小鼠雜交瘤細(xì)胞;2E8E9E10F2價(jià)格冷凍保存方法一:冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(shí)(或隔夜)→液氮槽*儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二:冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3℃至–80℃以下,再放入液氮槽期儲(chǔ)存。-20℃不可超過(guò)1小時(shí),以防止冰晶過(guò)大,造成細(xì)胞大量死亡,也可跳過(guò)此步驟直接放入-80℃冰箱中,但存活率稍微降低一些。
細(xì)胞名稱 小鼠雜交瘤細(xì)胞;2E8E9E10F2價(jià)格
形態(tài)特性 淋巴母細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性 半貼壁生長(zhǎng)
特征特性 可產(chǎn)生單克隆抗體。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
傳代方法 1:
3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 C25
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
復(fù)蘇操作要點(diǎn):
1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準(zhǔn)備一個(gè)15mL無(wú)菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2)將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫(可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動(dòng)凍存管,使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細(xì)胞能盡快通過(guò)zui易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒(méi)入水中,BIU-87(人膀胱癌細(xì)胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi),將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細(xì)胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細(xì)胞懸液。
5)將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶?jī)?nèi),補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6)第二天觀察細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細(xì)胞長(zhǎng)至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過(guò)2~3次傳代,細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)
注意事項(xiàng):
1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請(qǐng)及時(shí)和我們。
2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書(shū),了解細(xì)胞相關(guān)信息,如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等。
3. 用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問(wèn)題貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落,將細(xì)胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)過(guò)夜,隔天再取出觀察。此時(shí)多數(shù)細(xì)胞均會(huì)貼壁,若細(xì)胞仍不能貼壁請(qǐng)用臺(tái)盼藍(lán)染色測(cè)定細(xì)胞活力,如果證實(shí)細(xì)胞活力正常,請(qǐng)將細(xì)胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng);如果染色結(jié)果顯示細(xì)胞無(wú)活力,請(qǐng)拍下照片及時(shí)和我們,信息確認(rèn)后我們?yōu)槟倜赓M(fèi)寄送一次。
4. 請(qǐng)客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)多余的培養(yǎng)基可收集備用,細(xì)胞傳代時(shí)可以一定比例和客戶自備的培養(yǎng)基混合,使細(xì)胞逐漸適應(yīng)培養(yǎng)條件。
5. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和公司技術(shù)部溝通交流。
6. 該細(xì)胞只能用于科研,不得用于臨床應(yīng)用。
公司是*的ATCC細(xì)胞供應(yīng)商,提供的報(bào)價(jià),咨詢,稱技術(shù)服務(wù),咨詢選購(gòu)。
Anti-Phospho-Stathmin (Ser16) /FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化原癌基因蛋白18抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Anti-SP-B/FITC 熒光素標(biāo)記肺表面活性蛋白B抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh AIMP2 AIMP2抗體 規(guī)格 0.2ml
Rabbit Anti-Guinea pig IgM/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488標(biāo)記的兔抗豚鼠IgM 0.1ml
phospho-GATA4 (Ser262) 英文名稱: 磷酸化GATA結(jié)合蛋白4抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Anti-Goat IgM/Cy3 Cy3標(biāo)記的兔抗羊IgM 規(guī)格 0.1ml
Anti-SP-B/FITC 熒光素標(biāo)記肺表面活性蛋白B抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
GABA(Human Gamma-aminobutyric acid) ELISA Kit 人γ氨基丁酸Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-MMP-7 基質(zhì)金屬蛋白酶-7抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh IQCD IQCD蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml
Human anti-typhus antibody ELISA Kit 人抗斑疹傷寒抗體 96T
PRPH2 英文名稱: 外周蛋白2抗體 0.2ml
phospho-beta Catenin (Ser33) 英文名稱: 磷酸化β-連環(huán)蛋白/β-連環(huán)素/β鏈接素抗體 0.1ml
Anti-MMP-7 基質(zhì)金屬蛋白酶-7抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Anti-NBS1/FITC 熒光素標(biāo)記DNA修復(fù)蛋白NBS1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Anti-Influenza A Virus H1/HRP 辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記羊抗季節(jié)性A型流感病毒H1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
鼠抗人甲胎蛋白抗體 Anti-AFP 0.1ml
Mouse Anti-human IgM/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5標(biāo)記的小鼠抗人IgM 0.1ml
GPR62 英文名稱: G蛋白偶聯(lián)受體GPR62蛋白抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh Proteasome 20S alpha 1+2+3+5+6+7 蛋白酶體PSMα1+2+3+5+6+7抗體 規(guī)格 0.2ml
Anti-Influenza A Virus H1/HRP 辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記羊抗季節(jié)性A型流感病毒H1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Anti-Neuro D/FITC 熒光素標(biāo)記抗神經(jīng)源分化因子抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Anti-VHL/FITC 熒光素標(biāo)記一種抑制因子抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
水通道蛋白-4抗體 Anti-AQP4 0.1ml
Goat Anti-human IgM/AP 堿性磷酸酶(AP)標(biāo)記的羊抗人IgM 0.1ml
GMCL1L 英文名稱: 細(xì)胞樣蛋白1樣蛋白抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh PRKCQ/PKC theta 蛋白激酶C theta抗體 規(guī)格 0.1ml
Anti-VHL/FITC 熒光素標(biāo)記一種抑制因子抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml