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上海撫生實業(yè)有限公司
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更新時間:2018-04-23 12:17:51瀏覽次數(shù):335次
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小鼠肺細(xì)胞;MML1價格冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3℃至–80℃以下,再放入液氮槽期儲存。-20℃不可超過1小時,以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中,但存活率稍微降低一些。
小鼠肺細(xì)胞;MML1價格冷凍保存方法一:冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(或隔夜)→液氮槽*儲存。
冷凍保存方法二:冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3℃至–80℃以下,再放入液氮槽期儲存。-20℃不可超過1小時,以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中,但存活率稍微降低一些。
細(xì)胞名稱 小鼠肺細(xì)胞;MML1價格
形態(tài)特性 成纖維細(xì)胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細(xì)胞系來源于一小鼠的肺組織。1984年由*昆明細(xì)胞庫建立。
培養(yǎng)條件 M-199:
with Earle's Balanced Salts Solution (EBSS) 15%NBS
傳代方法 1:
1傳代;3-4天一次
傳代情況 P2
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 熒光法(-)
STR
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
復(fù)蘇操作要點:
1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準(zhǔn)備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2)將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫(可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細(xì)胞能盡快通過zui易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BIU-87(人膀胱癌細(xì)胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi),將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細(xì)胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細(xì)胞懸液。
5)將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶內(nèi),補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6)第二天觀察細(xì)胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細(xì)胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代,細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實驗
注意事項:
1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們。
2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等。
3. 用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運輸問題貼壁細(xì)胞會有少量從瓶壁脫落,將細(xì)胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)過夜,隔天再取出觀察。此時多數(shù)細(xì)胞均會貼壁,若細(xì)胞仍不能貼壁請用臺盼藍(lán)染色測定細(xì)胞活力,如果證實細(xì)胞活力正常,請將細(xì)胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng);如果染色結(jié)果顯示細(xì)胞無活力,請拍下照片及時和我們,信息確認(rèn)后我們?yōu)槟倜赓M寄送一次。
4. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶內(nèi)多余的培養(yǎng)基可收集備用,細(xì)胞傳代時可以一定比例和客戶自備的培養(yǎng)基混合,使細(xì)胞逐漸適應(yīng)培養(yǎng)條件。
5. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和公司技術(shù)部溝通交流。
6. 該細(xì)胞只能用于科研,不得用于臨床應(yīng)用。
公司是*的ATCC細(xì)胞供應(yīng)商,提供的報價,咨詢,稱技術(shù)服務(wù),咨詢選購。
Human Acylation Stimulating Protein,ASP ELISA Kit 人酰化刺激蛋白Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-Substance P P物質(zhì)抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh Goat Anti-Mouse IgG/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5標(biāo)記的羊抗小鼠IgG 規(guī)格 0.1ml
MC Ab ELISA Kit 大鼠黑色素細(xì)胞抗體 96T
Phospho-NFKB1(Ser932) 英文名稱: 磷酸化細(xì)胞核因子p50/k基因結(jié)合核因子抗體 0.1ml
Bax beta 英文名稱: BCL2相關(guān)X蛋白抗體 0.2ml
Anti-Substance P P物質(zhì)抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
CA-2(Human carbonic anhydrase 2) ELISA Kit 人碳酸酐酶2Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-CD304/Neuropilin-1 神經(jīng)纖毛蛋白-1抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh IFN-β 干擾素β抗體 規(guī)格 0.1ml
IL-23(Mouse Interleukin 23)ELISA Kit 小鼠白介素23 96T
PTRH2 英文名稱: Bcl-2轉(zhuǎn)錄抑制因子1抗體 0.2ml
C1orf220 英文名稱: 1號染色體開放閱讀框220抗體 0.2ml
Anti-CD304/Neuropilin-1 神經(jīng)纖毛蛋白-1抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Anti-MCP-1/FITC 熒光素標(biāo)記巨噬細(xì)胞趨化蛋白-1抗體(人)IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Anti-rInsulin human monoclonal/FITC 熒光素標(biāo)記小鼠*單克隆抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh ACTH (1-39) 促腎上腺皮質(zhì)激素(1-39)抗體 規(guī)格 0.1ml
Rabbit Anti-Bovine IgM/PE-CY5 PE-CY5標(biāo)記的兔抗IgM 0.1ml
GPR109A 英文名稱: G蛋白偶聯(lián)受體109A抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Anti-Bov IgG/APC APC標(biāo)記的兔抗IgG 規(guī)格 0.1ml
Anti-rInsulin human monoclonal/FITC 熒光素標(biāo)記小鼠*單克隆抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
cFn(Human cellular fibronectin) ELISA kit 人細(xì)胞纖維連接蛋白Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-X protein (C-Terminus) 抗乙肝病毒X蛋白抗體(C端)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh HDHD2B/LHPP HDHD2B蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml
GsaR(Human gastrin receptor) ELISA Kit 人促胃液素受體 96T
Peroxiredoxin 2 英文名稱: 硫氧還蛋白過氧化物酶Ⅱ/巰基抗氧化蛋白抗體 0.1ml
C1orf149 英文名稱: 1號染色體開放閱讀框149抗體 0.2ml
Anti-X protein (C-Terminus) 抗乙肝病毒X蛋白抗體(C端)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
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