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上海撫生實(shí)業(yè)有限公司
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更新時(shí)間:2018-04-17 10:59:23瀏覽次數(shù):243次
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人骨肉瘤細(xì)胞;SF-86品牌冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3℃至–80℃以下,再放入液氮槽期儲存。-20℃不可超過1小時(shí),以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中,但存活率稍微降低一些。
細(xì)胞名稱 人骨肉瘤細(xì)胞;SF-86品牌
形態(tài)特性 上皮細(xì)胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細(xì)胞屬保藏,其特征特性尚未公開。
培養(yǎng)條件 DMEM-H:
Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS
傳代方法 1:
3傳代,3-4天傳1次
傳代情況 C4
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權(quán)限 未定
公司是*的ATCC細(xì)胞供應(yīng)商,提供人骨肉瘤細(xì)胞;SF-86品牌的報(bào)價(jià),咨詢,稱技術(shù)服務(wù),咨詢選購。
冷凍保存方法一:冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(shí)(或隔夜)→液氮槽*儲存。
冷凍保存方法二:冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3℃至–80℃以下,再放入液氮槽期儲存。-20℃不可超過1小時(shí),以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中,但存活率稍微降低一些。
注意事項(xiàng):
1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時(shí)和我們。
2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等。
3. 用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題貼壁細(xì)胞會有少量從瓶壁脫落,將細(xì)胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)過夜,隔天再取出觀察。此時(shí)多數(shù)細(xì)胞均會貼壁,若細(xì)胞仍不能貼壁請用臺盼藍(lán)染色測定細(xì)胞活力,如果證實(shí)細(xì)胞活力正常,請將細(xì)胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng);如果染色結(jié)果顯示細(xì)胞無活力,請拍下照片及時(shí)和我們,信息確認(rèn)后我們?yōu)槟倜赓M(fèi)寄送一次。
4. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶內(nèi)多余的培養(yǎng)基可收集備用,細(xì)胞傳代時(shí)可以一定比例和客戶自備的培養(yǎng)基混合,使細(xì)胞逐漸適應(yīng)培養(yǎng)條件。
5. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和公司技術(shù)部溝通交流。
6. 該細(xì)胞只能用于科研,不得用于臨床應(yīng)用。
復(fù)蘇操作要點(diǎn):
1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準(zhǔn)備一個(gè)15mL無菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2)將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫(可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細(xì)胞能盡快通過zui易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BIU-87(人膀胱癌細(xì)胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi),將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細(xì)胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細(xì)胞懸液。
5)將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶內(nèi),補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6)第二天觀察細(xì)胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細(xì)胞長至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代,細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。
Anti-PDK1(phospho Y373 + Y376) /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠磷酸化3磷酸肌醇依賴性蛋白激酶1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Donkey Anti-human IgG/FITC 熒光素標(biāo)記驢抗人IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.3ml
早期反應(yīng)基因-1/應(yīng)急反應(yīng)生長基因1抗體 Anti-Egr-1 0.1ml
Goat Anti-human IgM/Gold 膠體金標(biāo)記的羊抗人IgM 1ml
Factor H 英文名稱: 補(bǔ)體因子H抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh Phospho-TBK1/NAK (Ser172) 磷酸化NF-κB活化激酶抗體 規(guī)格 0.1ml
Donkey Anti-human IgG/FITC 熒光素標(biāo)記驢抗人IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.3ml
HHV8/ORF K2/vIL-6(Human herpesvirus 8) 人類皰疹病毒8抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
Anti-CD163/M130 CD163抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh PAR3 非典型蛋白激酶C特定相互作用蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml
NOV Kit Human 人 CCN3 / NOV / IGFBP9 ELISA配對抗體 ELISA
TPA 英文名稱: 組織型纖溶酶原激活劑抗體 0.1ml
CD86 英文名稱: CD86抗體 0.1ml
Anti-CD163/M130 CD163抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
HAI-1(Hepatocyte Growth Factor Activator Inhibitor 1) 肝細(xì)胞生長因子激活物抑制因子抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
VNN2 VNN2 / Vanin-2 鼠單抗 (FITC) Human
Rhesus antibody Rh phospho-c-Raf(Ser338) 磷酸化原癌基因c-Raf抗體 規(guī)格 0.1ml
兔抗人IgG-F(ab)2純化抗體 1mg/10mg 國產(chǎn)
YY1 英文名稱: 核轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子YY1抗體 0.2ml
DPP9 英文名稱: 二肽基肽酶9抗體 0.2ml
VNN2 VNN2 / Vanin-2 鼠單抗 (FITC) Human
規(guī)格:96T/48T豬內(nèi)皮素1(ET-1)ELISA試劑盒英文名稱:Porcine endothelin 1,ET-1 ELISA Kit*
規(guī)格:96T/48T豬內(nèi)皮型一氧化氮合成酶(eNOS)ELISA試劑盒英文名稱:Porcine Endothelial nitric oxide synthase,eNOS ELISA Kit進(jìn)口/原裝
規(guī)格:96T/48T豬內(nèi)皮型一氧化氮合成酶3(eNOS-3)ELISA試劑盒英文名稱:Porcine Endothelial nitric oxide synthase 3,eNOS-3 ELISA Kit*
規(guī)格:96T/48T豬*(Cortisol)ELISA試劑盒英文名稱:Porcine Cortisol ELISA Kit進(jìn)口/原裝
規(guī)格:96T/48T豬皮質(zhì)酮/腎上腺酮(CORT)ELISA試劑盒英文名稱:Porcine Corticosterone,CORT ELISA Kit進(jìn)口/分裝
規(guī)格:96T/48T豬葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2(GLUT2)ELISA試劑盒 英文名稱:Porcine Glucose transporter 2,GLUT2 ELISA Kit*
PGM(Human Phosphoglucomutase) ELISA Kit 人磷酸葡萄糖變位酶Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-Phospho-NF-KappaB p105 (Ser933) 磷酸化細(xì)胞核因子p50/k基因結(jié)合核因子抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh IL-17D/IL-27 白介素-17D抗體 規(guī)格 0.1ml
apo-B100(Mouse apoprotein B100) ELISA Kit 小鼠載脂蛋白B100 96T
PKC mu 英文名稱: 蛋白激酶C mu型抗體 0.2ml
CCL28 英文名稱: 粘膜相關(guān)上皮趨化因子28抗體 0.1ml
Anti-Phospho-NF-KappaB p105 (Ser933) 磷酸化細(xì)胞核因子p50/k基因結(jié)合核因子抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
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