智慧城市網(wǎng)技術文章
人抗*Ⅲ抗體（AT-Ⅲ）ELISA試劑盒說明書
閱讀：48 發(fā)布時間：2019-11-28人抗*Ⅲ抗體(AT-Ⅲ)ELISA試劑盒
英文簡稱：Antibody human antithrombin Ⅲ (AT-Ⅲ) ELISA kit
產(chǎn)品貨號：KS12066
品牌名稱：科順生物
產(chǎn)品規(guī)格：96T/48T
運輸方式：快遞(根據(jù)客戶要求，選擇具體的運輸方式)
產(chǎn)品價格：*，歡迎在線留言洽談！
使用范圍：僅供科研檢測,不得用于臨床.
人抗*Ⅲ抗體(AT-Ⅲ)ELISA試劑盒實驗原理：
本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中小鼠胰島素（INS）水平。用純化的小鼠胰島素（INS）捕獲抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被的微孔中依次加入小鼠胰島素（INS），再與HRP標記的檢測抗體結合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的小鼠胰島素（INS）呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標準曲線計算樣品中小鼠胰島素（INS）含量。
人抗*Ⅲ抗體(AT-Ⅲ)ELISA試劑盒組成：
試劑盒組成 | 48孔配置 | 96孔配置 | 保存 |
說明書 | 1份 | 1份 |
|
封板膜 | 2片 | 2片 |
|
密封袋 | 1個 | 1個 |
|
酶標包被板 | 1×48 | 1×96 | 2-8℃保存 |
標準品 | 0.3ml×6管 | 0.3ml×6管 | 2-8℃保存 |
酶標試劑 | 5 ml×1瓶 | 10 ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
樣品稀釋液 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
顯色劑A液 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
顯色劑B液 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
終止液 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
20×濃縮洗滌液 | 15ml×1瓶 | 25ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
注：標準品濃度依次為：40、20、10、5、2.5、0 mIU/L.
人抗*Ⅲ抗體(AT-Ⅲ)ELISA試劑盒樣本處理及要求：
1. 血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清，保存過程中如出現(xiàn)沉淀，應再次離心。
2. 血漿：應根據(jù)標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應該再次離心。
3. 尿液：用無菌管收集，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。
4. 細胞培養(yǎng)上清：檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。檢測細胞內的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融，以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。
5. 組織標本：切割標本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本?/span>化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。
6. 標本采集后盡早進行提取，提取按相關文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融.
7. 不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。
人抗*Ⅲ抗體(AT-Ⅲ)ELISA試劑盒操作步驟
- 標準品的加樣：設置標準品孔和樣本孔，標準品孔各加不同濃度的標準品50μL；。
- 加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。
- 加酶：每孔加入酶標試劑100μl，空白孔除外。
- 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育60分鐘。
- 配液：將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用。
- 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。
- 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.
- 終止：每孔加終止液50μl，終止反應（此時藍色立轉黃色）。
- 測定：以空白孔調零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行。
人抗*Ⅲ抗體(AT-Ⅲ)ELISA試劑盒注意事項：
- 試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未用完，板條應裝入密封袋中保存。
- 濃洗滌液可能會有結晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結果。
- 各步加樣均應使用加樣器，并經(jīng)常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間zuei好控制在5分鐘內，如標本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。
- 請每次測定的同時做標準曲線，zuei好做復孔。如標本中待測物質含量過高（樣本OD值大于標準品孔第yi孔的OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測定，計算時請后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。
- 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
- 底物請避光保存。
- 嚴格按照說明書的操作進行，試驗結果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.
- 所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
- 本試劑不同批號組分不得混用。
10. 如與英文說明書有異，以英文說明書為準。
計算：
以標準物的濃度為橫坐標，OD值為縱坐標，
在坐標紙上繪出標準曲線，根據(jù)樣品的OD
值由標準曲線查出相應的濃度；再乘以稀釋
倍數(shù)；或用標準物的濃度與OD值計算出標
準曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值
代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋
倍數(shù)，即為樣品的實際濃度。
人抗*Ⅲ抗體(AT-Ⅲ)ELISA試劑盒相關產(chǎn)品:
KS16645 犬中性粒細胞彈性蛋白酶(ELA2)ELISA試劑盒
KS16646 犬脂聯(lián)素(ADP)ELISA試劑盒
KS16647 犬脂肪酸結合蛋白(FABP)ELISA試劑盒
KS16648 犬脂多糖/內毒素(LPS)ELISA試劑盒
KS16649 犬脂蛋白脂酶(LPL)ELISA試劑盒
KS16650 犬正常T細胞表達和分泌因子(RANTES)ELISA試劑盒
KS16651 犬載脂蛋白H(APOH)ELISA試劑盒
KS16652 犬載脂蛋白C1(APOC1)ELISA試劑盒
KS16653 犬誘導型一氧化氮合成酶(NOS2)ELISA試劑盒
KS16654 犬誘導型一氧化氮合成酶(iNOS)ELISA試劑盒
KS16655 犬游離脂肪酸(FFA)ELISA試劑盒
KS16656 犬游離三dian甲狀腺原氨酸(FreeT3)ELISA試劑盒
KS16657 犬游離甲狀腺素(FT4)ELISA試劑盒
KS16658 犬抑制素βB(Inhbb)ELISA試劑盒
KS16659 犬胰腺甘油三酯脂酶(PNLIP)ELISA試劑盒
KS16660 犬胰高血糖素樣肽1(GLP1)ELISA試劑盒
KS16661 犬胰島素原(PI)ELISA試劑盒
KS16662 犬胰島素樣因子3(INSL3)ELISA試劑盒
KS16663 犬胰島素樣生長因子結合蛋白3(IGFBP3)ELISA試劑盒
KS16664 犬胰島素樣生長因子II(IGF2)ELISA試劑盒
KS16665 犬胰島素樣生長因子1(IGF1)ELISA試劑盒
KS16666 犬胰島素(INS)ELISA試劑盒
KS16667 犬*原激活肽(TAP)ELISA試劑盒
KS16668 犬*(trypsin)ELISA試劑盒
KS16669 犬一氧化氮(NO)ELISA試劑盒
KS16670 犬血小板生成素(T
KS16671 犬血纖蛋白原降解產(chǎn)物(FDP)ELISA試劑盒
KS16672 犬血纖蛋白原(Fbg)ELISA試劑盒
KS16673 犬血清淀粉樣蛋白A2(SAA2)ELISA試劑盒
KS16674 犬血清淀粉樣蛋白A(SAA)ELISA試劑盒
KS16675 犬血管性血友病因子/瑞斯托霉素輔因子(VWF)ELISA試劑盒
KS16676 犬血管內皮細胞生長因子A(VEGFA)ELISA試劑盒
KS16677 犬血管緊張素轉化酶2(ACE2)ELISA試劑盒
KS16678 犬血管緊張素轉化酶(ACE)ELISA試劑盒
KS16679 犬血管緊張素Ⅱ(ANGⅡ)ELISA試劑盒
KS16680 犬血管緊張素17(Ang17)ELISA試劑盒