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上海撫生實業(yè)有限公司
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所 在 地上海市
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更新時間：2018-04-17 12:35:44瀏覽次數(shù)：214次
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小鼠胚胎成骨細胞前體細胞；MC3T3-E1價格冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3℃至–80℃以下，再放入液氮槽期儲存。-20℃不可超過1小時，以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中，但存活率稍微降低一些。
小鼠胚胎成骨細胞前體細胞；MC3T3-E1價格冷凍保存方法一：冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(或隔夜)→液氮槽*儲存。
冷凍保存方法二：冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3℃至–80℃以下，再放入液氮槽期儲存。-20℃不可超過1小時，以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中，但存活率稍微降低一些。
細胞名稱 小鼠胚胎成骨細胞前體細胞；MC3T3-E1價格
形態(tài)特性 成纖維細胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細胞有多個亞克隆，可以作為體外研究成骨細胞分化的良好模型，尤其是ECM信號通路的作用。
培養(yǎng)條件 DMEM-H：
Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS
傳代方法 1:6~1:8傳代；2~3天1次?！?/span>
傳代情況 C5
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養(yǎng)法（-）
STR -
同工酶
染色體 60~70
復蘇操作要點：
1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預熱；準備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復溫（可準備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細胞能盡快通過zui易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BIU-87(人膀胱癌細胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi)，將管內(nèi)細胞轉(zhuǎn)移至準備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細胞懸液。
5）將細胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細胞瓶內(nèi)，補加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經(jīng)過2~3次傳代，細胞活力恢復后才能進行后續(xù)的實驗
注意事項：
1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們。
2. 仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關(guān)信息，如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子等。
3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落，將細胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)過夜，隔天再取出觀察。此時多數(shù)細胞均會貼壁，若細胞仍不能貼壁請用臺盼藍染色測定細胞活力，如果證實細胞活力正常，請將細胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng)；如果染色結(jié)果顯示細胞無活力，請拍下照片及時和我們，信息確認后我們?yōu)槟倜赓M寄送一次。
4. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細胞培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶內(nèi)多余的培養(yǎng)基可收集備用，細胞傳代時可以一定比例和客戶自備的培養(yǎng)基混合，使細胞逐漸適應培養(yǎng)條件。
5. 建議客戶收到細胞后前3天各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態(tài)，便于和公司技術(shù)部溝通交流。
6. 該細胞只能用于科研，不得用于臨床應用。
公司是*的ATCC細胞供應商，提供的報價，咨詢，稱技術(shù)服務，咨詢選購。
Anti-SP-D/FITC 熒光素標記肺表面活性蛋白D抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
ERAB 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)Aβ相關(guān)結(jié)合蛋白(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
腺苷酸環(huán)化酶激活肽-27/38抗體 Anti-PACAP-27/38 0.2ml
phospho-Stathmin 1 (Ser24) 英文名稱： 磷酸化原癌基因蛋白18抗體 0.1ml
Eppin 英文名稱： 附睪蛋白酶抑制蛋白 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-NFKB1(Ser907) 磷酸化細胞核因子p50/k基因結(jié)合核因子抗體 規(guī)格 0.1ml
ERAB 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)Aβ相關(guān)結(jié)合蛋白(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
NTP，Neurual thread protein 神經(jīng)絲蛋白(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
Anti-CD44v7 CD44V7抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh p53AIP1 p53調(diào)節(jié)凋亡誘導蛋白1抗體 規(guī)格 0.2ml
OMD Kit Mouse 小鼠 Osteomodulin / OMD ELISA配對抗體 ELISA
TM4SF3 英文名稱： TM4SF3蛋白抗體 0.1ml
Cyclin K 英文名稱： 周期素K抗體 0.2ml
Anti-CD44v7 CD44V7抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
BPI-Ab(Human anti-Bactericidal permeability increasing protein antibody) ELISA Kit 人抗殺菌通透性蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-Insulin Receptor alpha 胰島素受體α抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Rhesus antibody Rh LKB1 *蛋白激酶LKB1抗體 規(guī)格 0.1ml
sLOX-1(Human Soluble Lectin-like oxidized low density lipoprotein receptor-1) ELISA Kit 人可溶性凝集素樣氧化低密度脂蛋白受體1 96T
FAM64A 英文名稱： 染色體分離調(diào)節(jié)蛋白1抗體 0.2ml
phospho-CaM I (Ser 102) 英文名稱： 磷酸化鈣調(diào)節(jié)素抗體 0.1ml
Anti-Insulin Receptor alpha 胰島素受體α抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Anti-PEA15/FITC 熒光素標記星形膠質(zhì)細胞PEA15抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
rec Protein A/FITC 熒光素標記重組純化蛋白AMulti-class antibodies規(guī)格： 0.3ml
大腸埃希桿菌O抗體 Anti-EPEC-IgG O 0.2ml
Donkey Anti-Guinea pig IgG/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350標記的驢抗豚鼠IgG 0.1ml
FGF1 英文名稱： 酸性成纖維細胞生長因子抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh phospho-Tau protein(Thr181) 磷酸化微管相關(guān)蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml
rec Protein A/FITC 熒光素標記重組純化蛋白AMulti-class antibodies規(guī)格： 0.3ml
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