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人抗胃壁細(xì)胞抗體（AGPA/PCA）ELISA試劑盒原理
閱讀：74 發(fā)布時(shí)間：2019-7-11人抗胃壁細(xì)胞抗體(AGPA/PCA)ELISA試劑盒原理的詳細(xì)資料：
規(guī)格：96T/48T
使用范圍：科研范圍內(nèi)使用
各種種屬：人、大小鼠、豚鼠、兔子、豬、犬、牛、羊…
標(biāo)本齊全：血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿、組織液、關(guān)節(jié)液、胸腔yi液等…
保存條件：2-8℃
實(shí)驗(yàn)原理
試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）。往預(yù)先包被人肌酸激酶腦型同工酶（CK-BB）捕獲抗體的包被微孔中，依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體，經(jīng)過(guò)溫育并*洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的人肌酸激酶腦型同工酶（CK-BB）呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD 值），計(jì)算樣品濃度。
人抗胃壁細(xì)胞抗體(AGPA/PCA)ELISA試劑盒原理樣本處理及要求
1. 血清：全血標(biāo)本請(qǐng)于室溫放置2小時(shí)或4℃過(guò)夜后于1000g離心20分鐘，取上清即可檢測(cè)，或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2. 血漿：可用EDTA或肝素作為抗凝劑，標(biāo)本采集后30分鐘內(nèi)于2 - 8°C 1000g離心20分鐘，或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
3. 細(xì)胞培養(yǎng)物上清或其它生物標(biāo)本：1000g離心20分鐘，取上清即可檢測(cè)，或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
注：標(biāo)本溶血會(huì)影響后檢測(cè)結(jié)果，因此溶血標(biāo)本不宜進(jìn)行此項(xiàng)檢測(cè)。
人抗胃壁細(xì)胞抗體(AGPA/PCA)ELISA試劑盒原理需要而未提供的試劑和器材
1. 酶標(biāo)儀（450nm）
2. 高精度加樣器及槍頭：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3. 37℃恒溫箱
4. 蒸餾水或去離子水
試劑準(zhǔn)備
試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡后方可使用。
20×洗滌緩沖液的稀釋：蒸餾水按1：20稀釋，即1份20×洗滌緩沖液加19份蒸餾水。
人抗胃壁細(xì)胞抗體(AGPA/PCA)ELISA試劑盒原理操作步驟
1. 從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2. 設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔，標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL；
3. 樣本孔中加入待測(cè)樣本50μL；空白孔不加。
4. 除空白孔外，標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過(guò)氧化物酶（HRP）標(biāo)記的檢測(cè)抗體100μL，用封板膜封住反應(yīng)孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5. 棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液（350μL），靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復(fù)洗板5次（也可用洗板機(jī)洗板）。
6. 每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入終止液50μL，15min內(nèi)，在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。
人抗胃壁細(xì)胞抗體(AGPA/PCA)ELISA試劑盒原理注意事項(xiàng)
1. 嚴(yán)格按照規(guī)定的時(shí)間和溫度進(jìn)行溫育以保證準(zhǔn)確結(jié)果。所有試劑都必須在使用前達(dá)到室溫20-25℃。使用后立即冷藏保存試劑。
2. 洗板不正確可以導(dǎo)致不準(zhǔn)確的結(jié)果。在加入底物前確保盡量吸干孔內(nèi)液體。溫育過(guò)程中不要讓微孔干燥掉。
3. 消除板底殘留的液體和手指印，否則影響OD值。
4. 底物顯色液應(yīng)呈無(wú)色或很淺的顏色，已經(jīng)變藍(lán)的底物液不能使用。
5. 避免試劑和標(biāo)本的交叉污染以免造成錯(cuò)誤結(jié)果。
6. 在儲(chǔ)存和溫育時(shí)避免強(qiáng)光直接照射。
7. 平衡至室溫后再打開(kāi)密封袋以防水滴凝聚在冷板條上。
8. 任何反應(yīng)試劑不能接觸漂白溶劑或漂白溶劑所散發(fā)的強(qiáng)烈氣體。任何漂白成分都會(huì)破壞試劑盒中反應(yīng)試劑的生物活性。
9. 不能使用過(guò)期產(chǎn)品。
10. 如果可能傳播疾病，所有的樣品都應(yīng)管理好，按照規(guī)定的程序處理樣品和檢測(cè)裝置。
人抗胃壁細(xì)胞抗體(AGPA/PCA)ELISA試劑盒原理洗板方法
手工洗板方法：吸去（不可觸及板壁）或甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體；在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上鋪墊幾層吸水紙，酶標(biāo)板朝下用力拍幾次；將30（48T的20倍）倍濃縮洗滌液用蒸餾水30（48T的20倍）倍稀釋后備用。根據(jù)需要，重復(fù)此過(guò)程數(shù)次。
自動(dòng)洗板：如果有自動(dòng)洗板機(jī)，應(yīng)在熟練使用后再用到正式實(shí)驗(yàn)過(guò)程中。
人抗胃壁細(xì)胞抗體(AGPA/PCA)ELISA試劑盒原理相關(guān)產(chǎn)品：
| 大鼠降鈣素基因相關(guān)肽(CGRP)ELISA試劑盒 |
| *重鏈可變區(qū)(IgHV)ELISA試劑盒 |
| 蛇毒因子(CVF)ELISA試劑盒 |
| 人抗唾液腺導(dǎo)管組織抗體(SDA)ELISA試劑盒 |
| 小鼠可溶性瘦素受體(sLR)ELISA試劑盒 |
| 人抗心磷脂抗體IgG(ACA-IgG)ELISA試劑盒 |
| 小鼠吡啶交聯(lián)物(PY)ELISA試劑盒 |
| 人膠原吡啶交聯(lián)(PYD)ELISA試劑盒 |
| 小鼠*(VD)ELISA試劑盒 |
| 人抗突變型瓜氨酸波形蛋白抗體(MCV)ELISA試劑盒 |
| 大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子4(TIMP-4)ELISA試劑盒 |
| 禽腦脊髓炎(AE)ELISA試劑盒 |
| 兔子脂蛋白磷脂酶A2(Lp-PL-A2)ELISA試劑盒 |
| 人神經(jīng)髓鞘蛋白(p2)ELISA試劑盒 |
| 小鼠α1酸性糖蛋白(α1-AGP)ELISA試劑盒 |
| 兔子瘦素(LEP)ELISA試劑盒 |
| 魚類超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)ELISA試劑盒 |
| 小鼠糖蛋白130(gp130)ELISA試劑盒 |
| 人抗脫氧核糖核蛋白抗體(DNP-Ab)ELISA試劑盒 |
| 小鼠腎上腺素能a1A受體(ADRA1A)ELISA試劑盒 |
| 犬促黃體生成激素(LH)ELISA試劑盒 |
| 大鼠免疫球蛋白E(IgE)ELISA試劑盒 |
| 人抗皮膚抗體(ASA)ELISA試劑盒 |
| 人抗糖脂抗體(glycolipid)ELISA試劑盒 |
| 小鼠毒性休克綜合征毒素1(TSST-1)ELISA試劑盒 |