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技術(shù)文章

人*龍(Prednisolone)ELISA試劑盒說明書

閱讀:70          發(fā)布時(shí)間:2019-11-8

人*龍(Prednisolone)ELISA試劑盒
英文簡稱:People prednisolone (Prednisolone) ELISA kit

產(chǎn)品貨號(hào):KS11225

品牌名稱:科順生物 
產(chǎn)品規(guī)格:96T/48T
運(yùn)輸方式:快遞(根據(jù)客戶要求,選擇具體的運(yùn)輸方式)
產(chǎn)品價(jià)格:*,歡迎在線留言洽談!
使用范圍:僅供科研檢測(cè),不得用于臨床.

人*龍(Prednisolone)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理:

本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中小鼠胰島素(INS)水平。用純的小鼠胰島素(INS)捕獲抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被的微孔中依次加入小鼠胰島素(INS),再與HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催下轉(zhuǎn)成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的小鼠胰島素(INS)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測(cè)定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中小鼠胰島素(INS)含量。

人*龍(Prednisolone)ELISA試劑盒組成

試劑盒組成

48孔配置

96孔配置

保存

說明書

1份

1份

 

封板膜

2片

2片

 

密封袋

1個(gè)

1個(gè)

 

酶標(biāo)包被板

1×48

1×96

2-8℃保存

標(biāo)準(zhǔn)品

0.3ml×6管

0.3ml×6管

2-8℃保存

酶標(biāo)試劑

5 ml×1瓶

10 ml×1瓶

2-8℃保存

樣品稀釋液

3 ml×1瓶

6 ml×1瓶

2-8℃保存

顯色劑A液

3 ml×1瓶

6 ml×1瓶

2-8℃保存

顯色劑B液

3 ml×1瓶

6 ml×1瓶

2-8℃保存

終止液

3 ml×1瓶

6 ml×1瓶

2-8℃保存

20×濃縮洗滌液

15ml×1瓶

25ml×1瓶

2-8℃保存

注:標(biāo)準(zhǔn)品濃度依次為:40、20、10、5、2.5、0 mIU/L.

人*龍(Prednisolone)ELISA試劑盒樣本處理及要求

1. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。

2. 血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心。

3. 尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。

4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。

5. 組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè),其余冷凍備用。

6. 標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融.

7. 不能檢測(cè)含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧物酶的(HRP)活性。

 

人*龍(Prednisolone)ELISA試劑盒操作步驟

  • 標(biāo)準(zhǔn)品的加樣:設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;。
  • 加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。
  • 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑100μl,空白孔除外。
  • 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育60分鐘。
  • 配液:將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用。
  • 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
  • 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘. 
  • 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
  • 測(cè)定:以空白孔調(diào)零,450nm波長依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。

人*龍(Prednisolone)ELISA試劑盒注意事項(xiàng)

  • 試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
  • 濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。
  • 各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間zuei好控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。
  • 請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,zuei好做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔第yi孔的OD值),請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測(cè)定,計(jì)算時(shí)請(qǐng)后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。
  • 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
  • 底物請(qǐng)避光保存。
  • 嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).
  • 所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
  • 本試劑不同批號(hào)組分不得混用。

10. 如與英文說明書有異,以英文說明書為準(zhǔn)。

計(jì)算:

以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),    

在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的OD      

值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋      

倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)      

準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值      

代入方程式,計(jì)算出樣品濃度,再乘以稀釋      

倍數(shù),即為樣品的實(shí)際濃度。                  

人*龍(Prednisolone)ELISA試劑盒相關(guān)產(chǎn)品:

KS18240 犬抗核抗體(ANA)ELISA試劑盒

KS18241 犬循環(huán)免疫復(fù)合物(CIC)ELISA試劑盒

KS18242 植物致敏蛋白(GFP)ELISA試劑盒

KS18243 植物微量蛋白(MP)ELISA試劑盒

KS18244 人可溶性髓系細(xì)胞觸發(fā)受體-1(sTREM-1)ELISA試劑盒

KS18245 小鼠可溶性髓系細(xì)胞觸發(fā)受體-1(sTREM-1)ELISA試劑盒

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KS18247 人白細(xì)胞介素-17A(IL-17A)ELISA試劑盒

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KS18249 兔白細(xì)胞介素-17A(IL-17A)ELISA試劑盒

KS18250 人核轉(zhuǎn)錄因子(NF-KS)ELISA試劑盒

KS18251 植物木葡聚糖內(nèi)轉(zhuǎn)糖苷酶(XET)活性ELISA試劑盒

KS18252 兔I型膠原(COL-I)ELISA試劑盒

KS18253 大鼠甘露糖結(jié)合蛋白/甘露糖結(jié)合凝集素(MBP/MBL)ELISA試劑盒

KS18254 大鼠胃粘液素(GM)ELISA試劑盒

KS18255 植物木葡聚糖內(nèi)糖基轉(zhuǎn)酶水解酶(XTH)ELISA試劑盒

KS18256 人干擾素-γ(INF-γ)ELISA試劑盒

KS18257 小鼠瓜氨酸化Ⅱ型膠原抗體(Cit-CⅡAb)ELISA試劑盒

KS18258 小鼠Ⅱ型膠原(ColⅡ)抗體ELISA試劑盒

KS18259 小鼠抗環(huán)胍氨酸肽抗體(CCP)ELISA試劑盒

KS18260 小鼠促酸性粒細(xì)胞趨化因子1ELISA試劑盒

KS18261 小鼠促酸性粒細(xì)胞趨化因子3ELISA試劑盒

KS18262 大鼠5羥基吲哚乙酸(5-HIAA)ELISA試劑盒

KS18263 小鼠游離原卟啉(FEP)ELISA試劑盒

KS18264 鹿脂多糖/內(nèi)毒素(LPS)ELISA試劑盒

KS18265 大鼠黃體生成素(LH)ELISA測(cè)定試劑盒

KS18266 大鼠干細(xì)胞因子(SCF)ELISA試劑盒

KS18267 小鼠肌酐(Cr)ELISA試劑盒

KS18268 大鼠*7α-羥化酶(CYP7a1)ELISA試劑盒

KS18269 大鼠吲哚胺2,3-雙加氧酶(IDO)ELISA試劑盒

KS18270 大鼠內(nèi)源性糖皮質(zhì)激素(GC)ELISA試劑盒

KS18271 羊褪黑激素(Melatonin)ELISA試劑盒

KS18272 樣褪黑激素(Melatonin)ELISA試劑盒

KS18273 大鼠四氫生物蝶呤(BH4)ELISA試劑盒

KS18274 鹿組胺(HIS)ELISA試劑盒

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