技術(shù)文章
人*(Thymosin)ELISA試劑盒說(shuō)明書
閱讀:75 發(fā)布時(shí)間:2019-12-4人*(Thymosin)ELISA試劑盒的詳細(xì)資料:
英文名稱:People Thymosin (Thymosin) ELISA kit
貨號(hào):KS12345
規(guī)格:96T/48T
使用范圍:僅限科研范圍內(nèi)使用
各種種屬:人、大小鼠、豚鼠、兔子、豬、犬、牛、羊…
標(biāo)本齊全:血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿、組織液、關(guān)節(jié)液、胸腔yi液等…
保存條件:2-8℃
實(shí)驗(yàn)原理
試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)。往預(yù)先包被人肌酸激酶腦型同工酶(CK-BB)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體,經(jīng)過(guò)溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的人肌酸激酶腦型同工酶(CK-BB)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD 值),計(jì)算樣品濃度。
人*(Thymosin)ELISA試劑盒樣本處理及要求
1. 血清:全血標(biāo)本請(qǐng)于室溫放置2小時(shí)或4℃過(guò)夜后于1000g離心20分鐘,取上清即可檢測(cè),或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2. 血漿:可用EDTA或肝素作為抗凝劑,標(biāo)本采集后30分鐘內(nèi)于2 - 8°C 1000g離心20分鐘,或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
3. 細(xì)胞培養(yǎng)物上清或其它生物標(biāo)本:1000g離心20分鐘,取上清即可檢測(cè),或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
注:標(biāo)本溶血會(huì)影響后檢測(cè)結(jié)果,因此溶血標(biāo)本不宜進(jìn)行此項(xiàng)檢測(cè)。
人*(Thymosin)ELISA試劑盒需要而未提供的試劑和器材
1. 酶標(biāo)儀(450nm)
2. 高精度加樣器及槍頭:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3. 37℃恒溫箱
4. 蒸餾水或去離子水
試劑準(zhǔn)備
試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡后方可使用。
20×洗滌緩沖液的稀釋:蒸餾水按1:20稀釋,即1份20×洗滌緩沖液加19份蒸餾水。
人*(Thymosin)ELISA試劑盒操作步驟
1. 從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2. 設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;
3. 樣本孔中加入待測(cè)樣本50μL;空白孔不加。
4. 除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過(guò)氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測(cè)抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5. 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板)。
6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。
人*(Thymosin)ELISA試劑盒注意事項(xiàng)
1. 嚴(yán)格按照規(guī)定的時(shí)間和溫度進(jìn)行溫育以保證準(zhǔn)確結(jié)果。所有試劑都必須在使用前達(dá)到室溫20-25℃。使用后立即冷藏保存試劑。
2. 洗板不正確可以導(dǎo)致不準(zhǔn)確的結(jié)果。在加入底物前確保盡量吸干孔內(nèi)液體。溫育過(guò)程中不要讓微孔干燥掉。
3. 消除板底殘留的液體和手指印,否則影響OD值。
4. 底物顯色液應(yīng)呈無(wú)色或很淺的顏色,已經(jīng)變藍(lán)的底物液不能使用。
