肝癌細(xì)胞株;LM3價(jià)格冷凍保存方法一:冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(shí)(或隔夜)→液氮槽*儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二:冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3℃至–80℃以下,再放入液氮槽期儲(chǔ)存。-20℃不可超過1小時(shí),以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中,但存活率稍微降低一些。
細(xì)胞名稱 肝癌細(xì)胞株;LM3價(jià)格
形態(tài)特性 上皮樣
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性 該細(xì)胞屬保藏,其特征特性尚未公開。
培養(yǎng)條件 MEM-EBSS:
Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS
傳代方法 1:
3傳代,3-4天傳1次
傳代情況 C5
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權(quán)限 未定

復(fù)蘇操作要點(diǎn):
1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準(zhǔn)備一個(gè)15mL無菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2)將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫(可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動(dòng)凍存管,使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細(xì)胞能盡快通過zui易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BIU-87(人膀胱癌細(xì)胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi),將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細(xì)胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細(xì)胞懸液。
5)將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶?jī)?nèi),補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6)第二天觀察細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細(xì)胞長(zhǎng)至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代,細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)
注意事項(xiàng):
1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請(qǐng)及時(shí)和我們。
2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等。
3. 用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落,將細(xì)胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)過夜,隔天再取出觀察。此時(shí)多數(shù)細(xì)胞均會(huì)貼壁,若細(xì)胞仍不能貼壁請(qǐng)用臺(tái)盼藍(lán)染色測(cè)定細(xì)胞活力,如果證實(shí)細(xì)胞活力正常,請(qǐng)將細(xì)胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng);如果染色結(jié)果顯示細(xì)胞無活力,請(qǐng)拍下照片及時(shí)和我們,信息確認(rèn)后我們?yōu)槟倜赓M(fèi)寄送一次。
4. 請(qǐng)客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)多余的培養(yǎng)基可收集備用,細(xì)胞傳代時(shí)可以一定比例和客戶自備的培養(yǎng)基混合,使細(xì)胞逐漸適應(yīng)培養(yǎng)條件。
5. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和公司技術(shù)部溝通交流。
6. 該細(xì)胞只能用于科研,不得用于臨床應(yīng)用。
公司是*的ATCC細(xì)胞供應(yīng)商,提供的報(bào)價(jià),咨詢,稱技術(shù)服務(wù),咨詢選購(gòu)。
Anti-phospho-PAK3(pSer139)/FITC 熒光素標(biāo)記抗磷酸化p21激活激酶3抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Goat Anti-Bovine IgG 羊抗IgG (親和層析純化)Multi-class antibodies規(guī)格: 1mg
抗麻疹病毒抗體 anti-Measles virus of fusion protein 0.1ml
Goat Anti-rabbit IgG/APC APC標(biāo)記的羊抗兔IgG 0.1ml
FMO3 英文名稱: 二苯胺單加氧酶3抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-Stat2 (Tyr690) 磷酸化信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子2抗體 規(guī)格 0.1ml
Goat Anti-Bovine IgG 羊抗IgG (親和層析純化)Multi-class antibodies規(guī)格: 1mg
STM 人可溶性血栓調(diào)節(jié)蛋白Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-Phospho-DARPP32 (Thr75) 磷酸化多巴胺/cAMP調(diào)節(jié)磷蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh Neurocan 神經(jīng)粘蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml
human Prostaglandin D2-methoxime,PGD2-MOX ELISA KIT 人甲肟前列腺素D2 96T
TNFRSF12A 英文名稱: 壞死因子配體超家族成員12A抗體 0.1ml
CXCL5 英文名稱: 上皮中性粒細(xì)胞活化肽78抗體 0.1ml
Anti-Phospho-DARPP32 (Thr75) 磷酸化多巴胺/cAMP調(diào)節(jié)磷蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Anti-Notch3/FITC 熒光素標(biāo)記跨膜受體蛋白Notch-3抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Anti-TORC1/CRTC1/FITC 熒光素標(biāo)記環(huán)腺苷酸應(yīng)答元件結(jié)合蛋白轉(zhuǎn)錄共激活因子TORC1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
成骨特異性轉(zhuǎn)錄因子抗體 Anti-CBFA1/RUNX2 0.1ml
Goat Anti-Guinea pig IgG/Cy5.5 Cy5.5標(biāo)記的羊抗豚鼠IgG 0.1ml
FAM123B 英文名稱: 腎母細(xì)胞瘤X蛋白抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh POC5 細(xì)胞中心粒蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml
Anti-TORC1/CRTC1/FITC 熒光素標(biāo)記環(huán)腺苷酸應(yīng)答元件結(jié)合蛋白轉(zhuǎn)錄共激活因子TORC1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Anti-PDK1/PDPK1/FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠3磷酸肌醇依賴性蛋白激酶1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Streptavidin/FITC 熒光素標(biāo)記鏈霉親和素Multi-class antibodies規(guī)格: 0.3ml
表皮生長(zhǎng)因子受體-8抗體 Anti-EGFR-ⅤⅢ 0.2ml
Rabbit Anti-human sIgA/PE-Cy3 PE-Cy3標(biāo)記的兔抗人分泌型IgA 0.1ml
phospho-FADD (Ser194) 英文名稱: 磷酸化Fas死亡結(jié)構(gòu)域相關(guān)蛋白抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh phospho-TCF3/E2A/E47(Ser39) 磷酸化轉(zhuǎn)錄因子3抗體 規(guī)格 0.1ml
Streptavidin/FITC 熒光素標(biāo)記鏈霉親和素Multi-class antibodies規(guī)格: 0.3ml