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上海撫生實業(yè)有限公司
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所 在 地上海市
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更新時間：2018-04-24 08:32:38瀏覽次數(shù)：220次
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小鼠皮膚成纖維樣細胞；C57/B6-S價格冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3℃至–80℃以下，再放入液氮槽期儲存。-20℃不可超過1小時，以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中，但存活率稍微降低一些。
小鼠皮膚成纖維樣細胞；C57/B6-S價格冷凍保存方法一：冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(或隔夜)→液氮槽*儲存。
冷凍保存方法二：冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3℃至–80℃以下，再放入液氮槽期儲存。-20℃不可超過1小時，以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中，但存活率稍微降低一些。
細胞名稱 小鼠皮膚成纖維樣細胞；C57/B6-S價格
形態(tài)特性 成纖維樣細胞
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細胞系來源于一正常雄性C57/B6小鼠的皮膚組織。2013年由中科院昆明細胞庫建立。
培養(yǎng)條件 DMEM-H：
Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS
傳代方法 1：
2傳代；3-4天一次
傳代情況 P2
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 熒光法（-）
STR -
同工酶 無
染色體
使用權(quán)限 A類 
復(fù)蘇操作要點：
1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細胞能盡快通過zui易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BIU-87(人膀胱癌細胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi)，將管內(nèi)細胞轉(zhuǎn)移至準備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細胞懸液。
5）將細胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細胞瓶內(nèi)，補加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細胞需經(jīng)過2~3次傳代，細胞活力恢復(fù)后才能進行后續(xù)的實驗
注意事項：
1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們。
2. 仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關(guān)信息，如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子等。
3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落，將細胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)過夜，隔天再取出觀察。此時多數(shù)細胞均會貼壁，若細胞仍不能貼壁請用臺盼藍染色測定細胞活力，如果證實細胞活力正常，請將細胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng)；如果染色結(jié)果顯示細胞無活力，請拍下照片及時和我們，信息確認后我們?yōu)槟倜赓M寄送一次。
4. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細胞培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶內(nèi)多余的培養(yǎng)基可收集備用，細胞傳代時可以一定比例和客戶自備的培養(yǎng)基混合，使細胞逐漸適應(yīng)培養(yǎng)條件。
5. 建議客戶收到細胞后前3天各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態(tài)，便于和公司技術(shù)部溝通交流。
6. 該細胞只能用于科研，不得用于臨床應(yīng)用。
公司是*的ATCC細胞供應(yīng)商，提供的報價，咨詢，稱技術(shù)服務(wù)，咨詢選購。
Anti-LH/FITC 熒光素標記抗人促黃體生成素抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Anti-STAT3 /FITC 熒光素標記信號轉(zhuǎn)導和轉(zhuǎn)錄激活因子3抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh AFAP/AFAP-110 微絲相關(guān)蛋白1抗體 規(guī)格 0.2ml
Rabbit Anti-Guinea pig IgG/HRP 辣根過氧化物酶標記的兔抗豚鼠IgG 0.1ml
GPKOW 英文名稱： G蛋白修補結(jié)構(gòu)域蛋白5抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Anti-dog IgG/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5標記的兔抗狗IgG 規(guī)格 0.1ml
Anti-STAT3 /FITC 熒光素標記信號轉(zhuǎn)導和轉(zhuǎn)錄激活因子3抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
ST(Human Serotonin) ELISA Kit 人血清素/血清胺Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-PLC beta 3/Phospholipase C beta 3 磷酯酶Cβ3抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh HINT1 *三聚體核苷結(jié)合蛋白1抗體 規(guī)格 0.2ml
GHRP ELISA Kit 大鼠生長激素釋放多肽 96T
PTOP 英文名稱： 腎上腺皮質(zhì)發(fā)育異常同源蛋白抗體 0.2ml
CYT 19 英文名稱： 甲基轉(zhuǎn)移酶cyt-19抗體 0.2ml
Anti-PLC beta 3/Phospholipase C beta 3 磷酯酶Cβ3抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Anti-LKB1/FITC 熒光素標記一種抑癌基因IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Anti-Phospho-Syk (Tyr525/526) /FITC 熒光素標記磷酸化非受體型*蛋白激酶抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh ADORA1 腺苷A1A受體抗體 規(guī)格 0.2ml
Rabbit Anti-Goat IgG/RBITC 羅丹明標記的兔抗羊IgG 0.3ml
GPR126 英文名稱： G蛋白偶聯(lián)受體126抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Anti-dog IgG 兔抗狗IgG 規(guī)格 1mg
Anti-Phospho-Syk (Tyr525/526) /FITC 熒光素標記磷酸化非受體型*蛋白激酶抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
PI3K ELISA Kit 大鼠磷酸肌醇3激酶Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-WNT10A 信號通路WNT10A抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Gab1 接頭蛋白Gab 1抗體 規(guī)格 0.1ml
GDNF(Human glial cell line-derived neurotrophic factor) ELISA KIT 人膠質(zhì)細胞系來源的神經(jīng)營養(yǎng)因子 96T
phospho-NUDC(Ser326) 英文名稱： 磷酸化細胞核分離基因C蛋白抗體 0.1ml
Argonaute 4 英文名稱： 真核翻譯起始因子2C4抗體 0.2ml
Anti-WNT10A 信號通路WNT10A抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
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