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技術(shù)文章

人細(xì)胞色素P450c21A/21-羥化酶ELISA試劑盒說明書

閱讀:67          發(fā)布時(shí)間:2019-11-1

人細(xì)胞色素P450c21A/21-羥化酶(CYP21A)ELISA試劑盒的詳細(xì)資料:

英文名稱:Human cytochrome P450c21A / 21- hydroxylase (CYP21A) ELISA kit

貨號:KS10856

規(guī)格:96T/48T

使用范圍:科研范圍內(nèi)使用

各種種屬:人、大小鼠、豚鼠、兔子、豬、犬、牛、羊… 
標(biāo)本齊全:血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿、組織液、關(guān)節(jié)液、胸腔yi液等… 
保存條件:2-8℃ 
實(shí)驗(yàn)原理

試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)。往預(yù)先包被人肌酸激酶腦型同工酶(CK-BB)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測抗體,經(jīng)過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的人肌酸激酶腦型同工酶(CK-BB)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),計(jì)算樣品濃度。

人細(xì)胞色素P450c21A/21-羥化酶(CYP21A)ELISA試劑盒樣本處理及要求

1. 血清:全血標(biāo)本請于室溫放置2小時(shí)或4℃過夜后于1000g離心20分鐘,取上清即可檢測,或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。

2. 血漿:可用EDTA或肝素作為抗凝劑,標(biāo)本采集后30分鐘內(nèi)于2 - 8°C 1000g離心20分鐘,或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。

3. 細(xì)胞培養(yǎng)物上清或其它生物標(biāo)本:1000g離心20分鐘,取上清即可檢測,或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。

注:標(biāo)本溶血會影響后檢測結(jié)果,因此溶血標(biāo)本不宜進(jìn)行此項(xiàng)檢測。

人細(xì)胞色素P450c21A/21-羥化酶(CYP21A)ELISA試劑盒需要而未提供的試劑和器材

1. 酶標(biāo)儀(450nm)

2. 高精度加樣器及槍頭:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL

3. 37℃恒溫箱

4. 蒸餾水或去離子水

試劑準(zhǔn)備

試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡后方可使用。

20×洗滌緩沖液的稀釋:蒸餾水按1:20稀釋,即1份20×洗滌緩沖液加19份蒸餾水。

人細(xì)胞色素P450c21A/21-羥化酶(CYP21A)ELISA試劑盒操作步驟

1. 從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。

2. 設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;

3. 樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。

4. 除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

5. 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板)。

6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。

7. 每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值。

人細(xì)胞色素P450c21A/21-羥化酶(CYP21A)ELISA試劑盒注意事項(xiàng)

1. 嚴(yán)格按照規(guī)定的時(shí)間和溫度進(jìn)行溫育以保證準(zhǔn)確結(jié)果。所有試劑都必須在使用前達(dá)到室溫20-25℃。使用后立即冷藏保存試劑。

2. 洗板不正確可以導(dǎo)致不準(zhǔn)確的結(jié)果。在加入底物前確保盡量吸干孔內(nèi)液體。溫育過程中不要讓微孔干燥掉。

3. 消除板底殘留的液體和手指印,否則影響OD值。

4. 底物顯色液應(yīng)呈無色或很淺的顏色,已經(jīng)變藍(lán)的底物液不能使用。

5. 避免試劑和標(biāo)本的交叉污染以免造成錯(cuò)誤結(jié)果。

6. 在儲存和溫育時(shí)避免強(qiáng)光直接照射。

7. 平衡至室溫后再打開密封袋以防水滴凝聚在冷板條上。

8. 任何反應(yīng)試劑不能接觸漂白溶劑或漂白溶劑所散發(fā)的強(qiáng)烈氣體。任何漂白成分都會破壞試劑盒中反應(yīng)試劑的生物活性。

9. 不能使用過期產(chǎn)品。

10. 如果可能傳播疾病,所有的樣品都應(yīng)管理好,按照規(guī)定的程序處理樣品和檢測裝置。

人細(xì)胞色素P450c21A/21-羥化酶(CYP21A)ELISA試劑盒洗板方法

手工洗板方法:吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體;在實(shí)驗(yàn)臺上鋪墊幾層吸水紙,酶標(biāo)板朝下用力拍幾次;將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。根據(jù)需要,重復(fù)此過程數(shù)次。