5. 避免試劑和標(biāo)本的交叉污染以免造成錯(cuò)誤結(jié)果。
6. 在儲(chǔ)存和溫育時(shí)避免強(qiáng)光直接照射。
7. 平衡至室溫后再打開密封袋以防水滴凝聚在冷板條上。
8. 任何反應(yīng)試劑不能接觸漂白溶劑或漂白溶劑所散發(fā)的強(qiáng)烈氣體。任何漂白成分都會(huì)破壞試劑盒中反應(yīng)試劑的生物活性。
9. 不能使用過(guò)期產(chǎn)品。
10. 如果可能傳播疾病,所有的樣品都應(yīng)管理好,按照規(guī)定的程序處理樣品和檢測(cè)裝置。
人*(Thymosin)ELISA試劑盒洗板方法
手工洗板方法:吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體;在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上鋪墊幾層吸水紙,酶標(biāo)板朝下用力拍幾次;將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。根據(jù)需要,重復(fù)此過(guò)程數(shù)次。
自動(dòng)洗板:如果有自動(dòng)洗板機(jī),應(yīng)在熟練使用后再用到正式實(shí)驗(yàn)過(guò)程中。
人*(Thymosin)ELISA試劑盒相關(guān)優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品:
KS15745 大鼠高鐵血紅蛋白(MHB)ELISA試劑盒
KS15746 大鼠白介素2可溶性受體(IL2sR)ELISA試劑盒
KS15747 大鼠吡啶酚(PYD)ELISA試劑盒
KS15748 大鼠二胺氧化酶(DAO)ELISA試劑盒
KS15749 大鼠軸突生長(zhǎng)誘向因子1(Ntn1)ELISA試劑盒
KS15750 大鼠β位淀粉樣前體蛋白裂解酶2(BACE2)ELISA試劑盒
KS15751 大鼠褪黑素(MT/MLT)ELISA試劑盒
KS15752 大鼠骨堿性磷酸酶(BALP)ELISA試劑盒
KS15753 大鼠成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子10(FGF10)ELISA試劑盒
KS15754 大鼠抗髓鞘相關(guān)糖蛋白抗體(MAGAb)ELISA試劑盒
KS15755 大鼠凝聚素(CLU)ELISA試劑盒
KS15756 大鼠分泌型磷脂酶A2(sPLA2)ELISA試劑盒
KS15757 大鼠Ⅰ型膠原C端肽(CTXⅠ)ELISA試劑盒
KS15758 大鼠轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β刺激蛋白22(TSC22)ELISA試劑盒
KS15759 大鼠胞漿型磷脂酶A2(cPLA2)ELISA試劑盒
KS15760 大鼠磷酸化核因子κB抑制蛋白α(pIKSα)ELISA試劑盒
KS15761 大鼠孕酮受體(PROGR)ELISA試劑盒
KS15762 大鼠Ⅰ型膠原交聯(lián)羧基末端肽(ⅠCTP)ELISA試劑盒
KS15763 大鼠核因子κB(NFκB)ELISA試劑盒
KS15764 大鼠D乳酸脫氫酶(DLDH)ELISA試劑盒
KS15765 大鼠磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)ELISA試劑盒
KS15766 大鼠胸腺活化調(diào)節(jié)趨化因子(TARC/CCL17)ELISA試劑盒
KS15767 大鼠熱休克蛋白47(HSP47)ELISA試劑盒
KS15768 大鼠糖缺失性轉(zhuǎn)鐵蛋白(CDT)ELISA試劑盒
KS15769 大鼠*(CH)ELISA試劑盒
KS15770 大鼠總膽汁酸(TBA)ELISA試劑盒
KS15771 大鼠檸檬酸合酶(CS)ELISA試劑盒
KS15772 大鼠β2微球蛋白(BMG/β2MG)ELISA試劑盒
KS15773 大鼠L鼠乳酸脫氫酶(LLDH)ELISA試劑盒
KS15774 大鼠*結(jié)合蛋白(RBP)ELISA試劑盒
KS15775 大鼠脂酰*合成酶(ACS)ELISA試劑盒
KS15776 大鼠*釋放激素受體抗體(GNRHRAb)ELISA試劑盒
KS15777 大鼠孕酮受體(PGR)ELISA試劑盒
KS15778 大鼠肉毒堿脂酰轉(zhuǎn)移酶(CACT)ELISA試劑盒
KS15779 大鼠血管性血友病因子裂解蛋白酶(ADAMTS13/vWFcp)ELISA試劑盒
KS15780 大鼠血管緊張素Ⅱ轉(zhuǎn)化酶(ACEⅡ)ELISA試劑盒