再與HRP標(biāo)記的檢測抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的小鼠胰島素（INS）呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中小鼠胰島素（INS）含量。
人1,25二羥基*3(1,25-(OH)2D3/DVD/DHVD 3)ELISA試劑盒組成：
試劑盒組成 | 48孔配置 | 96孔配置 | 保存 |
說明書 | 1份 | 1份 |
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封板膜 | 2片 | 2片 |
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密封袋 | 1個 | 1個 |
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酶標(biāo)包被板 | 1×48 | 1×96 | 2-8℃保存 |
標(biāo)準(zhǔn)品 | 0.3ml×6管 | 0.3ml×6管 | 2-8℃保存 |
酶標(biāo)試劑 | 5 ml×1瓶 | 10 ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
樣品稀釋液 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
顯色劑A液 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
顯色劑B液 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
終止液 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
20×濃縮洗滌液 | 15ml×1瓶 | 25ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
注：標(biāo)準(zhǔn)品濃度依次為：40、20、10、5、2.5、0 mIU/L.
人1,25二羥基*3(1,25-(OH)2D3/DVD/DHVD 3)ELISA試劑盒樣本處理及要求：
1. 血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過程中如出現(xiàn)沉淀，應(yīng)再次離心。
2. 血漿：應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)該再次離心。
3. 尿液：用無菌管收集，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。
4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清：檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
5. 組織標(biāo)本：切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。
6. 標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實驗。若不能馬上進(jìn)行試驗，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融.
7. 不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。
人1,25二羥基*3(1,25-(OH)2D3/DVD/DHVD 3)ELISA試劑盒操作步驟
- 標(biāo)準(zhǔn)品的加樣：設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔，標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL；。
- 加樣：分別設(shè)空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。
- 加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑100μl，空白孔除外。
- 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育60分鐘。
- 配液：將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用。
- 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。
- 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.
- 終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。
- 測定：以空白孔調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
人1,25二羥基*3(1,25-(OH)2D3/DVD/DHVD 3)ELISA試劑盒注意事項：
- 試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
- 濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結(jié)果。
- 各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間zuei好控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。
- 請每次測定的同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線，zuei好做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高（樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔第yi孔的OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測定，計算時請后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。
- 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
- 底物請避光保存。
- 嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行，試驗結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).
- 所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
- 本試劑不同批號組分不得混用。
10. 如與英文說明書有異，以英文說明書為準(zhǔn)。
計算：
以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo)，OD值為縱坐標(biāo)，
在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線，根據(jù)樣品的OD
值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度；再乘以稀釋
倍數(shù)；或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計算出標(biāo)
準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值
代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋
倍數(shù)，即為樣品的實際濃度。
人1,25二羥基*3(1,25-(OH)2D3/DVD/DHVD 3)ELISA試劑盒相關(guān)優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品:
KS13585 牛補體1q(C1q)ELISA試劑盒
KS13586 小鼠乳酸(Lactate)ELISA試劑盒
KS13587 牛觸珠蛋白(HP)ELISA試劑盒
KS13588 人組織相容性復(fù)合體Ⅰ類相關(guān)基因A(MICA)ELISA試劑盒
KS13589 植物幾丁質(zhì)酶(chitinase)ELISA試劑盒
KS13590 植物原卟啉原氧化酶(ppo)ELISA試劑盒
KS13591 大鼠α平滑肌肌動蛋白(α-SMA)ELISA試劑盒
KS13592 植物乙酰乳酸合成酶(ALS)ELISA試劑盒
KS13593 大鼠CD68分子(CD68)ELISA試劑盒
KS13594 人還原型*(GSH)ELISA試劑盒
KS13595 人褪黑激素(Melatonin)ELISA試劑盒
KS13596 人促腎上腺皮質(zhì)素(ACTH)ELISA試劑盒
KS13597 人睪丸酮(Testosterone)ELISA試劑盒
KS13598 人趨化因子IP-10(interferon-inducible protein-10)ELISA試劑盒
KS13599 人多巴胺DopamineELISA試劑盒
KS13600 人γ-胺基丁酸GABAELISA試劑盒
KS13601 人低氧誘導(dǎo)因子1a(HIF-1a)ELISA試劑盒
KS13602 人乙酰*羧化酶(ACCase)ELISA試劑盒
KS13603 猴孕酮(P)ELISA試劑盒
KS13604 猴雌二醇(E2)ELISA試劑盒
KS13605 大鼠*(Dex)ELISA試劑盒
KS13606 綿羊促卵泡素(FSH)ELISA試劑盒
KS13607 綿羊促黃體激素(LH)ELISA試劑盒
KS13608 綿羊睪酮(T)ELISA試劑盒
KS13609 竹子總木脂素(lignan)ELISA試劑盒
KS13610 小鼠胸腺活化調(diào)節(jié)趨化因子(TARC/CCL17)ELISA試劑盒
KS13611 植物1,4,5-三磷酸肌醇(IP3)ELISA試劑盒
KS13612 人1-3-β-D葡聚糖(1-3-β-D glucosidase)ELISA試劑盒
KS13613 大鼠腎素(PRA)ELISA試劑盒
KS13614 *G4(IgG4)ELISA試劑盒
KS13615 *G3(IgG3)ELISA試劑盒
KS13616 *G1(IgG1)ELISA試劑盒
KS13617 *G2(IgG2)ELISA試劑盒
KS13618 牛黃ti酮(P)ELISA試劑盒
KS13619 牛氫hua可de松(HYD)ELISA試劑盒
KS13620 犬狂犬病毒(RV)ELISA試劑盒