自動洗板:如果有自動洗板機(jī),應(yīng)在熟練使用后再用到正式實(shí)驗(yàn)過程中。

人細(xì)胞色素P450c21A/21-羥化酶(CYP21A)ELISA試劑盒相關(guān)產(chǎn)品:

KS12622 大鼠溴脫氧核苷*(BrdU)ELISA試劑盒

KS12623 人TH糖蛋白(THP)ELISA試劑盒

KS12624 小鼠胰島素受體β(ISR-β)ELISA試劑盒

KS12625 小鼠活化素A(Activin-A)ELISA試劑盒

KS12626 人肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白A(SP-A)ELISA試劑盒

KS12627 小鼠過氧化物酶體增殖物激活受體α(PPAR-α)ELISA試劑盒

KS12628 人前列腺素D合成酶(PGDS)ELISA試劑盒

KS12629 人轉(zhuǎn)鐵蛋白受體(TFR/CD71)ELISA試劑盒

KS12630 大鼠骨形成蛋白(BMPs)ELISA試劑盒

KS12631 大鼠巨噬細(xì)胞集落刺激因子(M-CSF)ELISA試劑盒

KS12632 人寡聚蛋白(oligomeric)ELISA試劑盒

KS17884 豬補(bǔ)體片斷5b(C5b)ELISA試劑盒

KS12634 小鼠α*S轉(zhuǎn)移酶(α-GST)ELISA試劑盒

KS12635 人糖化蛋白(GSP)ELISA試劑盒

KS12636 大鼠前列腺素E2(PGE2)ELISA試劑盒

KS12637 人促甲狀腺素(TSH)ELISA試劑盒

KS12638 人cAMP反應(yīng)元件結(jié)合蛋白(CREB)ELISA試劑盒

KS12639 人抗甲狀腺微粒體抗體(ATMA/TMAB)ELISA試劑盒

KS12640 小鼠前列腺素E2(PGE2)ELISA試劑盒

KS12641 大鼠色素上皮衍生因子(PEDF)ELISA試劑盒

KS12642 人蛋白*磷酸酶(PTP/PTPase/CD148)ELISA試劑盒

KS12643 大鼠卵泡抑素(FS)ELISA試劑盒

KS12644 小鼠環(huán)磷酸鳥苷(cGMP)ELISA試劑盒

KS12645 小鼠αN已酰氨基葡糖苷酶(αNAG)ELISA試劑盒

KS12646 大鼠*Ⅱ(FⅡ)ELISA試劑盒

KS12647 人抗卵巢抗體(AOAb)ELISA試劑盒

KS12648 兔子脫氫表雄酮硫酸酯(DHEA-S)ELISA試劑盒

KS12649 兔子血纖蛋白原降解產(chǎn)物(FDP)ELISA試劑盒

KS12650 人c-fosELISA試劑盒

KS12651 人髓鞘堿性蛋白抗體(MBP)ELISA試劑盒

KS12652 兔內(nèi)皮型一氧化氮合成酶(eNOS)ELISA試劑盒

KS12653 兔纖溶酶抗纖溶酶復(fù)合物(PAP)ELISA試劑盒

KS12654 小鼠α2抗纖溶酶(α2-AP)ELISA試劑盒

KS12655 小鼠α半乳糖基抗體(Gal)ELISA試劑盒

KS12656 魚類主要組織相容性復(fù)合體(MHC)ELISA試劑盒

KS12657 大鼠晚期糖基化終末產(chǎn)物(AGEs)ELISA試劑盒

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