人結(jié)直腸癌肺轉(zhuǎn)移細(xì)胞;T84價(jià)格冷凍保存方法一:冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(shí)(或隔夜)→液氮槽*儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二:冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3℃至–80℃以下,再放入液氮槽期儲(chǔ)存。-20℃不可超過(guò)1小時(shí),以防止冰晶過(guò)大,造成細(xì)胞大量死亡,也可跳過(guò)此步驟直接放入-80℃冰箱中,但存活率稍微降低一些。
細(xì)胞名稱 人結(jié)直腸癌肺轉(zhuǎn)移細(xì)胞;T84價(jià)格
形態(tài)特性 上皮樣;多角
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性 表達(dá)神經(jīng)遞質(zhì)受體和肽類激素受體
培養(yǎng)條件 DMEM/F12(1:1): Ham's F12/DME Medium (DME H-16/F-12 50% Mixture w/o HEPES, with NEAA Medium) 10%FBS
傳代方法 1:
3傳代;3-4天一次
傳代情況 PN
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權(quán)限 B類

復(fù)蘇操作要點(diǎn):
1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準(zhǔn)備一個(gè)15mL無(wú)菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2)將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫(可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動(dòng)凍存管,使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細(xì)胞能盡快通過(guò)zui易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BIU-87(人膀胱癌細(xì)胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi),將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細(xì)胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細(xì)胞懸液。
5)將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶?jī)?nèi),補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6)第二天觀察細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細(xì)胞長(zhǎng)至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過(guò)2~3次傳代,細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)
注意事項(xiàng):
1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請(qǐng)及時(shí)和我們。
2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等。
3. 用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問(wèn)題貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落,將細(xì)胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)過(guò)夜,隔天再取出觀察。此時(shí)多數(shù)細(xì)胞均會(huì)貼壁,若細(xì)胞仍不能貼壁請(qǐng)用臺(tái)盼藍(lán)染色測(cè)定細(xì)胞活力,如果證實(shí)細(xì)胞活力正常,請(qǐng)將細(xì)胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng);如果染色結(jié)果顯示細(xì)胞無(wú)活力,請(qǐng)拍下照片及時(shí)和我們,信息確認(rèn)后我們?yōu)槟倜赓M(fèi)寄送一次。
4. 請(qǐng)客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)多余的培養(yǎng)基可收集備用,細(xì)胞傳代時(shí)可以一定比例和客戶自備的培養(yǎng)基混合,使細(xì)胞逐漸適應(yīng)培養(yǎng)條件。
5. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和公司技術(shù)部溝通交流。
6. 該細(xì)胞只能用于科研,不得用于臨床應(yīng)用。
公司是*的ATCC細(xì)胞供應(yīng)商,提供的報(bào)價(jià),咨詢,稱技術(shù)服務(wù),咨詢選購(gòu)。
規(guī)格:96T/48T小鼠Ⅰ型前膠原C末端肽(CⅠCP)ELISA試劑盒英文名稱:Mouse cross-linked C-opeptides of Type Ⅰ collagen,CⅠCP ELISA Kit進(jìn)口/分裝
規(guī)格:96T/48T小鼠Ⅰ型前膠原羧基端肽(PⅠCP)ELISA試劑盒英文名稱:Mouse Carboxyterminal propeptide of type Ⅰ procollagen,PⅠCP ELISA Kit進(jìn)口/原裝
規(guī)格:96T/48T小鼠Ⅱ型膠原(Col Ⅱ)ELISA試劑盒英文名稱:Mouse Collagen Type Ⅱ,Col Ⅱ ELISA Kit*
規(guī)格:96T/48T小鼠Ⅲ型前膠原肽(PⅢNP)ELISA試劑盒英文名稱:Mouse N-terminal procollagen Ⅲ propeptide,PⅢNP ELISA Kit進(jìn)口/分裝
規(guī)格:96T/48T小鼠Ⅳ型膠原(Col Ⅳ)ELISA試劑盒英文名稱:Mouse Collagen Type Ⅳ,Col Ⅳ ELISA Kit進(jìn)口/原裝
規(guī)格:96T/48T小鼠apelin 12(AP12)ELISA試劑盒英文名稱:Mouse apelin 12,AP12 ELISA Kit進(jìn)口/分裝
Anti-Phospho-Rictor (Thr1135)/FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化雷帕霉素靶蛋白復(fù)合體2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Leupeptin 亮抑酶肽Multi-class antibodies規(guī)格: 1mg
淋巴管內(nèi)皮透明質(zhì)酸受體抗體 anti-LYVE-1 0.1ml
SERTAD2 英文名稱: 調(diào)控周期蛋白依賴蛋白激酶SEI2抗體 0.2ml
FRMD1 英文名稱: FRMD1蛋白抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-PKC delta (Tyr311) 磷酸化蛋白激酶C亞性D型抗體 規(guī)格 0.1ml
Leupeptin 亮抑酶肽Multi-class antibodies規(guī)格: 1mg
TGF Beta 2 人轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子 β 2Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-Contactin-6 NB-3神經(jīng)粘附蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Noggin 指(趾)關(guān)節(jié)粘連NOG蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml
Human beta2 glycoprotein, Beta2-GP ELISA Kit 人β2糖蛋白 96T
TSH 英文名稱: 促甲狀腺素抗體 0.1ml
C1orf109 英文名稱: 1號(hào)染色體開放閱讀框109抗體 0.2ml
Anti-Contactin-6 NB-3神經(jīng)粘附蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Anti-TNF- Alpha /FITC 熒光素標(biāo)記壞死因子-α抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
PACAP receptor-I 腺苷酸環(huán)化酶激活肽受體(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
兔抗人TIGAR蛋白抗體 Anti-TIGAR humen 0.1ml
SCEL 英文名稱: SCEL蛋白抗體 0.2ml
ERCC1 英文名稱: DNA切除修復(fù)蛋白1抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-KLF5(Ser275) 磷酸化KLF5抗體 規(guī)格 0.1ml
PACAP receptor-I 腺苷酸環(huán)化酶激活肽受體(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg